Empfindlichkeit Retrovirus-infizierter Zellen gegenüber endogenen und exogenen Karzinogenen:
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1996
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INHALTSVERZEICHNIS
1.
EINLEITUNG
1
2.
SCHRIFTUM
2.1.
RETROVIREN
3
2.1.1.
ENDOGENE
RETROVIREN
DER
MAUS
3
2.1.2.
EXOGENE
RETROVIREN
DER
MAUS
5
2.1.3.
MECHANISMEN
DER
RETROVIRALEN
ONKOGENESE
6
2.2.
GENE
8
2.2.1.
DAS
C-MYC
PROTOONKOGEN
8
2.2.2.
DAS
P53
TUMORSUPPRESSORGEN
11
2.3.
DAS
STRAHLENINDUZIERTE
OSTEOSARKOM
14
3.
EIGENE
UNTERSUCHUNGEN
3.1.
MATERIAL
UND
METHODEN
3.1.1.
ZELLKULTUR
17
3.1.1.1.
ZELLEN
17
3.1.1.2.
ALLGEMEINE
ZELLKULTURTECHNIKEN
18
3.1.1.3. ETABLIERUNG
VON
KONDYLUS-MONOLAYER
(KM-)
ZELLKULTUREN
19
3.1.1.4.
MYKOPLASMENNACHWEIS
20
3.1.2.
VIREN
22
3.1.2.1.
RETROVIRUSINFEKTION
VON
ZELLEN
22
3.1.2.2.
NACHWEIS
DER
VIRUSINFEKTION
22
3.1.3.
ZELLWACHSTUM
23
3.1.4.
BESTIMMUNG
DES
KLONBILDUNGSWERTES
(PLATING
EFFICIENCY)
24
3.1.5. ABHAENGIGKEIT
DER
NEOPLASTISCHEN
TRANSFORMATION
VON
DER
SERUMKONZENTRATION
25
3.1.6.
BESTRAHLUNG
25
3.1.6.1.
DOSISLEISTUNGSBERECHNUNG
3.1.6.2.
BESTIMMUNG
DER
STRAHLENSENSITIVITAET
26
3.1.6.3.
UNTERSUCHUNG
DER
FOCUSBILDUNG
(STANDARD
FOCUS
FORMATION
ASSAY)
26
3.1.7.
NACHWEIS
DER
ZELLTRANSFORMATION
27
3.1.7.1
KRITERIEN
TRANSFORMIERTER
ZELLEN
27
3.1.7.2.
TUMORIGENITAET
VON
ZELLEN
IN
SOFTAGAR
28
3.1.7.3.
TUMORIGENITAET
VON
ZELLEN
IM
TIERVERSUCH
28
3.1.8.
STATISTISCHE
AUSWERTUNGEN
29
3.1.8.1.
BERECHNUNG
DER
TRANSFORMATIONSHAEUFIGKEIT
29
3.1.8.2.
BERECHNUNG
DER
TRANSFORMATIONSFREQUENZ
30
3.1.9.
MOLEKULARBIOLOGISCHE
UNTERSUCHUNGEN
31
3.1.9.1.
ISOLIERUNG
ZELLULAERER
DNA
31
3.1.9.2.
KONZENTRATIONSBESTIMMUNG
DER
DNA
32
3.1.9.3.
SPALTUNG
DER
DNA
DURCH
RESTRIKTIONSENZYME
32
3.1.9.4.
FAELLUNG
DER
DNA
33
3.1.9.5.
GELELEKTROPHORESE
33
3.1.9.6.
DNA-TRANSFER
AUF
NITROZELLULOSEFILTER
34
3.1.9.7.
NUKLEINSAEUREHYBRIDISIERUNG
34
3.2.
ERGEBNISSE
3.2.1.
CHARAKTERISIERUNG
VON
KM
OSTEOBLASTEN
VORLAEUFERZELLINIEN
36
3.2.1.1.
GENOTYP
36
3.2.1.2.
MORPHOLOGIE
40
3.2.1.3.
WACHSTUM
VON
SPONTAN
TRANSFORMIERTEN
KM1
UND
KMMYCL
-ZELLEN
IM
WEICHAGAR
UND
IM
TIERVERSUCH
49
3.2.1.4.
WACHSTUMSEIGENSCHAFTEN
49
3.2.2.
EINFLUSS
DER
RETROVIRUSINFEKTION
AUF
KM
UND
KMMYC-ZELLEN
51
3.2.2.1.
MORPHOLOGIE
51
3.2.2.2.
WACHSTUMSEIGENSCHAFTEN
54
3.2.3.
ABHAENGIGKEIT
DES
TRANSFORMATIONSRISIKOS
VON
EXOGENEN
UND
ENDOGENEN
FAKTOREN
56
3.2.3.1.
ERMITTLUNG
DER
OPTIMALEN
EINSAATDICHTE
UND
STRAHLENDOSIS
56
3.2.3.2. EINFLUSS
DES
C-MYC-K
ONKOGENS
AUF
DAS
TRANS
FORMATIONSRISIKO
VON
OSTEOBLASTEN-VORLAEUFERZELLEN
58
3.2.3.3.
EINFLUSS
EINER
RETROVIRUSINFEKTION
AUF
DAS
TRANS
FORMATIONSRISIKO
VON
OSTEOBLASTEN-VORLAEUFERZELLEN
64
3.2.3.4.
EINFLUSS
VON
A-STRAHLUNG
AUF
DAS
TRANSFORMATIONS
RISIKO
VON
OSTEOBLASTEN-VORLAEUFERZELLEN
66
3.2.3.5.
EINFLUSS
DER
KOMBINATION
EINER
RETROVIRUS-INFEKTION
UND
DER
A-STRAHLUNG
AUF
DAS
TRANSFORMATIONSRISIKO
VON
OSTEOBLASTEN-VORLAEUFERZELLEN
68
4.
DISKUSSION
71
5.
ZUSAMMENFASSUNG
80
SUMMARY
81
6.
LITERATURVERZEICHNIS
82
7.
ANHANG
91
7.1.
ZUSAMMENSETZUNG
DER
VERWENDETEN
LOESUNGEN
91
7.2.
ABKUERZUNGEN
93 |
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