Wirkung von Endothelinen auf die Funktion renaler juxtaglomerulärer Zellen:
Gespeichert in:
| 1. Verfasser: | |
|---|---|
| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
1996
|
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| Beschreibung: | V, 117 S. Ill., graph. Darst. |
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INHALTSVERZEICHNIS
I.
EINLEITUNG
.
1
II.
MATERIAL
UND
METHODEN
.
15
1.
ZELLKULTUR
DER
JUXTAGLOMERULAEREN
ZELLEN
AUS
MAEUSENIEREN
.
15
1.1
TIERE
.
15
1.2
ISOLIERUNG
JUXTAGLOMERULAERER
ZELLEN
.
15
1.3
PRIMAERKULTUR
JUXTAGLOMERULAERER
ZELLEN
.
17
2.
BESTIMMUNG
DER
RENINFFEISETZUNG
.
18
3.
PROTEINBESTIMMUNG
.
19
4.
BESTIMMUNG
DER
RENIN-MRNA-EXPRESSION
DURCH
QUANTITATIVE
RT-PCR
.
20
4.1
REVERSE
TRANSKRIPTASE-REAKTION
(RT)
.
20
4.1.1
LYSE
DER
ISOLIERTEN
JG-ZELLEN
.
20
4.1.2
ERSTSTRANGSYNTHESE
(REVERSE
TRANSKRIPTION)
.
20
4.2
POLYMERASE-KETTENREAKTION
(PCR)
.
21
4.3
AUSWERTUNG
.
23
5.
PATCH-CLAMP-MESSUNGEN
UND
KALZIUM-MIKROFLUOROMETRIE
AN
AFFERENTEN
ARTERIOLEN
.
25
6.
BESTIMMUNG
DER
ENDOTHELIN
MRNA-EXPRESSION
IN
VIVO
DURCH
RNASE
PROTECTION
ASSAY
.
27
6.1
BEHANDLUNG
DER
TIERE
.
27
6.2
ISOLIERUNG
DER
TOTAL-RNA
AUS
NIEREN
.
28
6.3
KLONIERUNG
DER
ENDOTHELINFRAGMENTE
.
29
6.3.1
HERSTELLUNG
KOMPETENTER
ZELLEN
.
29
6.3.2
TRANSFORMATION
VON
E.COLI
.
30
6.3.3
ISOLIERUNG
DER
PLASMID-DNA
.
31
6.3.4
DOPPELVERDAU
DER
PLASMID-DNA
.
32
6.3.5
ISOLIERUNG
DER
PLASMID-DNA
MIT
DER
"MAXIPREP"-METHODE
.
33
6.3.6
LINEARISIERUNG
DER
PLASMID-DNA
.
33
INHALTSVERZEICHNIS
6.4
RNASE
PROTECTION
ASSAY
.
35
6.4.1
IN
VITRO
TRANSKRIPTION
UND
RADIOAKTIVE
MARKIERUNG
DER
CRNA
SONDE
.
35
6.4.2
HYBRIDISIERUNG
DER
RNA-PROBEN
MIT
DER
SONDE
.
37
6.4.3
RNASE
PROTECTION
ASSAY
.
37
6.4
4
AUFTRENNUNG
DER
RNA-FRAGMENTE
AUF
EINEM
DENATURIERENDEN
POLYACRYLAMIDGEL
.
39
6.4.5
AUSWERTUNG
DER
POLYACRYLAMIDGELELEKTROPHORESE
.
39
7
STATISTIK
.
39
HI.
ERGEBNISSE
.
40
A.
EINFLUSS
DER
ENDOTHELINE
AUF
JG-ZELLEN
.
40
1
EFFEKTE
DER
ENDOTHELINE
AUF
DIE
RENINSEKRETION
.
40
1
1
EINFLUSS
DER
ENDOTHELINE
AUF
DIE
BASALE
RENINSEKRETION
.
40
1.2
EINFLUSS
DER
ENDOTHELINE
AUF
DIE
CAMP-STIMULIERTE
RENINSEKRETION
.
41
1.3
EINFLUSS
VON
ET-2
AUF
DIE
CAMP-UNABHAENGIGE
STIMULIERUNG
DER
RENINSEKRETION
.
45
1.4
CHARAKTERISIERUNG
DER
BETEILIGTEN
ENDOTHELINREZEPTOREN
.
47
2
EINFLUSS
DER
ENDOTHELINE
AUF
DIE
RENINGENEXPRESSION
.
52
2
1
EINFLUSS
DER
ENDOTHELINE
AUF
DIE
CAMP-STIMULIERTE
RENINGENEXPRESSION
.
52
2.2
EFFEKT
DES
ET
B
-REZEPTORAGONISTEN
SARAFOTOXIN
S6C
AUF
DIE
RENINGENEXPRESSION
.
56
3
SIGNALTRANSDUKTION
DER
ENDOTHELINE
IN
JG-ZELLEN
58
3
1
EFFEKTE
VON
ENDOTHELINEN
AUF
DIE
INTRAZELLULAERE
KALZIUMKONZENTRATION
.
58
3.2
ABHAENGIGKEIT
DER
ENDOTHELINWIRKUNG
VON
DER
EXTRAZELLULAEREN
KALZIUM
KONZENTRATION
.
60
3
3
BETEILIGUNG
DER
PROTEINKINASE
C
AN
DER
ENDOTHELINWIRKUNG
.
64
3.3.1
HEMMUNG
DER
PROTEINKINASE
C
DURCH
STAUROSPORIN
.
64
3.3.2
AKTIVIERUNG
DER
PROTEINKINASE
C
DURCH
DEN
PHORBOLESTER
PMA
.
67
INHALTSVERZEICHNIS
HI
B.
EINFLUSS
VON
HYPOXIE
AUF
DIE
RENALE
GENEXPRESSION
DER
ENDOTHEIINE
UND
AUF
DAS
RENINSYSTEM
.
70
1.
EINFLUSS
VON
HYPOXIE
AUF
DIE
RENALE
GENEXPRESSION
DER
ENDOTHEIINE
.
70
2.
EINFLUSS
VON
HYPOXIE
AUF
DAS
RENINSYSTEM
.
75
2.1
EINFLUSS
VON
HYPOXIE
AUF
DIE
RENINSEKRETION
UND
RENINGENEXPRESSION
IN
VIVO
.
75
2.1.1
EFFEKTE
VON
HYPOXIE
AUF
DIE
PLASMARENINAKTIVITAET
.
75
2.1.2
EFFEKTE
VON
HYPOXIE
AUF
DIE
RENINGENEXPRESSION
IN
VIVO
.
76
2.2
EINFLUSS
VON
HYPOXIE
AUF
DIE
RENINSEKRETION
UND
RENINGENEXPRESSION
JUXTAGLOMERULAERER
ZELLEN
IN
VITRO
.
78
2.2
1
EFFEKTE
VON
HYPOXIE
AUF
DIE
RENINSEKRETION
AUS
ISOLIERTEN
JUXTAGLOMERULAEREN
ZELLEN
.
78
2.2.2
EFFEKTE
VON
HYPOXIE
AUF
DIE
RENINGENEXPRESSION
ISOLIERTER
JUXTAGLOMERULAERER
ZELLEN
.
79
IV.
DISKUSSION
.
82
1.
EINFLUSS
VON
ENDOTHELINEN
AUF
DAS
RENINSYSTEM
.
82
1.1
EINFLUSS
VON
ENDOTHELINEN
AUF
DIE
RENINFREISETZUNG
UND
RENINGENEXPRESSION
VON
ISOLIERTEN
JG-ZELLEN
.
82
1.2
ENDOTHELINREZEPTOREN
.
84
1.3
SIGNALTRANSDUKTION
DER
ENDOTHEIINE
IN
JUXTAGLOMERULAEREN
ZELLEN
.
86
2.
EINFLUSS
VON
HYPOXIE
AUF
DIE
RENALE
GENEXPRESSION
VON
ENDOTHELINEN
.
90
3.
EINFLUSS
VON
HYPOXIE
AUF
DAS
RENINSYSTEM
IN
VIVO
UND
IN
VITRO
.
93
V.
ZUSAMMENFASSUNG
.
95
VI.
LITERATURVERZEICHNIS
.
97 |
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| author | Ritthaler, Theresia |
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