Rasche Isolierung neuer entwicklungsrelevanter Gene der Maus: das Delta-Homologe 1 als Beispiel
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
1995
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| Beschreibung: | Köln, Univ., Diss., 1995 |
| Beschreibung: | 78 S. Ill., graph. Darst. |
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INHALTSVERZEICHNIS
I.
ABKUERZUNGEN
1.
EINLEITUNG
1
1.1
UEBERBLICK
UEBER
DIE
EMBRYONALENTWICKLUNG
DER
MAUS
1
1.2
STRATEGIEN
ZUR
ISOLIERUNG
ENTWICKLUNGSRELEVANTER
GENE
3
1.3
DAS
DELTA-GEN
6
2.
MATERIALIEN
UND
METHODEN
8
2.1
MATERIALIEN
8
2.1.1
CHEMIKALIEN
8
2.1.2
ENZYME
8
2.1.3
KULTURMEDIEN
-
9
2.1.4
RADIOCHEMIKALIEN
9
2.1.5
BLOTMATERIALIEN
9
2.1.6
GELELEKTROPHORESEMATERIALIEN
9
2.1.7
PHOTO-UND
FILMMATERIALIEN
9
2.1.8
BAKTERIENSTAEMME
10
2.1.9
VEKTOREN
UND
NUCLEINSAEUREN
10
2.1.10
VERSUCHSTIERE
10
2.1.11
MOLEKULARBIOLOGISCHE
KITS
10
2.1.12
LOESUNGEN
FUER
GANZKOERPER-IN
SITU-HYBRIDISIERUNGEN
11
2.1.13
SONSTIGE
LOESUNGEN
12
2.2
METHODEN
14
2.2.1
MOLEKULARBIOLOGISCHE
STANDARDMETHODEN
14
2.2.2
PRAEPARATION
VON
MAUSEMBRYONEN
14
2.2.3
RNA-ISOLIERUNG
14
2.2.4
HERSTELLUNG
EINER
CDNA-BANK
14
2.2.5
AUSPLATTIEREN
DER
CDNA-BANK
UND
DIFFERENTIELLES
SCREENING
15
2.2.6
SEQUENZIEREN
UND
SEQUENZANALYSE
15
2.2.7
GANZKOERPER-TN
SIRU-HYBRIDISIERUNGEN
15
2.2.7.1
FIXIERUNG
16
2.2.7.2
VORBEHANDLUNG
UND
HYBRIDISIERUNG
16
2.2.7.3
WASCHSCHRITTE
UND
ANTIKOERPERBINDUNG
16
2.2.7.4
FAERBEN
17
2.2.8
KRYOSTATSCHNITTE
17
2.2.9
MARKIERUNG
VON
NUCLEINSAEUREN
17
2.2.10
NORTHERN-UND
SOUTHERN-BLOT-ANALYSEN
18
2.2.11
RT-PCR
18
2.2.12
SCHNELLEAMPLIFIZIERUNGVONCDNA-ENDEN
-
5-RACE
19
2.2.13
SCHNELLE
AMPLIFIZIERUNG
VON
CDNA-ENDEN
-
3-RACE
20
3.
ERGEBNISSE
21
3.1
REIHENUNTERSUCHUNG
ZUR
IDENTIFIZIERUNG
ENTWICKLUNGSRELEVANTER
GENE
21
3.1.1
RNA-ISOLIERUNG
23
3.1.2
HERSTELLUNG
EINER
CDNA-BANK
UND
ISOLIERUNG
VON
CDNA-KLONEN
23
3.1.3
SEQUENZIERUNG
DER
CDNA-KLONE
25
3.1.4
SEQUENZANALYSE
IN
DATENBANKEN
25
3.1.6
GANZKOERPER-IN
SITU-HYBRIDISIERUNGEN
32
3.1.6.1
T
UND
PAX-9
ALS
KONTROLLEN
32
3.1.6.2
UBIQUITAERE
UND
NICHT
ERKENNBARE
EXPRESSION
34
3.1.6.3
KLONE
MIT
RAEUMLICH
DIFFERENZIERTER
EXPRESSION
35
3.2
DETAILLIERTE
UNTERSUCHUNG
DES
DE/ZN-HOMOLOGEN
1
39
3.2.1
ISOLIERUNG
TRANSKRIBIERTER
DZZI-I-SEQUENZEN
39
3.2.1.1
ISOLIERUNG
DER
TRANSKRIBIERTEN
DZH-Z-SEQUENZ
AUS
CDNA-BANKEN
39
3.2.1.2
5'-RACE-PCR
42
3.2.1.3
3-RACE-PCR
42
3.2.1.4
SEQUENZIERUNG
DER
DZZI-Z-CDNA-KLONE
43
3.2.2
NUCLEIN
UND
AMINOSAEURESEQUENZ
VON
DLH
1
43
3.2.4
ZU
DLH
1
HOMOLOGE
GENE
IN
ANDEREN
SPEZIES
49
3.2.6
EXPRESSION
VON
DLH
1
IN
EMBRYONALSTADIEN
UND
ADULTEN
GEWEBEN
51
3.2.7
EXPRESSION
VON
DLH
1
WAEHREND
DER
EMBRYONALENTWICKLUNG
51
3.2.7.1
EXPRESSION
IN
EMBRYONEN
BIS
TAG
8,5
P.C.
54
3.2.7.2
EXPRESSION
IN
EMBRYONEN
BIS
TAG
9.5
P.C.
57
3.2.7.3
EXPRESSION
IN
EMBRYONEN
BIS
TAG
12,5
P.C.
57
4.
DISKUSSION
60
4.1
DIE
CDNA-BANK
ALS
AUSGANGSMATERIAL
FUER
DIE
REIHENUNTERSUCHUNG
60
4.2
SEQUENZANALYSEN
61
4.3
GANZKOERPER-IN
SITU-HYBRIDISIERUNG
63
4.4
ISOLIERUNG
UND
ANALYSE
DER
CODIERENDEN
SEQUENZ
VON
DLH
1
65
4.5
EXPRESSION
VON
DLH
1
66
4.6
AUSBLICK
68
5.
ZUSAMMENFASSUNG
70
6.
LITERATUR
71 |
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