Das System Gerste, Gerstenmehltau: ein biochemischer und immunologischer Ansatz
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
1995
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INHALTSVERZEICHNIS
1.
EINLEITUNG
1
1.1.
DIE
PATHOGENABWEHR
2
1.2
DIE
PATHOGENERKENNUNG
4
1.3.
DAS
PATHOGEN
(ERYSIPHE
GRAMLNIS
F.SP.
HORDEI)
5
1.4.
DER
WIRT
(HORDEUM
VULGARE)
7
1.4.1.
ABWEHRREAKTIONEN
DER
GERSTE
AUF
BEFALL
MIT
MEHLTAU
9
1.5.
PROBLEMSTELLUNG
11
2.
MATERIAL
UND
METHODEN
14
2.1.
ANZUCHT
VON
PFLANZEN
UND
PILZMATERIAL
14
2.1.1.
VERSUCHSPFLANZEN
14
2.1.2.
ANZUCHT
DER
PFLANZEN
14
2.1.3.
ANZUCHT
DES
PILZES
15
2.1.4.
KONIDIENGEWINNUNG
UND
KONIDIENKEIMUNG
15
2.2.
LONG
ASHTON
NAEHRLOESUNG
16
2.3.
QUANTITATIVE
NACHWEISVERFAHREN
17
2.3.1.
PROTEINBESTIMMUNG
17
2.3.2.
NEUTRALZUCKERBESTIMMUNG
18
2.4.
GASCHROMATOGRAPHISCHE
ZUCKERANALYSE
18
2.5.
KONIDIENAUFARBEITUNG
19
2.5.1.
GEWINNUNG
VON
METHANOLISCHEM
EXTRAKT
22
2.6.
GELELEKTROPHORESE
22
2.6.1.
COOMASSIE-FAERBUNG
24
2.6.2.
SILBERFAERBUNG
25
2.6.3.
WESTERN
BLOT
25
2.6.4.
INDIA-INK
FAERBUNG
26
2.6.5.
CON-A
FAERBUNG
27
2.7.
IMMUNOLOGISCHE
NACHWEISMETHODEN
28
2.7.1.
ENZYME
LINKED
IMMUNOSORBENT
ASSAY
(ELISA)
28
2.7.2.
IMMUNOBLOT
31
2.8.
FAST-PROTEIN-LIQUID-CHROMATOGRAPHY
31
2.9.
BIOTESTS
33
2.9.1.
PROBENAPPLIKATION
33
2.9.2.
PHENYLALANIN-AMMONIUM-LYASE
(PAL)-TEST
33
2.9.3.
SS-1,3-GLUCANASE-TEST
35
2.9.4.
CHITINASE-TEST
37
2.10.
PROTEOLYSE
DER
REF
39
2.10.1.
TRYPSINVERDAU
39
2.10.2.
PRONASEVERDAU
3
9
2.10.3.
PERJODATOXIDATION
40
2.11.
TIERISCHE
ZELLKULTUR
41
2.11.1.
ZELLKULTURMEDIEN
41
2.11.2.
MYELOMAZELLEN
44
2.11.3.
8-AZAGUANIN-PASSAGE
45
2.11.4.
GEFRIEREN
UND
AUFTAUEN
VON
ZELLEN
45
2.11.5.
MAKROPHAGEN
46
2.11.5.1.
ISOLIERUNG
VON
MAKROPHAGEN
47
2.11.6.
IMMUNISIERUNG
48
2.11.7.
ISOLATION
DER
B-LYMPHOZYTEN
50
2.11.7.1.
VITALITAETSTEST
51
2.11.8.
FUSION
51
2.11.9.
SELEKTION
DER
HYBRIDOMAKLONE
51
2.11.10.
SCREENING-ANSATZ
52
2.11.11.
KLONIERUNG
DER
HYBRIDOMAZELLEN
53
3.
ERGEBNISSE
54
3.1.
ENTWICKLUNG
DER
BIOASSAYS
54
3.1.1.
3.1.2.
ENZYMINDUKTION
VON
PAL,
SS-1
,
3-GLUCANASEN
UND
CHITI-
NASEN
IN
GERSTE
NACH
INFEKTION
MIT
ERYSIPHE
GRAMINIS
F
.
SP
.
HORDEI
PAL-TEST
57
58
3.1.3.
SS-1
,
3-GLUCANASE-TEST
61
3.1.4.
CHITINASE-TEST
62
3.2.
KEIMUNG
VON
KONIDIEN
63
3.3.
KONIDIENAUFARBEITUNG
ZUR
ANTIGENGEWINNUNG
65
3.4.
APPLIKATION
VON
INDUKTOREN
FUER
ENZYMTESTS
66
3.4.1.
3.4.2.
APPLIKATION
VON
RE-II
DURCH
INFILTRATION
DES
INTER
ZELLULARRAUMS
VON
GERSTENBLAETTERN
FUER
PAL-MESSUNGEN
PRESS-INJURY-VERFAHREN
ZUR
PROBENAPPLIKATION
67
69
3.4.2.1.
INDUKTION
VON
PAL
DURCH
RE-II
71
3.4.2.2.
INDUKTION
VON
SS-1
,
3-GLUCANASEN
DURCH
RE-II
72
3.4.2.3.
INDUKTION
VON
CHITINASEN
DURCH
RE-II
73
3.4.3.
GELELEKTROPHORETISCHE
UNTERSUCHUNGEN
ZU
RE-II
74
3.5.
HERSTELLUNG
MONOKLONALER
ANTIKOERPER
79
3.5.1.
CHEQUERBOARD
ELISA
81
3.5.2.
IMMUNSUPPRESSION
82
3.5.3.
FUSION
UND
REINIGUNG
DER
HYBRIDOMAZELLEN
83
3.6.
3.6.1.
HERSTELLUNG
VERSCHIEDENER
ZELLWANDFRAKTIONEN
GEKEIM
TER
ERYSIPHE
GRAMINIS
KONIDIEN
UNTERSUCHUNG
DER
REF
87
89
3.6.1.1.
INDUKTION
VON
PAL
DURCH
REF
89
3.6.1.2.
INDUKTION
VON
SS-1,3-GLUCANASEN
DURCH
REF
90
3.6.1.3.
INDUKTION
VON
CHITINASEN
DURCH
REF
91
3.6.1.4.
GELELEKTROPHORETISCHE
UNTERSUCHUNGEN
DER
REF
92
3.6.1.5.
UNTERSUCHUNG
DER
KOHLENHYDRATMONOMERE
IN
DER
REF
94
3.6.1.6.
TRYPS
INVERDAU
94
3.6.1.7.
PRONASEVERDAU
96
3.6.1.8.
PERJODATSPALTUNG
97
3.6.1.9.
ANIONENAUSTAUSCHERCHROMATOGRAPHIE
DER
REF
98
3.7.
RESISTENZINDUKTION
100
4.
DISKUSSION
103
4.1.
DAS
SYSTEM
GERSTE/GERSTENMEHLTAU
103
4.1.1.
DIE
PATHOGENENTWICKLUNG
103
4.1.1.1.
KEIMUNG
AUF
NATUERLICHEN
OBERFLAECHEN
104
4.1.1.2.
KEIMUNG
AUF
ARTIFIZIELLEN
OBERFLAECHEN
107
4.1.2.
WIRTSREAKTIONEN
109
4.1.2.1.
DIE
PAPILLENBILDUNG
110
4.1.2.2.
DIE
HS-REAKTION
112
4.1.2.3.
BIOCHEMIE
DER
PATHOGENABWEHR
112
4.1.2.3.1.
DIE
PAL
114
4.1.2.3.2.
CHITINASEN
UND
SS-1
,
3-GLUCANASEN
117
4.1.3.
ELICITOREN
119
4.1.3.1.
ENTWICKLUNG
DER
BIOTESTS
120
4.1.3.2.
ELICITORAKTIVITAET
VON
RE-II
122
4.1.3.3.
ELICITORAKTIVITAET
DER
ROHELICITORFRAKTION
(REF)
123
4.2.
MONOKLONALE
ANTIKOERPER
125
4.2.1.
EINFUEHRUNG
125
4.2.2.
MONOKLONALE
ANTIKOERPER
IN
DER
ERFORSCHUNG
VON
PFLANZEN
UND
IHRER
PATHOGENE
126
4.2.3.
DIE
HERSTELLUNG
MONOKLONALER
ANTIKOERPER
127
4.2.3.1.
IMMUNISIERUNG,
FUSION
UND
AUFREINIGUNG
128
4.3.
INDUZIERTE
RESISTENZ
131
4.4.
ZUSAMMENFASSUNG
UND
AUSBLICK
134
5.
LITERATURVERZEICHNIS
135 |
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