Palmitoylierung viraler Membranproteine: Untersuchung der strukturellen Voraussetzungen für die kovalente Bindung von Fettsäuren
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
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1994
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3.2.3.2.
SEITE
EINFUEHRUNG IN DIE THEMATIK 6
PARAMYXOVIREN UND IHRE VERMEHRUNG 6
HYDROPHOBE PROTEINMODIFIKATIONEN 11
KOVALENTE MODIFIKATIONEN MIT GLYKOLIPIDEN 11
MYRISTOYLIERUNG 13
PALMITOYLIERUNG 13
PROBLEMSTELLUNG 17
MATERIAL UND METHODEN 18
MATERIAL 18
CHEMIKALIENNACHWEIS 18
LOESUNGEN FUER DIE IMMUNFALLUNG UND PROTEINGELELEKTROPHORESE 19
VIREN UND ZELLEN 19
ANTIKOERPER 20
METHODEN 20
ZELLKULTUR 20
BESTIMMUNG DER F-GEN-SEQUENZ DES SENDAI VIRUS.
ORTSPEZIFISCHE MUTAGENESE 20
M13 -PHAGEN ALS V EKTOREN 21
PRAEPARATION VIRALER (F-GEN) CDNS AUS DEM PGEM-
VEKTOR DURCH RESTRIKTIONSENZYMVERDAU UND
AGAROSEGELREINIGUNG
REINIGUNG DER DNS AUS DEM AGAROSEGEL 22
LIGATION VON DNS-FRAGMENTEN 22
TRANSFORMATION VON BAKTERIENZELLEN 23
PRAEPARATION VON PLASMID- BZW. M13 -DSDNS 23
SELEKTION KORREKT LIGIERTER M13/F (BZW. PLASMIDE/F) DURCH
ANALYTISCHEN RESTRIKTIONSVERDAU 24
PRAEPARATION DER M13-ESDNS. PHAGENSTOCK 24
DNS-OLIGONUKLEOTIDE 24
DNS-SEQUENZIERUNG 24
ORTSSPEZIFISCHE MUTAGENESE 25
EXPRESSION VIRALER CDNS MIT EINEM BACULO- UND
VACCINIAVIRUS EXPRESSIONSSYSTEM 27
ADDITION EINER NEUEN RESTRIKTIONSENZYM-SCHNITTSTELLE 30
T RANSFEKTION VON SF.21 -INSEKTENZELLEN 31
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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3
3.2.3.3. HERSTELLUNG EINES REKOMBINANTEN ACNPV/F VIRUS-STOCK
(PLAQUE-TEST) 31
3.2.4. BIOCHEMISCHE CHARAKTERISIERUNG DES SENDAI F-PROTEINS 31
3.2.4.1. BACULOVIRUSINFEKTION UND RADIOAKTIVE MARKIERUNG 31
3.2.4.2. PROTEINEXPESSION MIT DEM VACCINIAVIRUS-SYSTEM 32
3.2.4.3. IMMUNFALLUNG DER UNTERSUCHTEN PROTEINE 32
3.2.4.4. SDS-GELELEKTROPHORESE UND FLUOROGRAPHIE 32
3.2.4.5. INDIREKTE IMMUNFLUORESZENZ 33
3.2.4.6. PULSE-CHASE EXPERIMENTE, ENDOGLYKOSIDASE H UND
PNGASE F VERDAU 33
3.2.4.7. QUERVEMETZUNG MIT DITHIO-/S-
(SUCCINOMYDYLPROPIONAT) 34
4. ERGEBNISSE 35
4.1. SEQUENZANALYSE DES SENDAI VIRUS F-GENS 35
4.2. F-PROTEIN-EXPRESSION IN INSEKTENZELLEN 37
4.2.1. PROTEOLYTISCHE SPALTUNG UND ELEKTROPHORETISCHE MOBILITAET
DES F-PROTEIN 39
4.2.2. GLYKOSYLIERUNG DES F-PROTEINS 39
4.2.3. INTRAZELLULAERER TRANSPORT DES F-PROTEINS 41
4.2.4. IMMUNOLOGISCHE LOKALISIERUNG DES F-PROTEIN 43
4.2.5. OLIGOMERISIERUNG DES F-PROTEINS 46
4.3. UNTERSUCHUNGEN ZUR CHARAKTERISIERUNG VON
PALMITOYLIERUNGSSTELLE 49
4.3.1. UNTERSUCHUNG CYSTEINHALTIGEN F-PROTEIN-MUTANTEN AUF
ACYLIERUNG 49
4.3.1.1. RALMITOYLIERUNG IN SAEUGERZELLEN 49
4.3.1.2. PALMITOYLIERUNG IN INSEKTENZELLEN 53
4.3.2. PALMITOYLIERUNG DER F/HA-PROTEIN-CHIMAEREN 57
5. DISKUSSION 67
6. ZUSAMMENFASSUNG 76
7. LITERATURVERZEICHNIS 78
APPENDIX 1 92 |
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| spelling | Ponimaskin, Evgeni Verfasser aut Palmitoylierung viraler Membranproteine Untersuchung der strukturellen Voraussetzungen für die kovalente Bindung von Fettsäuren vorgelegt von Evgeni Ponimaskin 1994 93 Bl. Ill., graph. Darst. txt rdacontent n rdamedia nc rdacarrier Berlin, Freie Univ., Diss., 1994 Fettsäuren (DE-588)4154233-2 gnd rswk-swf Proteine (DE-588)4076388-2 gnd rswk-swf Paramyxoviren (DE-588)4136221-4 gnd rswk-swf Influenzaviren (DE-588)4254831-7 gnd rswk-swf Sendaivirus (DE-588)4136611-6 gnd rswk-swf Palmitoylierung (DE-588)4402134-3 gnd rswk-swf Glykoproteine (DE-588)4071905-4 gnd rswk-swf Rekombinantes Protein (DE-588)4277353-2 gnd rswk-swf Adhäsine (DE-588)4233588-7 gnd rswk-swf Erkennungssequenz (DE-588)4297526-8 gnd rswk-swf Membran (DE-588)4038571-1 gnd rswk-swf Acylierung (DE-588)4141353-2 gnd rswk-swf (DE-588)4113937-9 Hochschulschrift gnd-content Sendaivirus (DE-588)4136611-6 s Glykoproteine (DE-588)4071905-4 s Rekombinantes Protein (DE-588)4277353-2 s Palmitoylierung (DE-588)4402134-3 s Erkennungssequenz (DE-588)4297526-8 s DE-604 Influenzaviren (DE-588)4254831-7 s Adhäsine (DE-588)4233588-7 s Paramyxoviren (DE-588)4136221-4 s Membran (DE-588)4038571-1 s Proteine (DE-588)4076388-2 s Fettsäuren (DE-588)4154233-2 s Acylierung (DE-588)4141353-2 s DNB Datenaustausch application/pdf http://bvbr.bib-bvb.de:8991/F?func=service&doc_library=BVB01&local_base=BVB01&doc_number=006946492&sequence=000001&line_number=0001&func_code=DB_RECORDS&service_type=MEDIA Inhaltsverzeichnis |
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