Somatostatin mRNA, Neuropeptid Y und Parvalbumin nach vorübergehender zerebraler Ischämie im Hippokampus der Ratte: Darstellung ihrer Ko-Lokalisation mit Hilfe der In-situ-Hybridisierung und Immunhistochemie
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1995
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INHALTSVERZEICHNIS
1
EINFUEHRUNG
.
I
1.
1
PROBLEMKREIS
.
I
1.1.1
GESCHICHTE
DER
ISCHAEMIEFORSCHUNG
.
1
1.1.2
NEUROPEPTIDE
.
4
1.
2
PROBLEMSTELLUNG
.
6
1.
2.
1
METHODISCHE
PROBLEME
.
6
1.
2.
2
INHALTLICHE
FRAGESTELLUNG
.
6
1.2.2.1
SOMATOSTATIN
MRNA
UND
SOMATOSTATIN
PEPTID
NACH
ZEREBRALER
ISCHAEMIE
.
7
1.2.2.2
KO-LOKALISATION
VON
SOMATOSTATIN
MRNA
UND
NEUROPEPTID
Y
UNTER
BERUECKSICHTIGUNG
DER
ISCHAEMISCHEN
VULNERABILITAET
.
8
1.2.2.3
KO-LOKALISATION
VON
SOMATOSTATIN
MRNA
UND
PARVALBUMIN
NACH
ZEREBRALER
ISCHAEMIE
.
9
1.
2.
3
ZUSAMMENFASSUNG
DER
FRAGESTELLUNG
.
10
2
MATERIAL
UND
METHODEN
.
11
2.
1
TIERMODELL
.
11
2.
2
GEWEBSFIXATION
.
14
2.
2.
1
PERFUSIONSFIXATION
.
14
2.
2.
2
SCHNITTFUEHRUNG
.
15
2.
3
IN
SITU
HYBRIDISIERUNG
.
15
2.
3.
1
IN
SITU
HYBRIDISIERUNG
MIT
ENZYMATISCH
MARKIERTEN
PROBEN
.
15
2.
3.
2
HYBRIDISIERUNG
.
17
2.
3.
3
POSTHYBRIDISIERUNGSSPUELUNG
.
17
2.
3.
4
FARBREAKTION
DER
ALKALISCHEN
PHOSPHATASE
.
18
2.
3.
5
DIE
HERSTELLUNG
DES
HYBRIDISIERUNGSPUFFERS
.
18
2.3.5.1
DENATURIERUNG
DER
DNA
.
18
2.3.5.2
RNASE-FREIES
ARBEITSFELD
.
19
2.
4
IMMUNHISTOCHEMIE
.
20
2.
4.
1
PEROXIDASE/ANTIPEROXIDASE
(PAP)
METHODE
.
20
2.4.1.1
GRUNDPRINZIP
DER
PEROXIDASE/ANTIPEROXIDASE
METHODE
.
20
2.4.1.2
VERSUCHSPROTOKOLL
DER
PEROXIDASE/ANTIPEROXIDASE
METHODE
.
21
2.
4.
2
DOPPELFARBETECHNIK:
IN
SITU
HYBRIDISIERUNG
UND
IMMUNHISTOCHEMIE
23
II
INHALTSVERZEICHNIS
2.
5
KONTROLLEN
.
24
2.
5.
1
ISCHAEMIE
.
24
2.
5.
2
IN
SITU
HYBRIDISIERUNG/IMMUNHISTOCHEMIE
.
25
2.
5.
3
DOPPELFARBETECHNIK
.
25
2.
6
DATENERHEBUNG
.
25
2.
6.
1
ZELLZAEHLUNG
.
25
2.
6.
2
STATISTIK
.
26
2.
6
MATERIALANHANG
.
27
2.
6.
1
HERSTELLUNG
DER
VERWENDETEN
LOESUNGEN
.
27
2.
6.
2
MATERIALLISTE
.
30
3
ERGEBNISSE
.
31
3.
1
ISCHAEMIE
.
31
3.
1.
1
MESSPARAMETER
DER
VERSUCHSTIERE
.
31
3.
1.
2
HAEMATOXYLIN-EOSIN
FAERBUNG
UND
GFAP
IMMUNHISTOCHEMIE
.
34
3.1.2.1
NOMENKLATUR
.
34
3.1.2.2
GFAP
IMMUNFARBUNG
.
34
3.1.2.3
HAEMATOXYLIN-EOSIN
FAERBUNG
.
36
3.
2
SOMATOSTATIN
PEPTID
UND
SOMATOSTATIN
MRNA
NACH
ZEREBRALER
ISCHAEMIE
.
38
3.
2.
1
KONTROLLEN
.
38
3.2.1.1
HILUS
DENTATUS
.
38
3.2.1.2
CAI
REGION
.
38
3.2.1.3
SOMATOSTATIN
MRNA
.
40
3.
2.
2
POSTISCHAEMISCHE
VERAENDERUNG
VON
SOMATOSTATIN
MRNA
UND
SO
MATOSTATIN
PEPTID
.
40
3.2.2.1
HILUS
DENTATUS
.
40
3.2.2.2
CAI
REGION
.
44
3.
3
KO-LOKALISATION
VON
NEUROPEPTID
Y
UND
SOMATOSTATIN
MRNA
NACH
ZEREBRALER
ISCHAEMIE
.
47
3.
3.
1
KONTROLLEN
.
47
3.3.1.1
HISTOLOGIE
DER
NEUROPEPTID
Y
IMMUNRAKTIVEN
NEURONE
IM
HILUS
DENTATUS
UND
DER
CAI
REGION
.
47
INHALTSVERZEICHNIS
IN
3.3.1.2
HISTOLOGIE
VON
NEUROPEPDID
Y
UND
SOMATOSTATIN
MRNA
IN
DER
DOPPELFAERBUNG
.
48
3.
3.
2
POSTISCHAEMISCHE
VERAENDERUNGEN
DER
KO-LOKALISATION
VON
NEURO
PEPTID
Y
UND
SOMATOSTATIN
MRNA
.
49
3.3.2.1
HILUS
DENTATUS
.
49
3.3.2.2
CAI
REGION
.
53
3.
4
KO-LOKALISATION
VON
SOMATOSTATIN
MRNA
UND
PARVALBUMIN
NACH
ZEREBRALER
ISCHAEMIE
.
56
3.
4.
1
KONTROLLEN
.
56
3.4.1.1
HISTOLOGIE
DER
PARVALBUMIN
IMMUNRAKTIVEN
NEURONE
IN
DER
AREA
DENTA
UND
DER
CAI
REGION
.
56
3.4.1.2
HISTOLOGIE
VON
PARVALBUMIN
IMMUNREAKTIVITAET
UND
SOMA
TOSTATIN
MRNA
IN
DER
DOPPELFAERBUNG
.
57
3.4.1.3
KONTROLLE
ZUR
DOPPELFAERBETECHNIK
.
61
3.
4.
2
POSTISCHAEMISCHE
VERAENDERUNGEN
DER
KO-LOKALISATION
VON
SOMATOSTATIN
MRNA
UND
PARVALBUMIN
.
62
3.4.2.1
AREA
DENTATA
.
62
3.4.2.2
CAI
REGION
.
64
4
DISKUSSION
.
67
4.
1
SOMATOSATIN
MRNA
UND
SOMATOSTATIN
PEPTID
NACH
VORUEBERGEHENDER
ZEREBRALEN
ISCHAEMIE
.
68
4.
1.
1
VERLUST
VON
SOMATOSTATIN
MRNA
UND
SOMATOSTATIN
PEPTID
IM
HILUS
DENTATUS
.
68
4.
1.
2
VORUEBERGEHENDE
EXPRESSIONSMINDERUNG
VON
SOMATOSTATIN
MRNA
UND
SOMATOSTATIN
PEPTID
IN
DER
CAI
REGION
.
69
4.
1.
3
FUNKTION
VON
SOMATOSTATIN
IM
ZNS
UND
PATHOLOGISCHE
ASPEKTE
.
.
71
4.
2
KO-LOKALISATION
VON
NEUROPEPTID
Y
UND
SOMATOSTATIN
MRNA
NACH
ZEREBRALER
ISCHAEMIE
.
73
4.
2.
1
NEUROPEPTID
Y
NACH
ISCHAEMIE
IM
HILUS
DENTATUS
.
73
4.
2.
2
FEHLENDE
EXPRESSION
VON
NEUROPEPTID
Y
IN
SOMATOSTATIN
UND
NEUROPEPTID
Y
KO-LOKALISIERTEN
NEURONEN
DER
CAI
REGION
NACH
ISCHAEMIE
.
75
4.
2.
3
FUNKTION
VON
NEUROPEPTID
Y
IM
ZENTRALEN
UND
PERIPHEREN
NERVENSYSTEM
.
76
IV
INHALTSVERZEICHNIS
4.
3
KO-LOKALISATION
VON
PARVALBUMIN
UND
SOMATOSTATIN
MRNA
NACH
ZEREBRALER
ISCHAEMIE
.
78
4.
3.
1
NEUROTOXITAET
VON
KALZIUM
UND
FUNKTIONELLE
BEDEUTUNG
DER
KALZIUM
BINDENDEN
PROTEINEN
.
78
4.
3.
2
KO-LOKALISATION
VON
SOMATOSTATIN
MRNA
UND
PARVALBUMIN
IM
HILUS
DENTATUS
.
80
4.
3.
3
KO-LOKALISATION
VON
SOMATOSTATIN
MRNA
UND
PARVALBUMIN
IN
DER
CAI
REGION
.
80
4.
4
METHODISCHE
ASPEKTE
.
82
4.
4.
1
VORZUEGE
UND
BEGRENZUNGEN
DES
VERWENDETEN
TIERMODELLS
.
82
4.
4.
2
IN
SITU
HYBRIDISIERUNG
MIT
NICHT-RADIOAKTIV
MARKIERTEN
PROBEN
.
84
4.
4.
3
DOPPELFARBETECHNIK
.
85
4.
5
PATHOPHYIOLOGIE
DES
VERLUSTES
VON
SOMATOSTATINERGEN
HILUSNEURONEN
UND
DES
VERZOEGERTEN
NEURONENTODES
IN
DER
CAI
REGION:
SPEKULATION
UND
HYPOTHESEN
.
88
4.
5.
1
HISTOCHEMISCHE
EIGENSCHAFTEN,
SYNAPTISCHE
VERSCHALTUNG
UND
PATHOPHYSIOLOGISCHE
BEDEUTUNG
DER
SOMATOSTATINERGEN
ZELLEN
IM
HILUS
DENTATUS
FUER
DEN
PYRAMIDENZELLVERLUST
IN
DER
CAI
REGION
.
88
4.5.1.1
IMMUNHISTOCHEMISCHES
PROFIL
DER
SOMATOSTATINERGEN
ZELLE
IM
HILUS
DENTATUS
.
89
4.5.1.2
SYNAPTISCHES
VERSCHALTUNGSMUSTER
VON
VIER
NEURONENTYPEN
IM
HILUS
DER
AREA
DENTATA
.
90
4.5.1.3
GLEICHGEWICHT
VON
EXZITATION
UND
INHIBITION
IM
HILUS
DENTATUS
.
92
4.
5.
2
NICHT-PYRAMIDENZELLEN
IN
DER
CAI
REGION
UND
IHRE
FUNKTIONELLE
ROLLE
FUER
DEN
VERZOEGERTEN
NEURONENTOD
IN
DER
CAI
REGION:
SPEKULATION
UND
HYPOTHESEN
.
95
4.5.2.1
ZEREBRALE
ISCHAEMIE
UND
NEUROTRANSMITTER:
EXZITOTOXISCHE
HYPOTHESE
VON
GLUTAMAT
.
95
4.5.2.2
NICHT-PYRAMIDENZELLEN
DER
CAI
REGION
UND
IHRE
BEDEUTUNG
FUER
DAS
GLEICHGEWICHT
VON
INHIBITION
UND
EXZITATION
.
96
5
ZUSAMMENFASSUNG
.
101
6
LITERATURVERZEICHNIS
.
103 |
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