Untersuchungen zur immunmodulierenden und antitumoralen Aktivität von Triterpensaponinen:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
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1996
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UNTERSUCHUNGEN ZUR
IMMUNMODULIERENDEN UND ANTITUMORALEN AKTIVITAET VON TRITERPENSAPONINEN
DISSERTATION
ZUR ERLANGUNG DES DOKTORGRADES DER NATURWISSENSCHAFTEN (DR. RER. NAT.)
DER NATURWISSENSCHAFTLICHEN FAKULTAET IV -CHEMIE UND PHARMAZIE-
DER UNIVERSITAET REGENSBURG
VORGELEGT VON
BERND PLOHMANN AUS WALDSASSEN
1996
IMAGE 2
INHALTSVERZEICHNIS
1 EINLEITUNG 1
1.1 SCHUTZSCHILD IMMUNSYSTEM 1
1.1.1 IMMUNOLOGISCHE TUMORABWEHR 2
1.1.2 MOEGLICHE THERAPEUTISCHE ANSATZPUNKTE FUER DIE TUMORIMMUNOLOGIE 4
1.2 IMMUNMODULATION, EIN THERAPIEKONZEPT BEI DER TUMORBEHANDLUNG ? 5
1.3TRITERPENSAPONINE 6
1.3.1 ALLGEMEINE UEBERSICHT 6
1.3.2 ADJUVANTE WIRKUNG 7
1.3.3 ANTITUMORALE UND IMMUNSTIMULATORISCHE EIGENSCHAFTEN VON
TRITERPENSAPONINEN 8
2 PROBLEMSTELLUNG UND LOESUNGSANSAETZE 9
3 ERGEBNISSE 11
3.1 IN VITRO UNTERSUCHUNGEN . 11
3.1.1 UNSPEZIFISCHE TOXIZITAET GEGEN TUMORZELLEN 11
3.1.2 BESTIMMUNG DES HAEMOLYTISCHEN INDEX 24
3.1.3 UEBERPRUEFUNG DES LIPOPOLYSACCHARIDGEHALTES IN DEN TESTSUBSTANZEN 30
3.1.4 UNTERSUCHUNGEN ZUR MITOGENITAET VON LYMPHOZYTEN 33
3.1.4.1 LYMPHOZYTENTRANSFORMATIONSTEST MIT MURINEN MILZLYMPHOZYTEN 33
3.1.4.2 DURCHFLUSSZYTOMETRISCHE UNTERSUCHUNGEN 36
3.1.4.3 LYMPHOZYTENTRANSFORMATIONSTEST MIT MURINEN THYMUSZELLEN 39
3.1.4.4 UNTERSUCHUNGEN ZUR MITOGENITAET HUMANER LYMPHOZYTEN 41 3.1.5
BESTIMMUNG DER MAKROPHAGENAKTIVITAET 43
3.1.5.1 CHEMOLUMINESZENZUNTERSUCHUNGEN ZUR PHAGOZYTOSEAKTIVITAET 44
3.1.5.2 INDUKTION ZYTOTOXISCHER MAKROPHAGEN 49
3.1.6 BEEINFLUSSUNG DER ZYTOKINFREISETZUNG 52
3.1.6.1 TUMOMEKROSEFAKTOR A FREISETZUNG AUS MAKROPHAGEN 52 3.1.6.2
INTERLEUKIN 2 FREISETZUNG AUS LYMPHOZYTEN 53
3.1.6.3 GM-CSF FREISETZUNG AUS MAKROPHAGEN ODER LYMPHOZYTEN 54
3.1.7MODULATION DER KLASSISCHEN KOMPLEMENTKASKADE 56
3.1.8 BESTIMMUNG DER AKTIVITAET NATUERLICHER KILLERZELLEN (NK-ZELLEN) 63
3.2 IN VIVO UNTERSUCHUNGEN 65
3.2.1 SARKOM 180 65
3.2.2 DBA/2-MC.SC-1 FIBROSARKOM 77
3.2.3 IMMUNOLOGISCHE EX VIVO VERSUCHE 80
3.2.3.1 BESTIMMUNG DER ZELLZAHL DER ISOLIERTEN GEWEBE 80
IMAGE 3
3.2.3.2 MITOGENITAET VON MILZ- UND KNOCHENMARKSZELLEN 81
3.2.3.3 AKTIVITAET VON NK-ZELLEN 83
3.2.3.4 PHAGOZYTOSEAKTIVITAET DER KNOCHENMARKSZELLEN 84
3.2.3.5 TNF A KONZENTRATION IM BLUTPLASMA 85
4 ZUSAMMENFASSUNG 87
5 MATERIAL UND METHODEN 91
5.1 BIOLOGISCHE TESTUNG 91
5.1.1 TESTSUBSTANZEN 91
5.1.2 GERAETE 91
5.1.3 VERBRAUCHSMATERIAL 92
5.1.4 VERSUCHSTIERE 92
5.1.5 TUMORZELLINIEN 92
5.1.6 ZELLKULTURBEDINGUNGEN 93
5.1.7 ENDOTOXINBESTIMMUNG DER SUBSTANZEN 93
5.1.8 TOXIZITAETSUNTERSUCHUNGEN 94
5.1.8.1 ZELLZAHLBESTIMMUNG UND VITALITAETSSTESTUNG 94
5.1.8.2 UNSPEZIFISCHE ZYTOTOXIZITAET GEGEN P815-ZELLEN 94
5.1.8.3 UNSPEZIFISCHE ZYTOTOXIZITAET GEGEN YAC 1-ZELLEN 94
5.1.8.4 BESTIMMUNG DES HAEMOLYTISCHEN INDEX 94
5.1.9 IMMUNOLOGISCHE IN VITRO VERSUCHE 95
5.1.9.1 LYMPHOZYTENTRANSFORMATIONSTEST 95
5.1.9.2 FACS-ANALYSENLYMPHOZYTENPOPULATIONEN 95
5.1.9.3 PHAGOZYTOSEAKTIVITAETSTESTUNG VON MURINEN
KNOCHENMARKSMAKROPHAGEN.. 96 5.1.9.4 INDUKTION ZYTOTOXISCHER MAKROPHAGEN
97
5.1.9.5 FREISETZUNG VON ZYTOKINEN 97
5.1.9.6 VERSUCHE ZUR KOMPLEMENTMODULIERUNG 98
5.1.9.7 BESTIMMUNG DER AKTIVITAET NATUERLICHEN KILLERZELLEN 99 5.1.10 IN
VITRO UNTERSUCHUNGEN AN HUMANEN BLUTZELLEN 99
5.1.10.1 GEWINNUNG UND AUFBEREITUNG 99
5.1.10.2 UNTERSUCHUNG ZUR MITOGENITAET HUMANER MONOZYTEN 100 5.1.10.3
BESTIMMUNG DER PHAGOZYTOSEAKTIVITAET HUMANER MONOZYTEN UND GRANULOZYTEN
100
5.1.11 IMMUNOLOGISCHE EXVIVO VERSUCHE 100
5.1.11.1 BEHANDLUNGS- UND AUFARBEITUNGSSCHEMA 100
5.1.11.2 UNTERSUCHUNG DER PROLIFERATION VON MILZ- UND KNOCHENMARKSZELLEN
.... 101 5.1.11.3 BESTIMMUNG DER NATUERLICHEN KILLERZELLAKTIVITAET 101
5.1.11.4 BESTIMMUNG DER PHAGOZYTOSEAKTIVITAET 101
5.1.11.5 FREISETZUNG VON TNF-A 101
IMAGE 4
5.1.12 IN VIVO TESTUNG 102
5.1.12.1 SARKOM 180 102
5.1.12.2 FIBROSARKOM 102
5.2 SULFATIERUNG DER GLYCYRRETHINSAEURE 103
5.2.1 SYNTHESE 103
5.2.2 AUFREINIGUNG DES ROHPRODUKTES 103
5.2.3 STRUKTURAUFLDAERUNG 104
6 VERWENDETE ABKUERZUNGEN 109
7 LITERATURVERZEICHNIS 111
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