Mechanismen der Translokation langkettiger amphiphiler Anionen in biologischen Membranen: Studien an Erythrozyten
Gespeichert in:
| 1. Verfasser: | |
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
Aachen
Shaker
1996
|
| Ausgabe: | Als Ms. gedr. |
| Schriftenreihe: | Berichte aus der Chemie
|
| Schlagworte: | |
| Online-Zugang: | Inhaltsverzeichnis |
| Beschreibung: | Zugl.: Aachen, Techn. Hochsch., Diss., 1995 |
| Beschreibung: | VIII, 143 S. graph. Darst. |
| ISBN: | 3826511611 |
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III
INHALTSVERZEICHNIS
1.
EINLEITUNG
.
1
1.1
ALLGEMEINES
.
1
1.2.
DAS
ANIONENAUSTAUSCHPROTEIN
BANDE
3
.
5
1.3
GRUNDLAGEN
DER
FLUORESZENZSPEKTROSKOPIE
.
9
1.4
AUFGABENSTELLUNG
UND
ZIELE
DIESER
ARBEIT
.
12
2.
MATERIAL
UND
METHODEN
.
14
2.1
MATERIAL
.
14
2.2
METHODEN
.
16
2.2.1
SYNTHESEN
.
16
2.2.1.1
SYNTHESE
VON
5-(N-DECYL)AMINONAPHTHALIN-2-SULFONSAEURE
.
16
2.2.1.2
SYNTHESE
VON
6-DECYLNAPHTHALIN-2-SULFONSAEURE
.
17
2.2.2
SPEKTROSKOPISCHE
CHARAKTERISIERUNG
DER
SONDEN
.
20
2.2.3
GEWINNUNG
VON
ERYTHROZYTEN
.
21
2.2.4
BESTIMMUNG
DER
TRANSVERSALEN
REORIENTIERUNG
VOM
AUSSENBLATT
INS
INNENBLATT
DER
ERYTHROZYTENMEMBRAN
(FLIP)
.
21
BESTIMMUNG
DER
STATIONAEREN
VERTEILUNG
.
23
2.2.5
BESTIMMUNG
DER
TRANSVERSALEN
REORIENTIERUNG
VOM
INNENBLATT
INS
AUSSENBLATT
(FLOP)
.
23
2.2.6
AUSWERTUNG
DER
KINETISCHEN
DATEN
.
23
2.2.7
BESTIMMUNG
DES
MEMBRAN/WASSER-VERTEILUNGSKOEFFIZIENTEN
.
26
2.2.8
MODIFIKATION
VON
MEMBRANPROTEINEN
DURCH
KOVALENT
BINDENDE
REAGENTIEN
.
26
2.2.9
NICHT-KOVALENT
BINDENDE
HEMMSTOFFE
IM
FLIPMEDIUM
.
28
IV
2.2.10
FLIPMESSUNG
IN
GEGENWART
VON
ALKOHOLEN
.
28
2.2.11
ERYTHROZYTENMODIFIKATION
MIT
DIAMID
.
29
2.2.12
MODIFIKATION
VON
MEMBRANPROTEINEN
DURCH
PAPAIN
UND
CHYMOTRYPSIN
.
29
2.2.13
ATP-ABHAENGIGKEIT
.
29
2.2.14
PH-EXPERIMENTE
.
30
2.2.15
FLIPEXPERIMENTE
IN
UNTERSCHIEDLICHEM
ANIONENMILIEU
.
31
2.2.16
VARIATION
DES
MEMBRANPOTENTIALS
AN
DER
ERYTHROZYTENMEMBRAN
.
31
2.2.17
DIE
STATIONAERE
VERTEILUNG
VON
DENSA
NACH
EINBAU
LANGKETTIGER
IONISCHER
AMPHIPHILE
.
32
2.2.18
PRAEPARATION
CHLORIDARMER
RESEALED
CELLS
.
33
3.
ERGEBNISSE
.
34
3.1
SYNTHESE
UND
CHARAKTERISIERUNG
DER
FLUORESZENZSONDEN
.
34
3.1.1
SYNTHESE
VON
5-(N-DECYL)AMINONAPHTHALIN-2-SULFONSAEURE
.
34
3.1.2
SYNTHESE
VON
6-DECYLNAPHTHALIN-2-SULFONSAEURE
.
36
3.1.3
CHARAKTERISIERUNG
DER
EINGESETZTEN
SONDEN
.
38
3.2
FLIPMESSUNGEN
.
39
3.3
BESTIMMUNG
DES
MEMBRAN/WASSER-VERTEILUNGSKOEFFIZIENTEN
.
42
3.4
EINWAERTSTRANSLOKATION
(FLIP)
UNTER
STANDARDBEDINGUNGEN
.
43
3.5
DER
EINFLUSS
DER
TEMPERATUR
.
45
3.6
AUSWAERTSTRANSLOKATION
(FLOP)
UNTER
STANDARDBEDINGUNGEN
.
47
3.7
IST
DAS
ANIONENAUSTAUSCHPROTEIN
BANDE
3
AM
FLIPPROZESS
BETEILIGT?
.
49
3.7.1
MODIFIKATION
DURCH
KOVALENT
BINDENDE
REAGENTIEN
.
52
STILBENDISULFONATE
.
52
TRINITROBENZOLSULFONSAEURE
.
56
EOSINISOTHIOCYANAT
UND
EOSINMALEIMID
.
56
WOODWARD'S
REAGENZ
K
.
58
3.7.2
DER
EINFLUSS
NICHT-KOVALENT
BINDENDER
HEMMSTOFFE
.
58
DNDS
.
59
PYRIDOXAL-5'-PHOSPHAT
.
59
NIFLUMINSAEURE
.
60
PHLORETIN
.
60
ERYTHROSIN
.
61
DIPYRIDAMOL
.
61
MEROCYANIN
540
.
62
3.7.3
HEMMUNG
DES
FLOP
.
63
3.7.4
MODIFIKATION
VON
BANDE
3
DURCH
PAPAIN
.
63
DER
EINFLUSS
VON
HEMMSTOFFEN
NACH
PAPAIN-ABBAU
.
67
3.8
DER
EINFLUSS
VON
ALKOHOLEN
.
69
3.9
DER
EINFLUSS
EINER
DIAMID-INDUZIERTEN
OXIDATION
VON
SH-GRUPPEN
IN
MEMBRANPROTEINEN
.
73
3.10
ATP-ABHAENGIGKEIT
DES
FLIP
.
75
3.11
FLIPGESCHWINDIGKEIT
IN
ERYTHROZYTEN
UNTERSCHIEDLICHER
SPEZIES
.
76
SCHAF,
RATTE
UND
KANINCHEN
.
76
NEUNAUGE
(LAMPETRA
FLUVIATILIS)
.
78
3.12
DER
EINFLUSS
VERSCHIEDENER
EXPERIMENTELLER
RANDBEDINGUNGEN
AUF
DEN
FLIP
.
79
KONZENTRATIONSABHAENGIGKEIT
DES
FLIP
.
79
DER
EINFLUSS
DES
PH
.
81
FLIPEXPERIMENTE
IN
UNTERSCHIEDLICHEM
ANIONENMILIEU
.
83
VI
3.13
HEMMUNG
DES
FLIP
DURCH
CHLORIDIM
MEDIUM
.
84
3.14
DER
EINFLUSS
DES
MEMBRANPOTENTIALS
.
86
EINFLUSS
EINES
CHLORID-DIFFUSIONSPOTENTIALS
.
88
EINFLUSS
EINES
KALIUM-DIFIUSIONSPOTENTIALS
.
92
3.15
DER
EINFLUSS
VON
GRENZFLAECHENPOTENTIALEN
AUF
DIE
STATIONAERE
VERTEILUNG
VON
DENSA
.
95
3.16
FLIPEXPERIMENTE
MIT
6-DECYLNAPHTHALIN-2-SULFONSAEURE
.
98
4.
DISKUSSION
.
102
4.1
FLIP
VON
DENSA
UEBER
DAS
ANIONENAUSTAUSCHPROTEIN
BANDE
3
.
105
PROTEOLYTISCHER
ABBAU
VON
BANDE
3
DURCH
PAPAIN
.
112
DER
EINFLUSS
VON
ALKOHOLEN
.
115
4.2
DER
DIDS-INSENSITIVE
ANTEIL
DES
FLIP
.
116
4.3
MOEGLICHE
URSACHEN
DER
ASYMMETRISCHEN
STATIONAEREN
VERTEILUNG
VON
DENSA
.
118
EINFLUESSE
DES
TRANSMEMBRANAEREN
POTENTIALS
UND
DES
GRENZFLAECHENPOTENTIALS
.
118
5.
ZUSAMMENFASSUNG
.
125
6.
LITERATURVERZEICHNIS
.
129 |
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