Elektrophysiologische Charakterisierung rekombinierter Glyzinrezeptoren:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
1995
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INHALTSVERZEICHNIS
I
1
EINLEITUNG 1
1.1 SYNAPTISCHE SIGNALTRANSDUKTION 1
1.2 DER GLYZINREZEPTOR 3
1.2.1 ENTDECKUNG UND FUNKTIONELLE EIGENSCHAFTEN DES GLYZINREZEPTORS 3
1.2.2 BIOCHEMIE 5
1.2.3 KLONIERUNG 6
1.2.4 HETEROLOGE EXPRESSION DES GLYZINREZEPTORS 8
1.3 STRUKTUR-FUNKTIONSBEZIEHUNGEN 9
2
AUFGABENSTELLUNG DER ARBEIT 12
3
METHODEN
14
3.1 ZELLKULTUR 14
3.1.1 T RANSFEKTION 14
3.1.2 FAERBUNG DER ZELLEN AUF SS-GALACTOSIDASE 15
3.1.3 V EREINZELUNG TRANSFIZIERTER ZELLEN 16
3.2 MOLEKULARBIOLOGISCHE METHODEN 16
3.2.1 CDNA KONSTRUKTE 16
3.2.2 MUTAGENESE 17
3.3 ELEKTROPHYSIOLOGISCHE METHODEN 17
3.3.1 AUFBAU DER APPARATUR 17
3.3.2 DIE SPANNUNGSKLEMME 18
3.3.3 DAS U-ROHR-APPLIKATIONSSYSTEM 19
3.3.4 DIE GIGAOHM-ABDICHTUNG 21
3.3.5 DIE GANZZELLABLEITUNG 22
3.3.6 WIDERSTANDS-UND KAPAZITAETSKOMPENSATION 22
3.3.7 EINZELKANALABLEITUNG 23
3.3.8 DOSIS-WIRKUNGSKURVEN FUER AGONISTEN 24
3.3.9 DOSIS-WIRKUNGSKURVEN FUER ANTAGONISTEN UND BLOCKER 24
3.3.10 STROM-SPANNUNGSKURVEN (1-U KURVEN) 25
3.3.11 STROMRICHTUNG UND NERNSTGLEICHUNG 26
3.4 THEORETISCHE GRUNDLAGEN DER AUSWERTUNG
26
3 .4.1 DER HILLPLOT 26
3 .4.2 BESTIMMUNG DES PORENDURCHMESSERS 28
3.4.3 FLUESSIGKEITSPOTENTIALE 29
3 .4.4 T-TEST' 29
3.5 EINZELKANAELE 30
3.5.1 BESCHREIBUNG DER EINZELKANAELE 30
3.5.2 PROBLEMATIK DER EINZELKANALAUFZEICHNUNG 31
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
HTTP://D-NB.INFO/946028362
II
INHALTSVERZEICHN IS
3.5.3 AMPLITUDENHISTOGRANUNE 32
3.5.4 KINETISCHE MODELLE 33
3.5.5 HISTOGRAMME DER OFFEN-UND GESCHLOSSENZEITEN 36
4 ERGEBNISSE 39
4.1 VERGLEICH HOMOOLIGOMERER UND HETEROOLIGOMERER GLYZIN
REZEPTOREN 39
4.1.1 AKTIVIERUNGSVERHALTEN 39
4.1.2 CHLORIDSELEKTIVITAET 41
4.1.3 PHARMAKOLOGISCHE EIGENSCHAFTEN DES GLYZINREZEPTORS IN
BACULOVIRUSINFIZIERTEN SF9 ZELLEN 42
4.1.4 BESTIMMUNG DES DURCHMESSERS DER KANALPORE 45
4.1.5 EINZELKANALUNTERSUCHUNGEN 48
4.1.5.1 EINZELKANALLEITFAHIGKEITEN A-HOMOOLIGOMERER GLYZINREZEPTOREN 48
4.1.5.2 EINZELKANALLEITFAEHIGKEITEN A/SS-HETEROOLIGOMERER GLYZINREZEPTOREN
51
4.1.5.3 OEFFNUNGSVERHALTEN VERSCHIEDENER GLYZINREZEPTOR-ISOFORMEN 56
4.2. CHARAKTERISIERUNG DES CYANOTRIPHENYLBORATS (CTB) ALS
CHLORIDKANALBLOCKER 59
4.2.1 BLOCKIERUNG REKOMBINIERTER GLYZINREZEPTORKANAELE DURCH CTB 60
4.2.2 SPANNUNGSABHAENGIGKEIT DER CTB-WIRKUNG 62
4.2.3 WIRKUNG VON CTB AUF ISOFORMEN DES GLYZINREZEPTORS 63
4.2.4 WIRKORT DES CTB IM KANAL DES GLYZINREZEPTORS 64
4.2.5 WIRKUNG VON CTB BEI EMBRYONALEN RUECKENMARKSNEURONEN 67
4.3 GLYZINREZEPTOREN BEI VERERBBARER HYPEREKPLEXIE 68
4.3.1 PHARMAKOLOGISCHE EIGENSCHAFTEN VON GLYZINREZEPTORMUTANTEN,
DIE MIT VERERBBARER HYPEREKPLEXIE ASSOZIIERT SIND 68
4.3.2 ELEMENTARLEITFAHIGKEITERI DER R271 -MUTANTEN 70
5 DISKUSSION
73
5.1 SUBTYPENSPEZIFISCHE EIGENSCHAFTEN REKOMBINIERTER GLYZIN
REZEPTOREN 73
5.1.1 EXPRESSION UND AKTIVIERUNGSVERHALTEN 73
5.1.2 EINZELKANALCHARAKTERISTIKA REKOMBINIERTER GLYZINREZEPTOREN 75
5.1.2.1 BEDEUTUNG DES AMINOSAEURERESTS G254 DER AL-UNTEREINHEIT FUER DIE
EINZELKANALEIGENSCHAFTEN 76
5.1.2.2 AUSWIRKUNGEN DES SS-M2 SEGMENTS AUF DIE EINZELKANALEIGENSCHAFTEN
77
5.1.2.3 KINETISCHE EIGENSCHAFTEN VERSCHIEDENER GLYZINREZEPTOR-ISOFORMEN
80
5.1.3 OFFENKANALBLOCKER ALS SONDE DES GLYZINREZEPTORKANALS 81
5.2 VERGLEICH REKOMBINIERTER UND NATIVER GLYZINREZEPTORKANAELE 87
5.3 MOLEKULARE GRUNDLAGEN VERERBBARER HYPEREKPLEXIE 88
INHALTSVERZEICHN IS
_._ III
6 ZUSAMMENFASSUNG 93
7 LITERATUR 95
8 DANKSAGUNG 109
9 ANHANG
GFA BASIC PROGRAMM ZUR GRAPHISCHEN DARSTELLUNG DER DOSIS-
WIRKUNGSKURVE UND BERECHNUNG DER EC,YY/ICS(, WERTE UND HILL-
KOEFFIZIENTEN 110 |
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