Die Assoziation der MHC-Klasse-II-Moleküle mit der Invarianten-Kette:
Gespeichert in:
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Sprache: | German |
Veröffentlicht: |
1995
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INHALTSVERZEICHNIS
A. EINLEITUNG 1
A.1 DAS IMMUNSYSTEM 1
A.2 ANTIGENPROZESSIERUNG UND -PRAESENTATION 2
A.3 DIE MHC MOLEKUELE: STRUKTUR UND VORKOMMEN 6
A.4 DIE MHC KLASSE LL-ASSOZIIERTE INVARIANTE KETTE 8
A. 5 ZIELSETZUNG DER ARBEIT 13
B. MATERIAL UND METHODEN 15
B.1 MOLEKULARBIOLOGISCHE METHODEN 15
B.1.1 SCHNELLPRAEPARATION KLEINER PLASMIDMENGEN 15
B.1.2 PRAEPARATION GROSSER PLASMIDMENGEN 16
B.1.3. ISOLATION VON DNA-FRAGMENTEN AUS AGAROSEGELEN 17
B.1.4 MODIFIKATION VON DNA-FRAGMENTEN 17
B.1.5 KLONIERUNG VON OLIGONUKLEOTIDEN 18
B.1.6 HERSTELLUNG KOMPETENTER BAKTERIEN UND 20
TANSFORMATION
B.1.7 SEQUENZANALYSE 21
B.2 BIOCHEMISCHE METHODEN 22
B.2.1 BIOSYNTHETISCHE MARKIERUNG VON PROTEINEN UND 22
HERSTELLUNG VON ZELLYSATEN
B.2.2 IMMUNPRAEZIPITATION 22
B.2.3 AFFINITAETSREINIGUNG VON GLYKOPROTEINEN UEBER LEKTIN- 24
SAEULEN
B.2.4 BEHANDLUNG IMMUNPRAEZIPITIERTER GLYKOPROTEINE MIT 24
ENDOGLYKOSIDASE H
B.2.5 SDS-POLYACRYLAMIDGELELEKTROPHORESE UND 25
FLUOROGRAPHIE
B.2.6 ZWEIDIMENSIONALE GELELEKTROPHORESE NEPHGE/SDS- 25
PAGE
B.3 ZELLBIOLOGISCHE METHODEN 26
B.3.1 TRANSIENTE EXPRESSION MONIERTER GENE BZW. CDNAS 26
IN COS-ZELLEN
B.3.2 HERSTELLUNG VON HYBRIDOMUEBERSTAENDEN 27
B. 4 VERWENDETE COMPUTERSOFTWARE 28
C. ERGEBNISSE
29
C.1 BESCHREIBUNG DER DELETIONSMUTANTEN DER 29
INVARIANTEN KETTE DER MAUS
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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C.2 EXPRESSION DER DELETIONSPROTEINE DER INVARIANTEN 31
KETTE IN COS1-ZELLEN UND ASSOZIATION MIT MHC
KLASSE II MOLEKUELEN
C.3 CHARAKTERISIERUNG DER LI-REGION, DIE FUER DIE 35
ASSOZIATION MIT MHC KLASSE II MOLEKUELEN
VERANTWORTLICH IST
C.4 KLONIERUNG HUMANER LI-DELETIONSKONSTRUKTE ZUR 37
NAEHEREN CHARAKTERISIERUNG DER MHC KLASSE II
BINDUNGSSTELLE UND EXPRESSION DER LI-MUTANTEN IN
COS1-ZELLEN
C.5 ASSOZIATION HUMANER LI-DELETIONSPROTEINE MIT MHC 40
KLASSE IL-MOLEKUELEN
C.6 UEBERTRAGUNG DER MHC KLASSE II BINDUNGSSTELLE VON 44
LI AUF DEN TRANSFERRINREZEPTOR
C.7 DER BEREICH ZWISCHEN DEN AMINOSAEUREN 81 UND 103 45
DER LI ENTHAELT DIREKTE BINDUNGSSEQUENZEN FUER EINE
ASSOZIATION MIT MHC KLASSE II MOLEKUELEN
C.8 KONSTRUKTION REKOMBINANTER LI-MOLEKUELE ZUR 49
UNTERSUCHUNG, OB AS 81 - 90 DER CBS DIREKT AN
DER BINDUNG AN MHC KLASSE II MOLEKUELE BETEILIGT SIND
C.9 EXPRESSION DES REKOMBINANTEN MA90-127 UND 51
ASSOZIATION MIT MHC KLASSE II MOLEKUELEN
C. 10 HERSTELLUNG REKOMBINANTER MOLEKUELE, BEI DENEN DIE 51
CBS DURCH EIN ANTIGENES PEPTID AUSGETAUSCHT
WURDE UND EXPRESSION IN COS-ZELLEN
D. DISKUSSION 59
D.1 DIE MHC KLASSE II BINDUNGSSTELLE DER INVARIANTEN 59
KETTE
D.2 FUNKTIONELLE DOMAENEN DER INVARIANTEN KETTE 61
D.3 CLIP: PEPTIDE, DIE IN DER CBS ENTHALTEN SIND 62
D.3.1 CLIP SIND VERMUTLICH PEPTIDE DER INVARIANTEN KETTE, 62
DIE LAENGER ALS DIE ANDEREN DEGRADATIONSFRAGMENTE
AN MHC KLASSE II GEBUNDEN BLEIBEN
D.4 UNTERSCHEIDEN SICH DIE BINDUNGSMECHANISMEN DER 66
INTAKTEN LI UND CLIP ?
D.5 ANDERE BINDUNGSPARTNER VON MHC KLASSE II 70
MOLEKUELEN UND DER INVARIANTEN KETTE
D.6 AUSBLICK
73
E
F
G
ZUSAMMENFASSUNG
LITERATURVERZEICHNIS
ANHANG
74
75
89 |
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