Untersuchungen zur Nutzung des direkten Gentransfers für die Transformation von Zuckerrübe (Beta vulgaris L.):
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Format: | Buch |
Sprache: | German |
Veröffentlicht: |
Clausthal-Zellerfeld
Papierflieger
1996
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Ausgabe: | 1. Aufl. |
Schlagworte: | |
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Beschreibung: | Zugl.: Braunschweig, Techn. Univ., Diss., 1995 |
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INHALT
SEITE
I
EINLEITUNG
.1
1.1.
GENTRANSFERTECHNIKEN
UND
IHRE
ANWENDBARKEIT
BEI
DER
ZUCKERRUEBE
.
.
2
1.2.
FUNKTIONSWEISE
VON
HELIUM
UND
MICROTARGETING-KANONE
.
.
8
1.3.
SPROSSAPIKALMERISTEME
ALS
TARGET
FUER
DEN
DIREKTEN
GENTRANSFER
11
II
MATERIAL
UND
METHODEN
.15
2.1.
GERAETE
.
15
2.
2.
CHEMIKALIEN
.
16
2.3.
MEDIEN
.
.
16
2.
4.
PLASMIDE
.
.
.
.
19
2.4.1.
AUFBAU
.
19
2.4.2.
VERMEHRUNG
UND
ISOLIERUNG
.
.
24
2.
5.
HERKUNFT
UND
KULTIVIERUNG
DES
PFLANZENMATERIALS
.
27
2.5.1.
ZUCKERRUEBE
27
2.5.1.1.
ZELLSUSPENSION
.
27
2.5.1.2.
UNREIFE
EMBRYONEN
.
27
2.5.1.3.
REIFE
EMBRYONEN
UND
KEIMPFLANZEN
29
2.5.1.4.
SPROSSREGENERATION
AUS
ZUCKERRUEBEN-KEIM
LINGSHAELFTEN
30
2.5.1.5.
BLATTSTUECKCHEN,
PETIOLEN
UND
ADVENTIVSPROSSE
.
31
2.5.2.
ARABIDOPSIS
.
31
2.
6.
HISTOLOGISCHE
TECHNIKEN
'
.
.32
2.6.1.
HANDSCHNITTE
.
32
2.6.2.
SEMIDUENNSCHNITTE
32
2.6.3.
ULTRADUENNSCHNITTE
.
32
2.6.4.
ERHOEHUNG
DER
GEWEBE-TRANSPARENZ
33
2.
7.
RASTERELEKTRONENMIKROSKOPIE
.
33
2.8.
ELEKTROPORATION
.
.
.
34
2.9.
PARTIKELBESCHUSS
.
35
2.9.1.
HELIUMKANONE
.
35
2.9.1.1.
PARTIKELPRAEPARATION
.
35
2.9.1.2.
BESCHUSS
VON
ARABIDOPSIS-BLAETTEM
.
37
2.9.1.3.
BESCHUSS
VON
ZUCKERRUEBEN-SUSPENSION
.
38
2.9.1.4.
BESCHUSS
VON
ZUCKERRUEBEN-EMBRYONEN
UND
-KEIMPFLANZEN.
.
.
38
2.9.2.
MICROTARGETING-KANONE
.
39
2.9.2.1.
PARTIKELPRAEPARATION
39
2.9.2.2.
BESCHUSS
VON
APIZES
REIFER
ZUCKERRUEBEN
EMBRYONEN
.
40
2.10.
GUS-TEST
.
.
.
.
40
2.11.
STATISTIK
.
42
III
ERGEBNISSE
.
43
3.1.
VORBEREITENDE
EXPERIMENTE
.
43
3.1.1.
EIGNUNG
VON
BLATTADVENTIVSPROSSEN
FUER
DEN
DIREKTEN
GENTRANSFER
.
43
3.1.2.
KEIMUNGSVERHALTEN
VON
ISOLIERTEN
ZUCKERRUE
BENSAMEN
IN
VITRO
.
.
45
3.1.3.
REGENERATION
AUS
ZUCKERRUEBEN-KEIMLINGSHAELFTEN
.
46
3.1.4.
REGENERATION
UNREIFER
EMBRYONEN
49
3.1.5.
BAU
UND
ENTWICKLUNG
DES
ZUCKERRUEBENAPEX
WAEHREND
DER
KEIMUNG
.
49
3.2.
ELEKTROPORATION
VON
ZUCKERRUEBENGEWEBE
.
54
3.3.
PARTIKELBESCHUSS
.
59
3.3.1.
HELIUMKANONE
.
59
3.3.1.1.
PARTIKEL-PENETRATION
.
59
3.3.1.1.1.
PARTIKEL-PENETRATION
IN
ARABIDOPSIS
WURZELN
.
59
3.3.1.1.2.
PARTIKELPENETRATION
IN
APIZES
VON
ZUCKERRUEBEN-EMBRYONEN
.
62
3.3.1.2.
GENEXPRESSION
NACH
BESCHUSS
MIT
GUS
KONSTRUKTEN
.
63
3.3.1.2.1.
ARABIDOPSIS-BLAETTER
.
63
3.3.1.2.2.
ZUCKERRUEBEN-SUSPENSION
.
66
3.3.1.2.3.
EMBRYONEN/KEIMPFLANZEN
.
76
3.3.2.
MICROTARGETING-KANONE
.
87
3.3.2.1.
BESCHUSS
REIFER
EMBRYONEN
.
87
3.3.2.1.1.
PENETRATIONSVERSUCHE
.
87
3.3.2.1.2.
TRANSIENTE
EXPRESSION
.
90
IV
V
VI
3.3.2.2.
BESCHUSS
UNREIFER
EMBRYONEN
DISKUSSION
.
.
ZUSAMMENFASSUNG
.
LITERATUR
.
97
99
123
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