Anaerobe Spaltung von O-Methylethern und Übertragung von C 1 -Einheiten auf Folsäure durch Sporomusa ovata:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
1995
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| Beschreibung: | 103 S. graph. Darst. |
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INHALTSVERZEICHNIS
EINLEITUNG
1
O-METHYLETHER,
EIGENSCHAFTEN
UND
VORKOMMEN
1
AEROBE
ETHERPALTUNG
2
ANAEROBE
ETHERSPALTUNG
2
MATERIAL
UND
METHODEN
7
1.
VERWENDETES
MATERIAL
7
1.1
BAKTERIENSTAMM
7
1.2
MATERIALIEN
7
1.3
GERAETE
8
2.
ZUECHTUNG
8
2.1
ZUECHTUNG
VON
S.
OVATA
AUF
METHOXYLIERTEN
AROMATISCHEN
VERBINDUNGEN
PLUS
CO
2
ODER
METANOL
PLUS
CO
2
8
2.2
MEDIENZUSAMMENSETZUNG
9
2.3
[
57
CO]-MARKIERUNG
DER
CORRINOID-HALTIGEN
PROTEINE
11
2.4
ZELLERNTE
11
2.5
HERSTELLUNG
VON
ZELLFREIEN
EXTRAKTEN
11
3.
BESTIMMUNGSMETHODEN
12
3.1
TROCKENGEWICHTSBESTIMMUNG
12
3.2
ELEMENTEBESTIMMUNG
IN
DER
ZELLTROCKENMASSE
12
3.3
FETTSAUREBESTIMMUNG
12
3.4
PROTEINBESTIMMUNG
13
3.5
ENZYMATISCHE
BESTIMMUNG
VON
ESSIGSAEURE
13
3.6
ENZYMATISCHE
BESTIMMUNG
VON
ADENOSINTRIPHOSPHAT
(ATP)
13
3.7
MESSUNG
RADIOAKTIVER
VERBINDUNGEN
14
3.8
CORRINOIDBESTIMMUNGEN
14
4.
CHROMATOGRAPHISCHE
VERFAHREN
UND
ISOLIERUNGSMETHODEN
14
4.1
GASCHROMATOGRAPHISCHE
BESTIMMUNG
VON
ESSIGSAEURE
UND
METHANOL
14
4.2
HOCHLEISTUNGS-FLUESSIGKEITSCHROMATOGRAPHIE
(HPLC)
15
4.3
ISOLIERUNG
VON
,3
C-MARKIERTER
ESSIGSAEURE
17
4.4
COBAMIDEXTRAKTION
AUS
SPOROMUSA
OVATA
17
5.
CHEMISCHE
SYNTHESEN
18
5.1
HERSTELLUNG
VON
[4
,4
C-METHOXY/)-3,4-DIMETHOXYBENZOESAEURE
18
5.2
DARSTELLUNG
ALKYLIERTER
CORRINOIDE
21
6.
PROTEINANALYTIK
21
6.1
ZWEIDIMENSIONALE
GELELEKTROPHORESE
21
6.2
PROTEINTRANSFER
AUF
GLASFASERMEMBRAN
25
6.3
FARBEMETHODEN
FUER
PROTEINE
26
7.
NMR-SPEKTROSKOPIE
28
7.1
'
H-SPEKTROSKOPIE
28
7
2
,3
C-SPEKTROSKOPIE
28
8.
IN
V/TRO-TEST
ZUM
NACHWEIS
VON
METHYLTRANSFER-REAKTIONEN
29
9.
ANREICHERUNG
DER
O-DEMETHYLASE-AKTIVITAET
32
9.1
GELFILTRATION
32
9.2
ANIONENAUSTAUSCHCHROMATOGRAPHIE
32
ERGEBNISSE
33
1.
UNTERSUCHUNGEN
ZUM
STOFFWECHSEL
UNTERSCHIEDLICHER
C-QUELLEN
IN
SPOROMUSA
OVATA
33
1.1
WACHSTUM
AUF
3,4-DIMETHOXYBENZOAT
33
1.2
SEQUENTIELLE
O-DEMETHYLIERUNG
VON
3,4-DIMETHOXYBENZOAT
34
1.3
ENZYMINDUKTION
BEI
WACHSTUM
AUF
VERSCHIEDENEN
KOHLENSTOFF
UND
ENERGIEQUELLEN
35
1.4
IN
WTRO-UNTERSUCHUNGEN
ZUR
UMSETZUNG
VERSCHIEDENER
METHYLGRUPPEN
ENTHALTENDER
SUBSTRATE
DURCH
ZELLEXTRAKTE
36
1.5
SPEZIFITAET
DER
O-DEMETHYLIERUNGSREAKTIONEN
37
1.6
ANALYSE
LOESLICHER
PROTEINE
DURCH
ZWEIDIMENSIONALE
GELELEKTROPHORESE
40
1.7
WACHSTUM
IN
GEGENWART
AROMATISCHER
VERBINDUNGEN
43
1.8
JODPHENOL
ALS
VORSTUFE
DES
JODPHENOLYL-COBAMID
43
1.9
FETTSAEUREZUSAMMENSETZUNG
VON ZELLEN
46
1.10
WACHSTUM
AUF
METHANOL
48
1.11
MARKIERUNGSMUSTER
IN
ESSIGSAEURE
NACH
WACHSTUM
AUF
,3
C-MTHANOL
49
2.
METHYLTRANSFERASE-TEST
51
2.1
METHYLTRANSFERASE-TEST
51
2.2
ATP-VERBRAUCH
UND
N
S
-METHYLTETRAHYDROFOLATBILDUNG
54
2.3
TETRAHYDROFOLATABHAENGIGKEIT
DES
METHYLTRANSFERASE-TESTES
UND
BILDUNG
VON
N
-[
,4
C-METHY/]-METHYLTETRAHYDROFOLAT
55
2.4
[
,4
C]-METHYL-COB(LLL)ALAMIN-BILDUNG
IM
METHYLTRANSFERASE-TEST
56
3.
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
ENZYMKINETIK
DER
METHYLTRANSFERASEREAKTIONEN
58
3.1
ZEITABHANGIGKEIT,
PROTEINABHANGIGKEIT
UND
PH-ABHAENGIGKEIT
58
3.2
HEMMUNG
DER
METHYLGRUPPENUBERTRAGUNG
DURCH
PROPYLJODID
60
3.3
KYY,-WERTE
BEI
UNTERSCHIEDLICHEN
SUBSTRATEN
61
4.
CHARAKTERISIERUNG
ALKYLIERTER
P-KRESOLYL-COBAMIDE
62
4.1
CHEMISCHE
SYNTHESE
ALKYLIERTER
P-KRESOLYL-COBAMIDE
62
4.2
'
H-NMR-SPEKTROSKOPIE
DER
KOBALTMETHYLISOMERE
VON
P-KRESOLYL-COBAMID
65
5.
NACHWEIS
VON
CORRINOID-HALTIGEN
METHYLTRANSFERASEN
IM
3,4-DI
METHOXYBENZOAT
UND
METHANOLSTOFFWECHSEL
67
5.1
RADIOAKTIVE
MARKIERUNG
CORRINOID-HALTIGER
PROTEINE
67
5
2
ANREICHERUNG
DER
O-DEMETHYLASE
AUS
3,4-DIMETHOXYBENZOAT-ZELLEN
70
6.
REAKTIONSMECHANISMEN
DER
METHYLTRANSFERASEREAKTIONEN
73
6.1
IN
VFTRO-UNTERSUCHUNGEN
ZUR
UMSETZUNG
HDT-MARKIERTER
METHYLDONATOREN
74
DISKUSSION
78
METHYITRANSFERASE-TEST
UND
MODELLVORSTELLUNGEN
NEUARTIGE
METHYLTRANSFERASE-REAKTIONEN
CORRINOIDCOFAKTOREN
78
83
87
ZUSAMMENFASSUNG
89
LITERATURVERZEICHNIS
93 |
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