Spezifische Mutagenese der NADH:Ubichinon-Oxidoreduktase in Neurospora crassa:
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Format: | Abschlussarbeit Buch |
Sprache: | German |
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1995
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INHALTSVERZEICHNIS
1.
ZUSAMMENFASSUNG
3
2.
EINLEITUNG
5
2.1
DIE
MITOCHONDRIALE
OXIDATIVE
PHOSPHORYLIERUNG
5
2.2
DIE
MITOCHONDRIALE
NADH:UBICHINON-OXIDOREDUKTASE
(KOMPLEX
I)
7
2.3
DER
PILZ
NEUROSPORA
CRASSA
12
2.4
THEMA
DER
ARBEIT
18
3.
MATERIAL
UND
METHODEN
19
3.1
MEDIEN
UND
LOESUNGEN
19
3.2
MIKROORGANISMEN,
VEKTOREN
UND
OLIGONUKLEOTIDE
20
3.3
ANZUCHT
VON
MIKROORGANISMEN
21
3.4
TRANSFORMATION
VON
MIKROORGANISMEN
22
3.5
DNA-ISOLIERUNG
23
3.6
VERSCHIEDENE
MOLEKULARBIOLOGISCHE
METHODEN
25
3.7
ISOLATION
VON
MITOCHONDRIEN
UND
ZUCKERGRADIENTEN-ZENTRIFUGATION
27
3.8
UNTERSUCHUNG
RADIOAKTIV
MARKIERTER
PROTEINE
29
3.9
VERSCHIEDENE
ANALYTISCHE
METHODEN
29
4.
ERGEBNISSE
32
4.1
DIE
PRIMAERSTRUKTUR
UND
DIE
SEQUENZ
DES
GENS
DER
10,4
KDA-UNTEREINHEIT
DES
KOMPLEX
I
32
4.2
INAKTIVIERUNG
DER
GENE
NUOL0.4
UND
NUO20.9
34
4.3
WACHSTUM
DER
MUTANTEN
NUOLO.
4
UND
NUO20.
9
39
4.4
ESR-SPEKTROSKOPIE
AN
MITOCHONDRIEN
UND
MITOCHONDRIENMEMBRANEN
39
4.5
ASSEMBLIERUNG
DES
KOMPLEX
LINDEN
MUTANTEN
41
4.6
ENTWICKLUNG
EINES
SYSTEMS
ZUR
SPEZIFISCHEN
MUTAGENESE
MIT
DEM
HERBIZID
BASTA
ALS
SELEKTIONSMARKER
47
4.7
EXPRESSION
VON
KOMPLEX
I-UNTEREINHEITEN
IN
DEN
MUTANTEN
48
4.8
EXPRESSION
DES
ACYL-CANIER-PROTEINS
AUS
A.
NIGER
IN
N.
CRASSA
53
4.9
PROMOTOR-GEN-FUSIONEN
ZUR
EXPRESSION
HETERO
UND
HOMOLOGER
GENE
55
5.
DISKUSSION
58
5.1
GENINAKTIVIERUNG
IN
A.
CRASSA
58
5.2
DIE
GENINAKTIVIERUNG
ERMOEGLICHT
EINEN
EINBLICK
IN
DIE
ASSEMBLIERUNG
VON
KOMPLEX
I
60
5.3
WELCHE
FUNKTION
HABEN
DIE
INAKTIVIERTEN
MEMBRANARM-UNTEREINHEITEN?
63
5.4
EIN
NEUES
SYSTEM
ZUR
BASEN
SPEZIFISCHEN
MUTAGENESE
VON
N.
CRASSA
65
5.5
BASTA-RESISTENZ
IST
ALS
HETEROLOGER
TRANSFORMATIONSMARKER
GEEIGNET
66
5.6
EXPRESSIONSVEKTOREN
FUER
N.
CRASSA
67
5.7
DER
MUTIERTE
KOMPLEX
I
KANN
DURCH
GEEIGNETE
EXPRESSIONSVEKTOREN
WIEDER
RESTAURIERT
WERDEN
68
5.8
DIE
KONSTRUKTION
VON
EXPRESSIONSVEKTOREN
DURCH
IN
FRAME
DNA-FUSION
69
5.9
DIE
EXPRESSION
HETEROLOGER
ACPS
IN
N.
CRASSA
KANN
HINWEISE
AUF
DIE
FUNKTION
DES
MTACP
LIEFERN
72
5.10
WIE
KANN
KOMPLEX
I
IN
A.
CRASSA
DURCH
PUNKTMUTATIONEN
ANALYSIERT
WERDEN?
73
6.
LITERATUR
75 |
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