cAMP-vermittelte Stimulation der Calcitoninsekretion:
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1995
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INHALTSANGABE
SEITE
I. EINLEITUNG. 1
1. SECOND MESSENGER SYSTEME
. 3
1.1 CYCLISCHES AMP UND ADENYLATCYCLASE . 3
1.1.1 REGULATION DER ADENYLATCYCLASE DURCH G-PROTEINE . 3
1.1.2 STRUKTUR UND FUNKTION DER G-PROTEINE. 4
1.1.3 INTRAZELLULAERE WIRKUNGEN DES CAMP (PROTEINKINASE A) . 7
1.1.4 INTRAZELLULAERER ABBAU DES CAMP. 8
1.2 CALCIUM ALS INTRAZELLULAERER BOTENSTOFF. 9
1.2.1 REGULATION DER INTRAZELLULAEREN CALCIUMKONZENTRATION . 9
1.2.2 INTRAZELLULAERE CALCIUMBINDENDE PROTEINE (CALMODULIN). 9
1.2.3 REZEPTORVERMITTELTE KONTROLLE DER KONZENTRATION AN (CA++)I . 10
1.2.3.1 INS (1,4,5) P3 ALS SECOND MESSENGER . 11
1.2.3.2 DIACYLCLYCEROL UND PROTEINKINASE C . 12
1.2.4 CALCIUMKANAELE. 13
2.
REGULATION DER CALCITONINSEKRETION
. 15
II. FRAGESTELLUNG UND ZIELSETZUNG. 18
III. MATERIAL UND METHODEN. 19
1. ZELLKULTUR. 19
1.1 MEDIUM UND ZUSATZLOESUNGEN. 19
1.2 LABORARTIKEL UND GERAETE. 19
1.3 R-MTC 6-23 ZELLEN. 19
1.4 KULTIVIERUNG DER R-MTC 6-23 ZELLEN. 20
1.4.1 KULTURMEDIUM . 20
1.4.2 KULTURBEDINGUNGEN UND KULTIVIERUNGSTECHNIKEN. 20
1.4.3 SUBKULTIVIERUNG DER ZELLEN. 21
2. MESSVERFAHREN. 21
2.1 REAGENZIEN . 21
2.2 LABORARTIKEL UND GERAETE. 22
2.3 CALCITONINBESTIMMUNG . 22
2.4 CAMP-PROTEIN-BINDUNGS-ASSAY. 23
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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2.5 PROTEINBESTIMMUNG . 24
2.6 ZELLZAHLBESTIMMUNG. 24
3. VERSUCHSAUFBAU. 25
3.1 TESTSUBSTANZEN. 25
3.2 VERSUCHSMEDIUM. 25
3.3 STIMULATION DER CALCITONINSEKRETION . 25
3.4 STIMULATION DER CAMP-PRODUKTION. 26
4. STATISTISCHE AUSWERTUNG. 27
4.1 U-TEST VON MANN UND WHITNEY . 27
4.2 VORZEICHEN-RANG-TEST VON WILCOXON. 28
IV.
ERGEBNISSE. 29
1. EINFLUSS VON CAMP ANALOGA AUF DIE CALCITONINSEKRETION
DER R-MTC 6-23 ZELLEN. 29
1.1 DOSIS-WIRKUNGSKURVE VON 8-BROMO-CAMP . 29
1.2 CALCITONINSEKRETION UNTER LANGZEITSTIMULATION MIT 8-BROMO CAMP. 31
1.3 LANGZEITSTIMULATION DER CALCITONINSEKRETION MIT DB-CAMP. 33
2. STIMULATION DER R-MTC 6-23 ZELLEN MIT H-GHRH. 35
2.1 EINFLUSS VON H-GHRH AUF DIE CAMP PRODUKTION. 35
2.2 EINFLUSS VON H-GHRH AUF DIE CALCITONINSEKRETION. 37
2.2.1 CT DOSIS-WIRKUNGSKURVE VON H-GHRH. 37
2.2.2 LANGZEITSTIMULATION DER CALCITONINSEKRETION MIT H-GHRH . 39
3. STIMULATION DER R-MTC 6-23 ZELLEN MIT GLUKAGON . 41
3.1 EINFLUSS VON GLUKAGON AUF DIE CAMP PRODUKTION. 41
3.2 LANGZEITSTIMULATION DR CALCITONINSEKRETION MIT GLUKAGON. 43
4. STIMULATION DER R-MTC 6-23 ZELLEN MIT ADRENALIN. 45
4.1 EINFLUSS VON ADRENALIN AUF DIE CAMP SYNTHESE. 45
4.2 LANGZEITSTIMULATION DER CALCITONINSEKRETION MIT ADRENALIN. 47
V. DISKUSSION.
49
1. IN VITRO-REGULATION DER CALCITONINSEKRETION (METHODEN). 49
2. CAMP-ABHAENGIGE STIMULATION DER CALCITONINSEKRETION. 50
2.1 STIMULATION DER CALCITONINSEKRETION MIT CAMP DERIVATEN. 51
2.2 STIMULATION DER C-ZELL-ADENYLATCYCLASE MIT GLUKAGON. 52
2.3 STIMULATION DER CALCITONINSEKRETION MIT GLUKAGON . 52
2.4 STIMULATION DER C-ZELL-ADENYLATCYCLASE UND CALCITONINSEKRETION
MIT EPINEPHRIN.
2.5 STIMULATION DER C-ZELL-ADENYLATCYCLASE UND CALCITONINSEKRETION
DURCH GHRH.
3. CAMP-VERMITTELTE LANGZEITSTIMULATION DER CALCITONINSEKRETION
4. CA^-VERMITTELTE LANGZEITSTIMULATION DER CALCITONINSEKRETION
5. REGULATION DER CALCITONINSYNTHESE.
5 1 CAMP-ABHAENGIGE REGULATION DER CALCITONINSYNTHESE .
5.2 REGULATION DER CALCITONINSYNTHESE DURCH CA^-ABHAENGIGE PROZESSE
6 BEDEUTUNG DER SPANNUNGSABHAENGIGEN CA^-KANAELE BEI DER
CALCITONINSEKRETION.
6.1 ROLLE DER SPANNUNGSABHAENGIGEN CALCIUMKANAELE BEI DER CALCIUM
STIMULIERTEN CALCITONINSEKRETION.
6.2 MODULATION SPANNUNGSABHAENGIGER CA^-KANAELE DURCH PROTEINKINASEN .
6.3 PHOSPHORYLIERUNGSABHAENGIGKEIT SPANNUNGSABHAENGIGER CA^-KANAELE .
6.4 PLASMAMEMBRANSTAENDIGE, G-PROTEINVERMITTELTE MODULATION DER
AKTIVITAET SPANNUNGSABHAENGIGER CA -KANAELE.
7 MOEGLICHE BETEILIGUNG DER SPANNUNGSABHAENGIGEN CA^-KANAELE
BEI DER CAMP-ABHAENGIGEN CT-STIMULATION.
7 1 BEDEUTUNG DER SPANNUNGSABHAENGIGEN CALCIUMKANAELE BEI DER
KATECHOLAMINSTIMULIERTEN CT-SEKRETION.
7.2 BEDEUTUNG DER SPANNUNGSABHAENGIGEN CALCIUMKANAELE BEI DER
GHRH-STIMULIERTEN CALCITONINSEKRETION.
7.3 BEDEUTUNG DER SPANNUNGSABHAENGIGEN CALCIUMKANAELE BEI DER
GLUKAGONSTIMULIERTEN CALCITONINSEKRETION.
VL ZUSAMMENFASSUNG
VII. LITERATUR .
VIII. ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
IX. LEBENSLAUF
X. DANKSAGUNG
.53
.55
. . 57
.58
.59
. . 60
. . 61
.63
. 63
. 64
. 66
. 67
. 68
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. 71
. 72
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. 74
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. 94
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