Phospholipase-C-Aktivität in der Mammakarzinomzellinie MCF-7 und in Mammakarzinomgeweben:
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Sprache: | German |
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1994
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Beschreibung: | Heidelberg, Univ., Diss., 1995 (Nicht für den Austausch) |
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- IV -
INHALTSVERZEICHNIS
SEITE
1. ABKUERZUNGSVERZEICHNIS 1-3
2. EINLEITUNG
4-16
2.1 DAS MAMMAKARZINOM 5
2.1.1 DIE NORMALE ENTWICKLUNG DER BRUSTDRUESE 5
2.1.2 DIE ENTSTEHUNG DES MAMMAKARZINOMS 6
2.1.3 DER EINFLUSS DER OESTROGENE AUF DIE ENTWICKLUNG UND
AUSBREITUNG DES MAMMAKARZINOMS ~ 7
2.1.4 DIE PROGNOSEFAKTOREN DES MAMMAKARZINOMS 7
2.1.5 DIE MAMMAKARZINOMZELLINIE MCF-7 9
2.2 DIE SIGNALUEBERTRAGUNG IN DER ZELLE 10
2.2.1 DAS ADENYLATZYKLASESYSTEM 10
2.2.2 DAS PHOSPHOLIPASE C-SYSTEM 11
2.2.2.1 DIE PHOSPHOINOSITIDE 12
2.2.2.2 DIE PHOSPHOLIPASE C 12
2.2.2.3 DAS DIACYLGLYCEROL 14
2.2.2.4 DIE INOSITOLPHOSPHATE 15
2.3 PHOSPHATIDYLINOSITOL-UMSATZ UND ZELLPROLIFERATION 16
3. ZIELSETZUNG DER ARBEIT 17 -18
4. MATERIAL UND METHODEN 19 - 33
4.1 MATERIAL 20
4.1.1 ZELLKULTUR 20
4.1.2 GEWEBE 20
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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- V-
SEITE
4.1.3 LOESUNGEN 20
4.1.4 SUBSTANZEN UND FERTIGLOESUNGEN 22
4.1.5 LABORZUBEHOER 23
4.1.6 GERATE 23
4.2 METHODEN 24
4.2.1 ZELLKULTUR DER MCF-7-ZELLINIE 24
4.2.2 HERSTELLUNG DES HOMOGEN&TES UND DES
1000 G-UEBERSTANDES 25
4.2.3 HERSTELLUNG DER MEMBRANFRAKTION AUS DEM
1000 G-UEBERSTAND VON MAMMAKARZINOMGEWEBE 28
4.2.4 BESTIMMUNG DER PHOSPHOLIPASE C- AKTIVITAET 28
4.2.5 PROTEINBESTIMMUNG NACH BRADFORD 31
4.2.6 STATISTISCHE METHODEN 33
5. ERGEBNISSE 34-57
5.1 CHARAKTERISIERUNG DER PHOSPHOLIPASE C- AKTIVITAET
IN MCF-7-ZELLEN 35
5.1.1 PHOSPHOLIPASE C-AKTIVITAET IN ABHAENGIGKEIT VON DER
PROTEINMENGE MIT PHOSPHATIDYLINOSITOLBISPHOSPHAT ALS SUBSTRAT 36
5.1.2 UMSATZ VON PHOSPHATIDYLINOSITOL, PHOSPHATIDYLINOSITOLMONO-
PHOSPHAT UND PHOSPHATIDYLINOSITOLBISPHOSPHAT IN ABHAENGIGKEIT
VON DER ZEIT 37
5.1.2.1 UMSATZ VON PHOSPHATIDYLINOSITOL IN ABHAENGIGKEIT VON DER
INKUBATIONSZEIT 37
5.1.2.2 UMSATZ VON PHOSPHATIDYLINOSITOLMONOPHOSPHAT UND
PHOSPHATIDYLINOSITOLBISPHOSPHAT IN ABHAENGIGKEIT VON DER
INKUBATIONSDAUER 38
5.1.3 PLC-SAETTIGUNGSSTUDIE MIT PHOSPHATIDYLINOSITL ALS SUBSTRAT 39
5.1.3.1 ISOTOPENVERDRAENGUNGSKURVE 39
5.1.3.2 PLC-AKTIVITAET IN ABHAENGIGKEIT VON DER
SUBSTRATKONZENTRATION 40
-VI-
SEITE
5.1.4 EINFLUSS DES PH-WERTES AUF DIE PLC-AKTIVITAET 42
5.1.4.1 SPONTANE INOSITOLPHOSPHAT-FLREISETZUNG 42
5. 1.4.2 ABHAENGIGKEIT DER PIX-AKTIVITAET VOM PH-WERT
MIT PHOSPHATIDYLINOSITOL ALS SUBSTRAT 43
5.1.4.3 ABHAENGIGKEIT DER PLC-AKTIVITAET VOM PH-WERT MIT
PHOSPHATIDYLINOSITOLBISPHOSPHAT ALS SUBSTRAT 44
5.1.5 VERGLEICH DER PLC-AKTIVITAET DER MCF-7-ZEUEN
VERSCHIEDENER PASSAGENUMMEM 45
5.2 PLC-AKTIVITAET IN MAMMAKARZINOMGEWEBE 46
5.2.1 PHOSPHOLIPASE C-AKTIVITAET UND PROTEINGEHALT 46
5.2.2 UMSATZ VON PI IN ABHAENGIGKEIT VON DER ZEIT 47
5.2.3 VERGLEICH VON 1000 G-UEBERSTAND, ZYTOSOL- UND
MEMBRANFRAKTION BEZUEGLICH DER PLC-AKTIVITAET 48
5.2.4 PLC-AKTIVITAET BEI VERSCHIEDENEN SUBSTRATEN 50
5.2.5 AKTIVITAETSVERAENDERUNGEN DURCH LAGERUNG BEI -80 C 51
5.3 VERGLEICH DER PIX-AKTIVITAET VERSCHIEDENER
MAM
MAKAR^INOMGETVEBC MIT KLINISCHEN ^)ATEN 52
5.3.1 STEROIDREZEPTORGEHALT 53
5.3.2 TNM-STADIENEINTEILUNG 54
5.3.3 GRADING 56
S
5.3.4 S-PHASE 57
5.3.5 DNS-INDEX 57
5.3.6 MENOPAUSENSTATUS 57
5.3.7 HISTOLOGIE 57
6. DISKUSSION 58 YY 75
6.1 UEBERBLICK 59
6.2 CHARAKTERISIERUNG DER PHOSPHOLIPASE C IM MAMMAKARZINOM 63
6.2.1 PROTEINGEHALT 63
6.2.2 INKUBATIONSDAUER 64
6.2.3 ENZYMKINETIK BEI VERSCHIEDENEN SUBSTRATEN 65
6.2.4 SUBSTRATKONZENTRATION 66
- VN-
SEITE
6.2.5 PH-WERT 67
6.2.6 PLC-AKTIVITAET IN ZYTOSOL UND MEMBRANFRAKTION 69
6.2.7 AKTIVITAETSVERAENDERUNG DURCH LAGERUNG 71
6.3 VERGLEICH DER PLC-AKTIVITAET IN
MAMMAKARZINOMGEWEBEN 72
7. ZUSAMMENFASSUNG 76 - 78
8. LITERATURVERZEICHNIS 79 - 93
9. TABELLARISCHER ANHANG 94-98
10. LEBENSLAUF 99-100
11. DANKSAGUNG 101 -102 |
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