Antikörper-Techniken:
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Heidelberg [u.a.]
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1996
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|---|---|
| adam_text | Eryl Liddell und Ian Weeks
Antikörper-
Techniken
Aus dem Englischen übersetzt
von Stefanie Seitmann
Spektrum Akademischer Verlag Heidelberg • Berlin • Oxford
Inhalt
Abkürzungen 9
Vorwort 11
Teil 1: Grundlegende Prinzipien und Methoden
Das Immunsystem
Einleitung
Antikörper
Die Biosynthese der Antikörper
Die Herstellung polyklonaler Antikörper
Manipulation der Immunantwort
Antikörperproduktion
Die Immunisierung
Dosierung des Immunogens
Zeitlicher Ablauf der Immunisierungen
Charakterisierung der Antikörper
Der Antikörpertiter
Die Affinität
Kreuzreaktionen
Die Immunglobulinklasse
Chemische Veränderungen
Hapten-cßm er-Protein-Konjugate
Festphasereagenzien
Markierte Reagenzien
Literatur
Die Herstellung monoklonaler Antikörper
Einleitung
Grundlegende Methoden
Immunisierung
Gewebekultur
Myelomzellen
Fusion
HAT-Selektion
Antikörper-Techniken
326 Das Herausfinden des
richtigen Antikörpers - das Screening 47
327 Klonierung 50
328 Lagerung (Kryokonservierung) 51
329 Vermehrung von Klonen (Propagation) 52
3 3 Menschliche Hybridomzellen 54
3 4 Abwandlungen der grundlegenden
Produktionsverfahren 55
341 Alternative Lymphocyten 55
342 In v//ro-Immunisierung 56
343 Heteromyelome und Hybrid-Hybridome 57
344 Elektrofusion 58
345 Alternative Klonierungstechniken 58
3 5 Charakterisierung der Antikörper 59
3 6 Kaufen oder Selbermachen: relative Vorzüge 60
3 7 Literatur 62
4 Chemische und gentechnische Antikörperherstellung 63
4 1 Einleitung 63
4 2 Chemische Modifikation 64
421 Antikörperfragmente: Fab und F(ab )2 64
422 Bispezifische Antikörper 66
423 Veränderung der Effektorfunktionen 68
4 3 Gentechnische Manipulation 69
431 Die Humanisierung von Nagerantikörpern 69
432 Kombinatorische Antikörpergenbibliotheken 72
4 4 Zusammenfassung und Ausblick 83
4 5 Literatur 84
Teil 2: Techniken und Anwendungen
5 Diagnostische Anwendungen von Antikörpern 87
5 1 Immunpräzipitation 87
5 2 Radioimmunassay 91
521 Radioaktive Markierung 92
522 Abtrennungssysteme 93
5 3 Immunradiometrie 95
5 4 Weitere Immunassays 97
Inhalt
5 5 Nicht-radioaktive Immunassays 99
551 Enzymatischer Irhmunassay 99
552 Fluoreszenzimmunassay 102
553 Chemilumineszenzimmunassays 103
554 Homogene Immunassays 105
5 6 Zusammenfassung 107
5 7 Literatur 107
6 Immunlokalisation 101
6 1 Einleitung 109
6 2 Immuncytochemie 109
621 Gewebe- und Zellpräparation 110
622 Die Wahl des Antikörpers 113
623 Die Wahl der Antikörpermarkierung 114
624 Markierungsstrategien 119
625 Doppel- und Dreifachmarkierungen 123
626 Urispezifische Färbung 125
6 3 Immunoblot 126
6 4 Literatur 128
7 Therapeutische Anwendung von Antikörpern 129
7 1 Einleitung 129
7 2 Antikörpertyp und -spezifität 130
721 Polyklonale Seren 130
722 Monoklonale Antikörper aus Nagern • 132
723 Humanisierte und
CDR-transplantierte Antikörper 137
724 Rekombinante Antikörper 138
7 3 Effektorfunktionen 139
731 Nicht-markierte Antikörper 139
732 Markierte Antikörper 140
7 4 Rechtliche Gesichtspunkte 146
7 5 Ausblick 147
7 6 Literatur 148
8 Weitere Anwendungen von Antikörpern 151
8 1 Affinitätschromatographie 151
8 2 Biosensoren 154
Antikörper-Techniken
8 3 Katalytische Antikörper 156
8 4 Epitop-mappmg 158
8 5 Fluoreszenzaktivierte Zellsortierung (FACS) 160
8 6 Literatur 160
Anhang A: Glossar 161
Anhang B: Hersteller 169
Anhang C: Weiterführende Literatur 173
Index 175
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