Untersuchungen zur Induktion peroxisomaler Enzyme durch Peroxisomen-Proliferatoren bei der Hefe Candida tropicalis:
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| Format: | Buch |
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1995
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INHALT
SEITE
1
EINLEITUNG
1
2
MATERIAL
UND
METHODEN
15
2.1
CHEMIKALIEN
15
2.2
MIKROORGANISMEN
16
2.2.1
VERWENDETE
HEFE
UND
BAKTERIENSTAEMME
16
2.2.2
ANZUCHT
DER
MIKROORGANISMEN
16
2.2.2.1
MEDIEN
16
2.2.2.2
FLUESSIGKULTUREN
18
2.2.2.3
DAUERKULTUREN
18
2.3
ZELLZAEHLUNG
18
2.4
ZELLERNTE
19
2.5
ZELLAUFSCHLUSS
19
2.6
ENZYMTESTS
19
2.7
POLYACRYLAMIDGELELEKTROPHORESE
21
2.8
FAERBUNG
DER
ACRYLAMIDGELE
22
2.9
ELEKTROTRANSFER
VON
PROTEINEN
AUF
POLYACRYLAMIDGELEN
AUF
PVDF
MEMBRANEN
(WESTERNBLOTTING)
23
2.10
PROTEINBESTIMMUNG
23
2.11
PH-WERT
MESSUNG
23
2.12
IMMUNOLOGISCHE
METHODEN
23
2.12.1
ANTISEREN
23
2.12.2
IMMUNOLOGISCHER
NACHWEIS
VON
PROTEINEN
NACH
WESTERNBLOTTING
24
2.13
ELEKTRONENMIKROSKOPISCHE
AUFNAHMEN
DER
HEFEZELLEN
25
2.14
NITRIERUNG
UND
REDUKTION
VON
CIPROFIBRAT
25
2.15
AFFINITAETSCHROMATOGRAPHIE
AN
EAH-SEPHAROSE
4B
26
2.15.1
KOPPLUNG
VON
CIPROFIBRAT
AN
EAH-SEPHAROSE
4B
26
2.15.2
PRAEPARATION
VON
CYTOSOL
AUS
C.TROPICALIS-ZELLEN
26
2.15.3
SAEULENLAEUFE
DER
AFFINITAETS
CHROMATOGRAPHIE
27
2.16
PRAEPARATION
VON
CIPROFIBRAT
UND
1,7-HEPTANDIOLFUTTER
FUER
DIE
RATTEN
27
2.17
RESTRIKTION
VON
DNA
27
2.18
AGAROSEGELELEKTROPHORESE
28
2.19
PRAEPARATION
DES
KLONIERUNGS
VEKTORS
28
2.20
ISOLIERUNG
VON
DNA-FRAGMENTEN
AUS
AGAROSEGELEN
28
2.21
LIGATION
VON
DNA-FRAGMENTEN
MIT
VEKTOR-DNA
29
2.22
PRAEPARATION
KOMPETENTER
E.COLI
ZELLEN
29
2.23
TRANSFORMATION
VON
E.COLI
ZELLEN
29
2.24
PRAEPARATION
VON
PLASMID-DNA
30
2.25
PRAEPARATION
DER
SONDE
30
2.26
PRAEPARATION
GENOMISCHER
DNA
AUS
C.TROPICALIS
ZELLEN
31
2.27
TRANSFER
VON
DNA
AUF
NYLONMEMBRAN
DURCH
DOT-BLOTTING
31
2.28
TRANSFER
VON
DNA
AUF
NYLONMEMBRAN
DURCH
SOUTHERN
BLOTTING
32
2.29
PLATTIERUNG
DER
PHAGEN
32
2.30
FILTERABZUEGE
VON
AGARPLATTEN
MIT
PHAGENPLAQUES
32
2.31
HYBRIDISIERUNG
AUF
NYLONMEMBRAN
FIXIERTER
DNA
MIT
DER
SONDE
33
2.32
PRAEPARATION
VON
LAMBDA
PHAGEN-DNA
34
2.33
SEQUENZIERUNG UND
AUSWERTUNG
VON
NUCLEINSAEURESEQUENZEN
35
3
ERGEBNISSE
36
3.1
WACHSTUM
VON
C.TROPICALIS
AUF
MV
UND
YEP-MEDIUM
36
3.2
INDUKTION
VON
C.TROPICALIS
MIT
OELSAEURE
37
3.3
INDUKTION
MIT
CIPROFIBRAT
39
3.4
EINFLUSS
VON
CIPROFIBRAT
AUF
DAS
WACHSUM
VON
C.TROPICALIS
41
3.5
EINFLUSS
DER
WACHSTUMSPHASE
VON
C.TROPICALIS
AUF
DIE
INDUKTION
MIT
CIPROFIBRAT
42
3.6
INDUKTION
MIT
CIPROFIBRAT
NACH
12,
24
UND
36
STUNDEN
45
3.7
EINFLUSS
VON
CLOFIBRAT
UND
NAFENOPIN
AUF
DIE
SS-OXIDATION
48
3.8
EINFLUSS
DER
KOHLENSTOFFQUELLEN
AUF
DIE
INDUKTION
MIT
CIPROFIBRAT
54
3.9
EINFLUSS
ANDERER
KOHLENSTOFFQUELLEN
AUF
DIE
INDUKTION
MIT
CIPROFIBRAT
58
3.10
TWEEN-40
ALS
KOHLENSTOFFQUELLE
60
3.11
INDUKTION
DURCH
4-METHYLANISOL
UND
2,4-DICHLORPHENOXYESSIGSAEURE
62
3.12
INDUKTION
DURCH
ANDERE
SUBSTANZEN
65
3.13
INDUKTION
MIT
ALIPHATISCHEN
DIOLEN
67
3.14
EINFLUSS
DER
KOHLENSTOFFQUELLE
AUF
DIE
INDUKTION
MIT
1,7-HEPTANDIOL
70
3.15
MORPHOLOGISCHE
VERAENDERUNGEN
VON
C.TROPICALIS
ZELLEN
73
3.16
EINFLUSS
VON
CIPROFIBRAT
AUF
DIE
SS-OXIDATION
VON
SACCHAROMYCES
CEREVISIAE
79
3.17
INDUKTION
BEI
HANSENULA
CAPSULATA
UND
HANSENULA
ANOMALA
81
3.18
WIRKUNG
VON
1,7-HEPTANDIOL
AUF
RATTEN
82
3.19
INDUKTION
MIT
VITAMIN
A-SAEURE
UND
THYROXIN
85
3.20
EINFLUSS
DES
PROTEINSYNTHESEHEMMERS
CYCLOHEXIMID
AUF
DIE
INDUKTION
MIT
CIPROFIBRAT
85
3.21
EINFLUSS VON
CIPROFIBRAT
UND
1,7
HEPTANDIOL
AUF
MITOCHONDRIALE
ENZYME
UND
ENZYME
DES
GLYOSYLATZYKLUS
87
3.22
EINFLUSS
VON
CIPROFIBRAT,
1,7-HEPTAN
DIOL
UND
OLEAT
AUF
DIE
PROTEIN
ZUSAMMENSETZUNG
VON
C.TROPICALIS
89
3.23
IMMUNOLOGISCHER
NACHWEIS
DER
INDUKTION
DURCH
CIPROFIBRAT
UND
1,7-HEPTANDIOL
91
3.24
ELEKTRONENMIKROSKOPISCHE
UNTERSUCHUNG
VON
C.TROPICALIS
93
3.25
IMMUNOLOGISCHER
NACHWEIS
DES
DURCH
PEROXISOMENPROLIFERATOREN
AKTIVIER
BAREN
REZEPTORS
(PPAR)
98
3.26
DERIVATISIERUNG
VON
CIPROFIBRAT
101
3.27
AFFINITAETSCHROMATOGRAPHIE
MIT
CIPROFIBRAT-EAH-SEPHAROSE
4B
105
3.28
PRAEPARATION
DER
MPPAR-NUCLEOTID
SEGUENZ
ALS
SONDE
107
3.29
ISOLIERUNG
GENOMISCHER
DNA
AUS
C.TROPICALIS
108
3.30
HYBRIDISIERUNG
GENOMISCHER
DNA
VON
C.TROPICALIS
MIT
DER
SONDE
108
3.31
SOUTHERN
HYBRIDISIERUNG
GENO
MISCHER
DNA
VON
C.TROPICALIS
MIT
DER
MPPAR-NUCLEOTIDSEQUENZ
110
3.32
SCREENING
DER
GENOMISCHEN
LAMBDA
DASH-GENBIBLIOTHEK
VON
C.TROPICALIS
111
3.33
SUBKLONIERUNG
DER
POSITIVEN
KLONE
IN
DEN
PLASMIDVEKTOR
BLUESCRIPT
KS"
114
3.34
UEBERPRUEFUNG
POSITIVER
PHAGENKLONE
117
3.35
SEQUENZIERUNG
UND
AUSWERTUNG
VON
DNA-SEQUENZEN
ISOLIERTER
KLONE
121
4
DISKUSSION
122
5
ZUSAMMENFASSUNG
137
6
LITERATUR
139 |
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