Chemische Modifikation von Chlorophyll-Vorstufen und deren Verwendung zur Charakterisierung von Enzymen der Chlorophyll-Biosynthese:
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1995
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INHALTSVERZEICHNIS
1.
1
EINLEITUNG
1.1.
DIE
STRUKTURAUFKLAERUNG
DES
CHLOROPHYLLS
1
1.2.
CHLOROPHY
II
PROTEINE
2
1.3.
STEREOSPEZIFITAET
VON
ENZYMEN
DER
CHL-BIOSYNTHESE
4
1.4.
AUFGABENSTELLUNG
6
2.
MATERIAL
UND
METHODEN
7
2.1.
SPEKTROSKOPISCHE
METHODEN
7
2.1.1.
UV/VIS
SPEKTROSKOPIE
7
2.1.2.
IR-SPEKTROSKOPIE
7
2.1.3.
FLUORESZENZ
SPEKTROSKOPIE
7
2.1.4.
CIRCULARDICHROISMUS
7
2.1.5.
MASSENSPEKTROSKOPIE
7
2.1.6.
'H-NMR-SPEKTROSKOPIE
8
2.1.7.
DATENVERARBEITUNG
8
2.2.
CHROMATOGRAPHISCHE
METHODEN
8
2.2.1.
DUENNSCHICHTCHROMATOGRAPHIE
(DC)
8
2.2.2.
ANALYTISCHE
HPLC
9
2.2.3.
PRAEPARATIVE
SAEULENCHROMATOGRAPHIE
10
2.3.
DARSTELLUNG
DER
PIGMENTE
11
2.3.1.
STANDARDMETHODEN
11
2.3.1.1.
GENERELLE
ARBEITSBEDINGUNGEN
11
2.3.1.2.
STANDARDAUFARBEITUNG
VON
PIGMENTEN
11
2.3.1.3.
GEWINNUNG
DER
NATUERLICHEN
PIGMENTE
UND
EINIGER
DIREKTER
FOLGEPRODUKTE
12
2.3.1.4.
METALLINSERTION
IN
FREIE
BASEN
12
2.3.1.5.
SAURE
HYDROLYSE
VON
PHYTYL
UND
METHYLESTEM
13
2.3.2.
PHEOPHORBID
DERIVATE
14
2.3.3.
ZN-PROTOPHEOPHORBID
A-DERIVATE
28
2.3.4.
PHEOPHYTIN-DERIVATE
31
2.4.
DARSTELLUNG
VON
VERBINDUNGEN
OHNE
TETRAPYRROLSTRUKTUR
37
2.5.
BIOCHEMISCHE
METHODEN
39
2.5.1.
CHL-SYNTHASE-AKTIVITAETSTEST
39
2.5.2.
POR-AKTIVITAETSTEST
40
2.5.3.
EXTRAKTION
VON
PIGMENTEN
FUER
DIE
HPLC-ANALYSE
41
U
_
INHALTSVERZEICHNIS
2.5.4.
VERSUCHE
ZUR
PHOTOAFFINITAETSMARKIERUNG
41
3.
SUBSTRATSPEZIFITAET
DER
CHLOROPHYLL-SYNTHASE
43
3.1.
DARSTELLUNG
UND
SPEKTROSKOPISCHE
DATEN
DER
TESTSUBSTRATE
43
3.1.1.
ZENTRALATOM-DERIVATE
44
3.1.2.
MODIFIKATIONEN
AM
ISOCYCLISCHEN
RING
49
3.1.2.1.
C-13
2
-DERIVATE
49
3.1.2.2.
CHLORIN
E
6
-DERIVATE
61
3.1.2.3.
13
'
-DESOXO-DERIVATE
66
3.1.3.
MODIFIKATIONEN
AM
RING
B
71
3.1.4.
MODIFIKATIONEN
AM
C-20
73
3.2.
ENZYMATISCHER
TEIL
76
3.2.1.
ZENTRALATOM-DERIVATE
76
3.2.2.
RING
B-DERIVATE
78
3.2.3.
C-20-DERIVATE
81
3.2.4.
DERIVATE
DES
ISOCYCLISCHEN
RINGS
82
3.2.5.
POTENTIELLE
KOMPETITIVE
HEMMSTOFFE
DER
CHL-SYNTHASE
95
4.
STEREOSPEZIFITAET
DER
PROTOCHLOROPHYLLID-REDUKTASE
BEZUEGLICH
DER
KONFORMATION
AM
C-13
2
DES
PORPHYRINS
97
4.1.
DARSTELLUNG
DER
SUBSTRATE
98
4.1.1.
DUENNSCHICHTCHROMATOGRAPHIE
100
4.1.2.
UV/VIS-SPEKTREN
100
4.1.3.
CD-SPEKTREN
102
4.1.4.
MASSENSPEKTREN
106
4.1.5.
'
H-NMR-SPEKTREN
110
4.2.
ENZYMATISCHER
TE8
113
5.
CHLOROPHYLLDERIVAETE
MIT
AZIDOGRUPPEN
FUER
DIE
PHOTOAFFINITAETSMARKIERUNG
123
5.1.
SYNTHESE
123
5.1.1.
UEBERLEGUNGEN
ZUR
SYNTHESESTRATEGIE
123
5.1.2.
7
'
-HYDROXY-PHE
A
(30)
UND
DERIVATE
127
5.1.3.
ZN-7-(P-AZIDOPHENYL)AMINO-PHEID
A
(22)
UND
DERIVATE
134
5.1.4.
REDUKTION
VON
ZN-PHEID
B
(3)
ZU
ZN-PHEID
A
(2)
142
HI
INHALTSVERZEICHNIS
5.2.
VORVERSUCHE
ZUR
PHOTOAFFINITAETSMARKIERUNG
CHLID
UND
CHI
-
BINDENDER
PROTEINE
143
5.2.1.
NACHWEIS
DER
PHOTOLYSIERBARKEIT
143
5.2.2.
NACHWEIS
DER
DETEKTIONSGRENZE
DER
MARKIERUNGSREAGENZIEN
145
5.2.3.
MARKIERUNGSVERSUCHE
DER
CHL-SYNTHASE
145
6.
ZUSAMMENFASSENDE
DISKUSSION
150
6.1.
DIE
BEDEUTUNG
DES
ZENTRALATOMS
IN
PORPHYRINEN
150
6.2.
DIE
BEDEUTUNG
DES
ISOCYCLISCHEN
RINGS
UND
DER
KONFORMATION
AM
C-13
2
150
7.
ZUSAMMENFASSUNG
153
8.
LITERATURVERZEICHNIS
155 |
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