Wirkung von UV-B-Strahlung und Ozon auf den Sekundärstoffwechsel der Kiefer (Pinus sylvestris L.):
Gespeichert in:
1. Verfasser: | |
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Format: | Buch |
Sprache: | German |
Veröffentlicht: |
München
Diss.-Verl. NG-Kopierladen
1996
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Schlagworte: | |
Online-Zugang: | Inhaltsverzeichnis |
Beschreibung: | Zugl.: München, Univ., Fak. für Biologie, Diss., 1996 |
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INHALT
I.
EINLEITUNG
.
1
1.
TERRESTRISCHE
UV-B
STRAHLUNG
UND
STRATOSPHAERISCHES
OZON
.
.
1
2.
WIRKUNG
VON
UV-B
STRAHLUNG
AUF
PFLANZEN
.
S
3.
TROPOSPHAERISCHES
OZON
.
9
4.
WIRKUNG
VON
OZON
AUF
PFLANZEN
.
11
5.
KOMBINIERTE
WIRKUNG
VON
UV-B
UND
OZON
AUF
PFLANZEN.
.
14
6.
DIE
BEDEUTUNG
PHENOLISCHER
SEKUNDAERSTOFFE
IN
PFLANZEN
.
15
7.
DER
PHENYLPROPANSTOFLWECHSEL
.
16
8.
DER
FLAVONOID
UND
STILBEN-STOFFWECHSEL
.
20
9.
DIE
KIEFER
(PINUS
SYLVESTRIS
L.)
.
21
10.
THEMENSTELLUNG
.
23
II.
MATERIAL
UND
METHODEN
.
24
1.
GERAETE
.
.
.
------------
-------------------------
24
2.
CHEMIKALIEN.
.
25
2.1.
LOESUNGSMITTEL
.
25
2.2.
REFERENZSUBSTANZEN
.
25
2.3.
RADIOCHEMIKALIEN
.
26
2.4.
SONSTIGE
CHEMIKALIEN
.
26
3.
PFLANZENMATERIAL
-
KIEFERNKEIMLINGE.
----------------------------------------------
----
-
27
3.1.
HERKUNFT
.
27
3.2.
ANZUCHT
.
27
4.
EXPOSITIONSEINRICHTUNGEN.-.
-
.29
4.1.
SONNENSIMULATOR
ZUR
BEHANDLUNG
MIT
UV-B
.
29
4.1.1.
GERAET
.
29
4.1.2.
BEHANDLUNG
.
31
4.2.
EXPOSITIONSKAMMEM
ZUR
GLEICHZEITIGEN
BEHANDLUNG
MIT
UV-B
UND
OZON
.
33
4.2.1.
GERAET
.
33
4.2.2.
BEHANDLUNG
.
35
INHALT
II
4.2.3.
BONITUR
SICHTBARER
SCHAEDEN
.
40
5.
ANALYTIK
DER
PHENOLISCHEN
INHALTSSTOFFE
.
40
5.1.
ANALYTISCHE
EXTRAKTION
DER
METHANOL-LOESLICHEN
INHALTSSTOFFE
.
40
5.2.
HPLC-ANALYTIK
PHENOLISCHER
INHALTSSTOFFE
.
41
5.2.1.
EINFACHE
PHENOLISCHE
VERBINDUNGEN
(METHANOLGRADIENT)
.
41
5.2.2.
DIACYLIERTE
FLAVONOLGLUKOSIDE
(ACETONITRILGRADIENT)
.
42
5.3.
ANALYTIK
ZELLWANDGEBUNDENER
PHENOLISCHER
INHALTSSTOFFE
.
43
5.3.1.
ZELLWANDPRAEPARATION
.
43
5.3.2.
ALKALISCHE
HYDROLYSE
DER
ZELLWAENDE
BEI
RAUMTEMPERATUR
.
43
5.4.
ANALYTIK
VON
LIGNINEN
ALS
THIOGLYKOLSAEURE-DERIVATE
(LTGA)
.
44
6.
PULSMARKIERUNG
UV-B
INDUZIERTER
INHALTSSTOFFE
.
44
6.1.
APPLIKATION
VON
L-[U
14
C]PHENYLALANIN
.
44
6.2.
AUFARBEITUNG
DER
RADIOAKTIV
MARKIERTEN
KIEFEMKEIMLINGE
.
46
6.3.
RADIOAKTIVITAETSBESTIMMUNG
METHANOL-LOESLICHER
INHALTSSTOFFE
.
46
6.3.1.
MESSUNG
IM
SZINTILLATIONSZAEHLER
.
46
6.3.2.
DIREKTE
MESSUNG
IN
HPLC-ELUATEN
.
46
6.4.
BESTIMMUNG
ZELLWANDGEBUNDENER
RADIOAKTIVITAET
.
47
7.
PRAEPARATIVE
ISOLIERUNG
UV-B
INDUZIERTER
INHALTSSTOFFE
.
47
7.1.
EXTRAKTION
.
47
7.2.
ISOLIERUNG
.
48
7.2.1.
HSCCC
.
48
7.2.2.
PRAEPARATIVE
HPLC
.
50
7.2.3.
GELCHROMATOGRAPHIE
AN
SEPHADEX
LH-20
.
51
8.
CHARAKTERISIERUNG
UV-B
INDUZIERTER
INHALTSSTOFFE
.
51
8.1.
UV-SPEKTROSKOPIE
.
51
8.2.
FLUORESZENZSPEKTROSKOPIE
.
51
8.3.
NMR-SPEKTROSKOPIE
.
52
8.4.
MASSENSPEKTROMETRIE
.
54
8.4.1.
FLUGZEIT-SEKUNDAER-IONEN-MASSENSPEKROMETRIE
(TOF-SIMS)
.
54
8.4.2.
ELEKTROSPRAY-MASSENSPEKTROMETRIE
.
54
8.4.3.
TANDEM
ELEKTROSPRAY-MASSENSPEKTROMETRIE
(ES-MS/MS)
.
55
8.4.4.
HPLC-MS
UND
-MS/MS
.
55
8.5.
SELEKTIVE
ABBAUREAKTIONEN
.
57
8.5.1
ALKALISCHE
HYDROLYSE
.
57
INHALT
III
8.5.2.
METHANOLYSE
.
57
8.6.
SYNTHESE
VON
P-CUMARSAEUREMETHYLESTER
.
57
9.
BESTIMMUNG
VON
ENZYMAKTIVITAETEN
_
.
_
.
_
_
.
59
9.1.
HERSTELLUNG
VON
ROHEXTRAKTEN
.
59
9.2.
PROTEINBESTIMMUNG
.
59
9.3.
BESTIMMUNG
DER
PHENYLALANIN-AMMONIAK-LYASE
(PAL,
EC
4.3.1.5.)
.
60
9.4.
BESTIMMUNG
DER
CHALKONSYNTHASE
(CHS;
EC
5.5.1.6.2.)
UND
STILBENSYNTHASE
(STS,
EC
1.1.1.195.)
.
61
10.
MIKROSPEKTRALPHOTOMETRIE
.
61
10.1.
HERSTELLUNG
DER
MIKROSKOPISCHEN
PRAEPARATE
.
61
10.2.
MIKROSKOPISCHE
UV/VIS
SPEKTROSKOPIE
.
62
11.
LASER-SCANNING-MIKROSKOPIE
.
62
11.1.
HERSTELLUNG
DER
MIKROSKOPISCHEN
PRAEPARATE
.
62
11.2.
FLUORESZENZSPEKTROSKOPIE
.
62
11.3.
LASER-SCANNING-MIKROSKOPIE
.
63
11.4.
BILDVERARBEITUNG
.
63
12.
FASEROPTISCHE
LICHTMESSUNG
.
64
III.
ERGEBNISSE
.66
1.
WIRKUNG
VON
UV-B
STRAHLUNG
AUF
DEN
SEKUNDAERSTOFFWECHSEL
VON
KIEFERNKEIMLINGEN.
66
1.1.
ANALYTIK
DER
PHENOLISCHEN
INHALTSSTOFFE
.
66
1.2.
ISOLIERUNG
UV-B
INDUZIERTER
PHENOLISCHER
INHALTSSTOFFE
.
68
1.3.
CHARAKTERISIERUNG
UV-B
INDUZIERTER
INHALTSSTOFFE
.
70
1.3.1.
UV-SPEKTROSKOPIE
.
70
1.3.2.
FLUORESZENZSPEKTROSKOPIE
.
71
1.3.3.
NMR-SPEKTROSKOPIE
.
71
1.3.3.1.
ID-'H-NMR
UND
2D
1
H,
1
H-COSY-NMR-SPEKTROSKOPIE
.
71
1.3.3.2.
'H-KEM-OVERHAUSER-EFFEKT
.
83
1.33.3.
1D
13
C-NMR
UND
2D-'H,
13
C-COSY-NMR-SPEKTROSKOPIE
.
90
1.3.4.
MASSENSPEKTROMETRIE
.
96
1.3.4.1.
FLUGZEIT-SEKUNDAER-IONEN-MASSENSPEKTROMETRIE
(TOF-SIMS)
.
96
INHALT
IV
I.3.4.2.
ELEKTROSPRAY-MASSENSPEKTROMETRIE
.
97
1.3.4.3.
TANDEM
ELEKTROSPRAY-MASSENSPEKTROMETRIE
(ES-MS/MS)
.
99
1.3.4.4.
HPLC-MS
UND-MS/MS
.
102
1.3.5.
SELEKTIVE
ABBAUREAKTIONEN
.
109
1.4.
UV-B
INDUKTION
VON
METHANOL-LOESLICHEN
PHENOLISCHEN
INHALTSSTOFFEN
.
113
1.5.
ZELLWANDGEBUNDENE
INHALTSSTOFFE
.
117
1.6.
NACHWEIS
DER
UV-B
ABHAENGIGEN
NEUSYNTHESE
VON
DIACYLIERTEN
FLAVONOL-3
GLUKOSIDEN
DURCH
PULSMARKIERUNG
MIT
L-[U
14
C]PHENYLALANIN
.
120
1.7.
GEWEBELOKALISATION,
ZELLKOMPARTIMENTIERUNG
UND
IN
VIVO
ABSORPTIONS
EIGENSCHAFTEN
VON
DIACYLIERTEN
FLAVONOL-3-GLUKOSIDEN
.
123
1.7.1.
IN
SITU
NACHWEIS
VON
INHALTSSTOFFEN
MITTELS
MIKROSPEKTRALPHOTOMETRIE
.
123
1.7.2.
OPTISCHE
LOKALISATION
DER
IN
SITU
VERTEILUNG
VON
PHENOLISCHEN
INHALTSSTOFFEN
MITTELS
DER
LASER-SCANNING-MIKROSKOPIE
(LSM)
.
125
1.7.2.1.
FLUORESZENZEIGENSCHAFTEN
GEEIGNETER
MODELLVERBINDUNGEN
.
125
1.7.2.2.
LASER-SCANNING-MIKROSKOPIE
(LSM)
AN
FRISCHEN
GEWEBESCHNITTEN
.
128
1.7.3.
IN
VIVO
BESTIMMUNG
DER
UV-B
STRAHLUNGSVERHAELTNISSE
IN
KIEFEMNADELN
.
132
2.
KOMBINIERTE
WIRKUNG
VON
UV-B
STRAHLUNG
UND
OZON
AUF
DEN
SEKUNDAERSTOFFWECHSEL
VON
KIEFERNKEIMLINGEN
.
134
2.1
BONITUR
SICHTBARER
SCHAEDEN
.
135
2.2.
METHANOL-LOESLICHE
PHENOLISCHE
INHALTSSTOFFE
.
138
2.2.1.
CATECHIN
UND
STILBENE
.
139
2.2.2.
NICHT
ACYLIERTE
UND
DIACYLIERTE
FLAVONOL-3-GLUKOSIDE
.
142
2.3.
ZELLWANDGEBUNDENE
PHENOLISCHE
INHALTSSTOFFE
.
148
2.3.1.
HYDROXYZIMTSAEUREN
.
149
2.3.2.
NICHT
ACYLIERTE
FLAVONOL-3-GLUKOSIDE
.
150
2.4.
SCHLUESSEL-ENZYME
DES
PHENOLISCHEN
SEKUNDAERSTOFIWECHSELS
(PAL,
STS,
CHS)
.
151
INHALT
V
IV.
DISKUSSION
.
156
A:
KIEFEMKEIMLINGE
UND
DIE
BEHANDLUNG
IN
KLIMAKAMMERN
.
157
1.
DAS
MODELLSYSTEM
KIEFERNKEIMLINGE
_
.
157
2.
KAMMEREXPERIMENTE.
158
B:
ISOLIERUNG
UND
CHARAKTERISIERUNG
VON
UV-B
SCHIRMPIGMENTEN
.
160
3.
ISOLIERUNG
.
160
4.
CHARAKTERISIERUNG
.
162
C:
WIRKUNG
VON
UV-B
STRAHLUNG
AUF
DEN
GEHALT
PHENOLISCHER
INHALTSSTOFFE
UND
DEREN
BIOLOGISCHE
RELEVANZ.
170
5.
INDUKTION
LOESLICHER
PHENOLISCHER
INHALTSSTOFFE
DURCH
UV-B
STRAHLUNG.
.
170
6.
ZELIWANDGEBUNDENE
PHENOLISCHE
INHALTSSTOFFE.
.
173
7.
BIOLOGISCHE
RELEVANZ:
DIE
UV-B
STRAHLUNG
ABSCHIRMENDE
FUNKTION
VON
LOESLICHEN
UND
ZELLWANDGEBUNDENEN
PHENOLISCHEN
INHALTSSTOFFEN
.
174
7.1.
UV-B
ABSORPTIONSVERHALTEN
DIACYLIERTER
FLAVONOL-3-GLUKOSIDE
IM
VERGLEICH
ZU
NICHTACYLIERTEN
FLAVONOLDERIVATEN
.
174
7.2.
IN
SITU
LOKALISATION
UND
IN
VIVO
UV-B-ABSORPTIONSEIGENSCHAFTEN
VON
LOESLICHEN
UND
ZELLWANDGEBUNDENEN
PHENOLISCHEN
INHALTSSTOFFEN
.
176
D:
KOMBINIERTE
WIRKUNG
VON
UV-B
UND
OZON
AUF
DEN
PHENOLISCHEN
SEKUNDAERSTOFFWECHSEL
VON
KIEFEMKEIMLINGEN
.
182
8.
SICHTBARE
SCHAEDEN
.
183
9.
UV-B
BEHANDLUNG
MODIFIZIERT
DIE
WIRKUNG
VON
OZON
.
185
10.
OZON-BEHANDLUNG
REDUZIERT
DEN
INDUZIERBAREN
UV-B
SCHIRM
.
190
11.
LOEST
OZON
BEI
KIEFERNKEIMLINGEN
EINE
'
KREUZINDUKTION
'
AUS
?.
195
INHALT
VI
V.
ZUSAMMENFASSUNG
.
199
VI.
LITERATUR
.
201
VII.
ANHANG
.
234
1.
QUALITAET
DER
OZON-SIMULATION
IN
DEN
UV-B/OZON-INTERAKTIONSEXPERIMENTEN
.
234
2.
CHARAKTERISIERUNG
DER
DURCH
METHANOLYSE
DIACYLIERTER
FLAVONOL-3-GLUKOSIDE
ENTSTANDENEN
PRODUKTE.
.
237 |
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