Entwicklung und Evaluierung von Immunoassays zum Nachweis von Thymosin alpha 1 , Thymosin beta 4 und Thymulin:
Gespeichert in:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
Büttelborn, Heinrich-Engel-Str. 49a
<<St.>> Becker
1995
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INHALTSVERZEICHNIS
1
INHALTSVERZEICHNIS
ABKUERZUNGS
VERZEICHNIS
SEITE
1
EINLEITUNG
5
1.1
DER
THYMUS
5
1.1.1
AUFBAU
UND
FUNKTION
5
1.2
THYMUSPEPTIDE
7
1.2.1
THYMOSIN
AJ
9
1.2.2
THYMOSIN
SS4
11
1.2.3
THYMULIN
15
1.3
MONOKLONALE
ANTIKOERPER
17
1.4
IMMUNOASSAYS
19
2
THEMENSTELLUNG
21
3
ERGEBNISSE
22
3.1
EPITOPE
MAPPING
VON
THYMOSIN
AJ
22
3.1.1
THEORETISCHES
EPITOPE
MAPPING
22
3.1.2
EXPERIMENTELLES
EPITOPE
MAPPING
26
3.2
ENTWICKLUNG
EINES
IMMUNOASSAYS
ZUM
NACHWEIS
VON
THYMOSIN
AJ
31
3.2.1
JODIERUNG
VON
THYMOSIN
AJ
31
3.2.2
TITERBESTIMMUNG
34
3
2.3
BESCHICHTUNG
DER
MIKROTITERPLATTE
36
3.2.4
BINDUNGSKINETIK
40
3.2.5
STANDARDKURVE
42
3.2.6
SPEZIFITAET
DES
ANTISERUMS
43
3.2.7
QUALITAETSKONTROLLE
44
3.2.7.1
PRAEZISION
UND
REPRODUZIERBARKEIT
44
3.2.7.2
RICHTIGKEIT
45
3.3
EPITOPE
MAPPING
VON
THYMOSIN
SS4
46
3.3.1
THEORETISCHES
EPITOPE
MAPPING
46
2
INHALTSVERZEICHNIS
3.3.2
EXPERIMENTELLES
EPITOPE
MAPPING
50
3.4
ENTWICKLUNG
EINES
IMMUNOASSAYS
ZUM
NACHWEIS
VON
THYMOSIN
04
57
3.4.1
JODIERUNG
VON
THYMOSIN
04
57
3.4.2
TITERBESTIMMUNG
59
3.4.3
BESCHICHTUNG
DER
MIKROTITERPLATTE
62
3.4.4
BINDUNGSKINETIK
64
3.4.5
STANDARDKURVE
64
3.4.6
SPEZIFITAET
DES
ANTISERUMS
66
3.4.7
QUALITAETSKONTROLLE
67
3.4.7.1
PRAEZISION
UND
REPRODUZIERBARKEIT
67
3
4.7.2
RICHTIGKEIT
68
3
5
ENTWICKLUNG
EINES
IMMUNOASSAYS
ZUM
NACHWEIS
VON
THYMULIN
68
3.5.1
BIOTINYLIERUNG
VON
THYMULIN
69
3.5.2
BESCHICHTUNG
DER
MIKROTITERPLATTE
71
3.5.3
BINDUNGSKINETIK
71
3.5.4
STANDARDKURVE
72
3.5
5
SPEZIFITAET
DES
ANTISERUMS
73
3.5.6
QUALITAETSKONTROLLE
74
3.5.6
1
PRAEZISION
UND
REPRODUZIERBARKEIT
74
3.5.6
2
RICHTIGKEIT
75
3.6
HERSTELLUNG
MONOKLONALER
ANTIKOERPER
76
3.6.1
MONOKLONALE
ANTIKOERPER
SPEZIFISCH
FUER
THYMOSIN
AI
76
3.6.2
MONOKLONALE
ANTIKOERPER
SPEZIFISCH
FUER
THYMOSIN
04
(1-4)
77
4
MATERIALIEN
UND
METHODEN
78
4.1
MATERIALIEN
78
4.1.1
CHEMIKALIEN
78
4.1.2
ENZYME,
PEPTIDE,
ANTIKOERPER
79
4.1.3
VERBRAUCHSMATERIAL
80
4.1.4
GERAETE
80
4.2
METHODEN
4.2.1
HERSTELLUNG
VERWENDETER
PUFFER
80
4.2.2
EPITOPE
MAPPING
82
4.2.2.1
THEORETISCHES
EPITOPE
MAPPING
82
4.2.2.2
EXPERIMENTELLES
EPITOPE
MAPPING
83
INHALTSVERZEICHNIS
3
4.2.3
MARKIERUNGEN
88
4.2
3.1
BIOTINYLIERUNG
88
4.2.3.2
JODIERUNG
MIT
CHLORAMIN-T
90
4.2.3.3
JODIERUNG
NACH
BOLTON
HUNTER
92
4.2.4
SAEULENCHROMATOGRAPHIE
94
4
2.4.1
GELPERMEATIONSCHROMATOGRAPHIE
94
4
2.5
KOPPLUNG
VON
HAPTENEN
94
4.2.5.1
KOPPLUNG
AN
BSA
94
4
2.5.2
KOPPLUNG
AN
KLH
95
4.2.6
ANTIKOERPERHERSTELLUNG
95
4.2.6
1
POLYKLONALE
ANTIKOERPER
96
4.2.6.2
MONOKLONALE
ANTIKOERPER
96
4.2.6.2.1
VERWENDETE
ZELLEN
97
4.2.6.2.2
ZELLFUSIONSPROTOKOLL
97
4.2.6
2.3
KULTIVIERUNG
DER
HYBRIDOMZELLEN
98
4.2.6.2.4
NACHWEIS
DER
ANTIKOERPERPRODUKTION
99
4.2.7
TITERBESTIMMUNG
99
4.2
8
IMMUNOASSAYS
101
4.2
8.1
HERSTELLUNG
DER
STANDARDLOESUNGEN
101
4.2.8.2
RADIOIMMUNOASSAYS
102
4.2.8.3
ENZYMIMMUNOASSAYS
104
4.2.8.3.1
KOMPETITIVE
ENZYMIMMUNOASSAYS
104
4
2.9
FESTPHASENKOPPLUNG
109
4.2.9.1
BESCHICHTUNGSKONZENTRATIONEN
110
4.2.9.1
BLOCKIERUNGSLOESUNGEN
111
4.2.10
BINDUNGSKINETIKEN
112
5
ZUSAMMENFASSUNG
113
6
LITERATURVERZEICHNIS
114 |
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