Lipoprotein-induzierte Signaltransduktion in humanen Haut-Fibroblasten:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
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1995
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INHALTSVERZEICHNIS
I
1. EINLEITUNG.
1
1
.
1
.
1
.
1
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1
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1
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1
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2
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1.1.3.
1
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2
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1
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2
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1
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1
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2
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2
.
1.2.3.
1.3.
1.4.
1.5.
1.5.1.
1.5.2.
1.5.2.1
1.5.2.2
1.5.2.3
1.5.2.4
1.5.3.
1.5.3.1
1.5.3.2
LIPID- UND LIPOPROTEIN-STOFFWECHSEL.
STRUKTUR UND KLASSIFIZIERUNG DER LIPOPROTEINE.
STOFFWECHSEL APO B-HALTIGER LIPOPROTEINE.
STOFFWECHSEL DER HDL.
LIPOPROTEIN-REZEPTOREN.
DER LDL-REZEPTOR.
DAS LDL-RECEPTOR RELATED PROTEIN (LRP).
HDL-REZEPTOREN.
DER REVERSE CHOLESTERIN TRANSPORT.
DIE TANGIER KRANKHEIT.
SIGNALUEBERTRAGUNG IN DIE ZELLE.
HETEROTRIMERE GTP-BINDENDE PROTEINE.
VERSTAERKERENZYME DER SIGNALTRANSDUKTION .
DIE ADENYLATZYKLASE.
DIE PHOSPHOLIPASE C.
DAS KALZIUM-SYSTEM.
DIE PHOSPHOLIPASE D.
INTRAZELLULAERE EFFEKTOREN.
DIE CAMP-ABHAENGIGE PROTEIN-KINASE.
DIE PROTEIN-KINASE C.
.1
.1
.3
.5
.7
.7
.8
.9
. 11
. 14
. 15
. 16
. 18
. 18
. 19
.20
. 21
.22
.22
.24
2. PROBLEMSTELLUNG.
.27
3.
3.1.
3.2.
3.2.1.
3.2.2.
3.2.2.1.
3.2.2.2.
3.2.23.
3.22.4.
ERGEBNISSE. 28
DER HDL3-VERMITTE!TE CHOLESTERINEFFLUX . 28
ANALYSE DER LIPOPROTEIN-INDUZIERTEN SIGNALTRANSDUKTION IN
\ *
HUMANEN HAUT-FIBROBLASTEN VON GESUNDEN SPENDERN.29
ANALYSE DER PROTEIN-KINASE C AKTIVIERUNG.29
ANALYSE DER INTRAZELLULAEREN KALZIUMKONZENTRATION .32
BESTIMMUNG DER INTRAZELLULAEREN KALZIUMKONZENTRATION MIT
EINEM FLUORESZENZSPEKTRALPHOTOMETER.33
EINFLUSS VON THAPSIGARGIN AUF DAS LIPOPROTEIN-INDUZIERTE
KALZIUMSIGNAL. 35
EINFLUSS DES EXTRAZELIULAEREN KALZIUMS AUF DAS LIPOPROTEIN
INDUZIERTE KALZIUMSIGNAL.36
RAEUMLICHE UND ZEITLICHE AUFLOESUNG DES CA
2+-SIGNALS MIT
HILFE EINES FLUORESZENZMIKROSKOPES UND EINER CCD-KAMERA 38
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
HTTP://D-NB.INFO/946818576
INHALTSVERZEICHNIS
3.2.25.
3.2.3.
3.2.4.
3.2.5.
3.2.6.
3.3.
3.3.1.
3.3.2.
3.3.3.
3.3.4.
3.3.5.
3.3.6.
4.
4.1.
4.1.
4.2.
4.2.1.
4.2.2.
4.2.3.
4.2.4.
4.2.5.
4.2.6.
4.2.7.
4.2.8.
4.3.
4.3.1.
EINFLUSS VON PERTUSSIS UND CHOLERA TOXIN AUF DAS LIPOPROTEIN-
INDUZIERTE CA2+-SIGNAL.
39
ANALYSE DER LIPOPROTEIN-INDUZIERTEN AKTIVIERUNG EINER
PHOSPHATIDYLINOSIT-SPEZIFISCHEN PHOSPHOLIPASE C.
41
ANALYSE DER AKTIVIERUNG EINER PHOSPHOLIPASE D.
45
EINFLUSS DER LIPOPROTEINE AUF DAS ADENYLATZYKLASE-SYSTEM.46
EINFLUSS DER LIPOPROTEINE AUF DAS GUANYLATZYKLASE-SYSTEM.48
ANALYTIK DER LIPOPROTEIN-INDUZIERTEN SIGNALTRANSDUKTION IN
FIBROBLASTEN VON PATIENTEN MIT MORBUS TANGIER.
49
ANALYSE DER PROTEIN-KINASE C AKTIVIERUNG IN TANGIER
FIBROBLASTEN . 4
G
ANALYSE DER INTRAZELLULAEREN KALZIUMKONZENTRATION IN
TANGIER FIBROBLASTEN.
52
AKTIVIERUNG EINER PIC IN TANGIER FIBROBLASTEN. 60
AKTIVIERUNG EINER PLD IN TANGIER FIBROBLASTEN.65
EINFLUSS DER LIPOPROTEINE AUF DAS ADENYLAT- UND GUANYLAT
ZYKLASE-SYSTEM IN TANGIER FIBROBLASTEN.
.66
ADP-RIBOSYLIERUNG VON G-PROTEINEN. 69
DISKUSSION.
LIPOPROTEIN-INDUZIERTE SIGNALTRANSDUKTION IN HUMANEN
FIBROBLASTEN VON GESUNDEN SPENDERN.
71
HDL
3-VERMITTELTER CHOLESTERINEFFLUX.
72
HDL
3-INDUZIERTE SIGNALTRANSDUKTION AN HUMANEN
FIBROBLASTEN VON GESUNDEN SPENDERN.,.
72
EINFLUSS VON HDL3
AUF DIE MEMBRANGEBUNDENE
PKC-AKTIVITAET.
72
*
SELEKTIVE AKTIVIERUNG EINZELNER PKC-ISOFORMEN
DURCH HDL
3
.
AKTIVIERUNG EINES KALZIUM-SIGNALS DURCH HDL
3
.
BILDUNG VON DIACYL-GLYCERIN NACH STIMULATION MIT HDL
3
.
AKTIVIERUNG EINER PLD DURCH HDL
3
.
AKTIVIERUNG DES ADENYLAT- UND GUANYLATZYKLASE-SYSTEMS
.73
.74
.77
. 78
.79
ZUSAMMENFASSUNG DER HDL
3-VERMITTELTEN
SIGNALTRANSDUKTION IN PROBANDEN-FIBROBLASTEN.80
SPEZIFITAET DER HDL3-INDUZIERTEN SIGNALTRANSDUKTION . 81
HDL3-INDUZIERTE SIGNALTRANSDUKTION IN HUMANEN
FIBROBLASTEN VON PATIENTEN MIT MORBUS TANGIER.83
AKTIVIERUNG EINER PKC DURCH HDL
3
IN TANGIER FIBROBLASTEN . 83
INHALTSVERZEICHNIS III
4.3.2. HDL
RINDUZIERTES KALZIUM-SIGNAL IN TANGIER FIBROBLASTEN .84
4.3.3. BILDUNG VON INOSIT-PHOSPHATEN IN DEN TANGIER FIBROBLASTEN . 84
4.3.4. BILDUNG VON "FRUEHEM" UND "SPAETEM" DIACYL-GLYCERIN IN
TANGIER FIBROBLASTEN.85
4.3.5. AKTIVIERUNG EINER PLD IN TANGIER FIBROBLASTEN.
86
4.3.6. URSACHE FUER DIE GESTOERTE HDL3-INDUZIERTE SIGNALTRANSDUKTION
IN TANGIER FIBROBLASTEN . .87
5. ZUSAMMENFASSUNG. 91
6
. MATERIAL UND METHODEN.93
6.1. MATERIAL-. 93
6.1.1 CHEMIKALIEN.93
6.1.2. NAEHRMEDIEN UND REAGENZIEN FUER DIE ZELLKULTUR.93
6.2. METHODEN. 94
6.2.1. BEREITSTELLUNG UND KULTUR DER HUMANEN HAUT-FIBROBLASTEN
FUER ZELLEXPERIMENTE. 94
6.2.2. PRAEPARATIVE LIPOPROTEINTRENNUNG. 95
6.2.2.1. SEQUENTIELLE ULTRAZENTRIFUGATION. 95
6.2.2 2. DIALYSE DER LIPOPROTEINFRAKTIONEN.95
6.2.3. KAPILLARISOTACHOPHORESE DER VERWANDTEN
LIPOPROTEINFRAKTIONEN. 96
6.2.4. BESTIMMUNG DER LIPIDPEROXYDATION MIT HILFE DER
THIOBARBITURSAEURE. 98
6.2.5. INOSIT-PHOSPHAT-ANALYTIK MIT HILFE DER SEQUENTIELLEN
ANIONENAUSTAUSCH-CHROMATOGRAPHIE. 98
6.2.6. INTRAZELLULAERE DIACYL-GLYCERINBESTIMMUNG MIT HILFE DER
DUENNSCHICHTCHROMATOGRAPHIE.99
6.2.7. BESTIMMUNG DER PHOSPHOLIPASE D AKTIVITAET. 99
6.2.8. DARSTELLUNG DES RADIOAKTIV-MARKIERTEN PHOSPHATIDYL-
BUTANOL STANDARDS. 100
6.2.9. INTRAZELLULAERE KALZIUMBESTIMMUNG. 101
6.2.9.1. INTRAZELLULAERE KALZIUMBESTIMMUNG MIT HILFE EINES
FLUORESZENZSPEKTRALPHOTOMETERS.102
6.2.9 2. INTRAZELLULAERE KALZIUMBESTIMMUNG MIT HILFE DER
FLUORESZENZMIKROSKOPIE. 102
6.2.10. PROTEIN-KINASE C ANALYTIK.104
6.2.10.1. TRENNUNG DER CYTOSOL- UND MEMBRANFRAKTIONEN.104
6.2.10.2. BESTIMMUNG DER PKC-ENZYM-AKTIVITAET.105
INHALTSVERZEICHNIS
6.2.10.3.
6
.
2
.
11
.
6
.
2
.
12
.
6.2.13.
6.2.14.
6.2.14.1.
6.2.14.2.
6.2.15.
7.
SODIUM DODECYLSULFATE-POLYACRYLAMID GEL ELEKTROPHORESE
(SDS-PAGE) ZUR TRENNUNG DER EINZELNEN PKC-ISOFORMEN. 105
BESTIMMUNG VON INTRAZELLULAEREM CAMP UND CGMP 106
BESTIMMUNG DER ADENYLATZYKLASE-AKTIVITAET.IOE
ANALYSE DES HDL
RVERMITTELTEN CHOLESTERINEFFLUXES.107
ANALYTIK DER G-PROTEINE. 108
HERSTELLUNG VON GEEIGNETEN PLASMAMEMBRAN
PRAEPARATIONEN.
ADP-RIBOSYLIERUNG DER PLASMAMEMBRANPRAEPARATIONEN
DIVERSE METHODEN.
LITERATUR.
. 108
. 108
. 109
.
110 |
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