Membranfusionsprozesse während der Exocytose von eosinophilen Granulocyten:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
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1995
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INHALTSVERZEICHNIS
1. EINFUEHRUNG.
1.1. EXOCYTOSE.
1.2. SEKRETORISCHE GRANULEN.
1.3. CALCIUM UND EXOCYTOTISCHE SIGNALTRANSDUKTION.
1.4. VERSCHIEDENE MEMBRANFUSIONSEREIGNISSE IN EXOCYTIERENDEN ZELLEN
1.5. DER MECHANISMUS DER EXOCYTOTISCHEN MEMBRANFUSION.
1.6. DER EOSINOPHILE GRANULOCYT.
1.7. ZIELSETZUNG.
2
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2
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1
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2
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2
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2.3.
2.4.
2.5.
2
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6
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2.7.
2
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8
.
MATERIAL UND METHODEN.
PRAEPARATION VON EOSINOPHILEN GRANULOCYTEN AUS PFERDEBLUT.
KAPAZITAETSMESSUNGEN MIT DER PATCH-CLAMP- TECHNIK.
2.2.1. HOCHAUFLOESENDE KAPAZITAETSMESSUNGEN MIT DEM LOCK-IN-VER-
STAERKER.
2.2.2. DURCHFUEHRUNG DER PATCH-CLAMP-EXPERIMENTE.
AUSWERTUNG DER LOCK-IN-MESSUNGEN.
2.3.1. QUANTIFIZIERUNG DER MIT DER LOCK-IN-METHODE AUFGEZEICHNETEN
KAPAZITAETSSTUFEN.
2.3.2. BESTIMMUNG DER GESCHWINDIGKEIT DER ERWEITERUNG DER
FUSIONSPORE AUS LOCK-IN-MESSUNGEN.
STATISTISCHE ANALYSE DER VERTEILUNG DER KAPAZITAETSSTUFENGROESSEN.
COMPUTERSIMULATION DES DEGRANULATIONSPROZESSES.
MESSUNG DER STROMTRANSIENTEN DURCH DIE FUSIONSPORE.
AUSWERTUNG DER STROMTRANSIENTEN.
2.7.1. BERECHNUNG DES GRANULENPOTENTIALS UND DER
FUSIONSPORENLEITFAEHIGKEIT AUS DER STROM- UND
KAPAZITAETSMESSUNG.
2.7.2. AUTOMATISIERTE PROZEDUR ZUR MESSUNG VON LEITFAEHIGKEITSNIVEAUS
IN DER PORENERWEITERUNG.
2.7.3. ERMITTLUNG DER GESCHWINDIGKEIT DER PORENERWEITERUNG DURCH
LINEARE ANPASSUNG AN DIE LEITFAEHIGKEITSSPUR.
SIMULATION VON STROMTRANSIENTEN DURCH DIE FUSIONSPORE.
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29
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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2.9. BESTIMMUNG DES PH-WERTS IM INNEREN DER GRANULEN DURCH ANFAERBUNG MIT
QUINACRIN.32
3. ERGEBNISSE. 34
3.1. GTPYS STIMULIERT DIE DEGRANULATION VON PFERDEEOSINOPHILEN.34
3.2. GROESSEN VERTEILUNG DER KAPAZITAETSSTUFEN.35
3.3. DIE GEMESSENEN GRANULENGROESSEN VON PFERDEEOSINOPHILEN SIND
MULTIMODAL VERTEILT.37
3.4. EINFLUSS VON [CA2+1 UND DER GTPYS - KONZENTRATION AUF DEN
ZEITVERLAUF
DER DEGRANULATION VON PFERDEEOSINOPHILEN.41
3.5. DIE INTRAZELLULAERE GTPYS - KONZENTRATION BESTIMMT DIE RATE DER
GRANULEN-GRANULEN-FUSION UNABHAENGIG VON [CA
2+]J.45
3.6. SIMULATION DER EOSINOPHILENDEGRANULATION.47
3.7. NIEDRIGE INTRAZELLULAERE CA
2+ - KONZENTRATION BEGUENSTIGT DIE STIMULIERTE EN-
DOCYTOSE.52
3.8. DIE EXOCYTOSE EINZELNER GRANULEN WIRD VON EINEM MESSBAREN LADUNGS
TRANSPORT DURCH DIE FUSIONSPORE BEGLEITET.54
3.9. DAS TRANSMEMBRANPOTENTIAL UEBER DER GRANULENMEMBRAN IN EOSINOPHILEN
BETRAEGT IM DURCHSCHNITT 0 MV UND WIRD DURCH EINWIRKUNG EINES PROTONO
PHORS ZU POSITIVEN WERTEN VERSCHOBEN.56
3.10. QUINACRIN, EIN FLUORESZENZFARBSTOFF, DER SAURE KOMPARTIMENTE
MARKIERT,
REICHERT SICH REVERSIBEL IN GRANULEN VON EOSINOPHILEN AN.59
3.11. DIE MITTLERE ANFANGSLEITFAEHIGKEIT DER FUSIONSPORE IST UNABHAENGIG
VON DER
INTRAZELLULAEREN CA YY KONZENTRATION UND BETRAEGT ~ 200 PS.62
3.12. DIE ANFANGSGESCHWINDIGKEIT DER FUSIONSPORENERWEITERUNG IST
UNABHAENGIG VON [CA
2+]J, DAGEGEN BESCHLEUNIGT HOHE [CA?+]J DIE
ERWEITERUNG DER SPAETEN PORE. 65
3.13. BEVORZUGTE LEITFAEHIGKEITSNIVEAUS WAEHREND DER
FUSIONSPORENEXPANSION.69
3.14. AUFFINDBARKEIT VON LEITFAEHIGKEITSNIVEAUS IN SIMULIERTEN
FUSIONSPORENEXPANSIONEN.73
4. DISKUSSION_. 78
4.1. ENTSTEHUNG REIFER GRANULEN IN EOSINOPHILEN DURCH INTRAZELLULAERE
GRANULEN-
GRANULEN-FUSION. 78
4.2. DIFFERENTIELLE REGULATION VERSCHIEDENER MEMBRANFUSIONSPROZESSE
WAEHREND DER DEGRANULATION VON PFERDEEOSINOPHILEN DURCH CA UND GTP-
BINDENDE PROTEINE.82
4.3.
MEMBRANPOTENTIAL UND PH-WERT DER EOSINOPHILENGRANULEN.88
4.4. DER EINFLUSS VON [CA
2+]J AUF DIE OEFFNUNG UND ERWEITERUNG DER FUSIONSPORE. 91
4.5. DIE STRUKTUR DER FUSIONSPORE.
93
5. ZUSAMMENFASSUNG.
99
6. LITERATUR.
191
DANKSAGUNG.-.114 |
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