Aktivierung normaler und maligner B-Lymphozyten durch Interleukin 4 und Immunglobulinrezeptor-vermittelte Signale:
Gespeichert in:
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
1994
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| Beschreibung: | Würzburg, Univ., Diss., 1995 |
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INHALTSVERZEICHNIS
1.
EINLEITUNG
.
1
2.
MATERIAL
.
4
2.1.
ZELLEN
.
4
2.2.
STIMULANTIEN
.
4
2.3.
FLUORESZIERENDE
ANTIKOERPER
.
5
2.4.
LOESUNGEN
UND
NAEHRMEDIEN
.
5
2.5.
GERAETE
.
7
2.6.
SONSTIGES
.
8
3.
METHODEN
.
9
3.1.
ALLGEMEINE
VORSCHRIFTEN
.
9
3.1.1.
BLUTENTNAHME
.
9
3.1.2.
ABTRENNUNG
DER
PBL
AUS
DEM
HEPARINBLUT
.
9
3.1.3.
EINFRIEREN
DER
ZELLEN
.
9
3.1.4.
AUFTAUEN
DER
ZELLEN
.
10
3.1.5.
WASCHENDER
ZELLEN
.
10
3.1.6.
ZAEHLENDER
ZELLEN
.
10
3.1.7.
POOLEN
.
10
3.1.8.
INKUBATION
.
10
3.1.9.
ARBEITSBEDINGUNGEN
.
11
3.2.
ISOLIERUNG
VON
B-LYMPHOZYTEN
.
11
3.2.1.
HERSTELLUNG
VON
AET-SCHAFERYTHROZYTEN
.
11
3.2.2.
HERSTELLUNG
VON
ANTI-CD
4/ANTI-CD
8-GEKOPPELTEN
OCHSENERYTHROZYTEN
.
11
3.2.3
ROSETTIERUNG
DER
T-LYMPHOZYTEN
MIT
AET
SCHAFERYTHROZYTEN
.
11
3.2.4.
MITOMYCIN-BEHANDLUNG
DER
PBL
.
12
3.3.
VERSUCHE
ZUR
STIMULATION
VON
B-LYMPHOZYTEN
.
12
3.3.1.
INDUKTION
VON
CD
23/HLA-DR
AUF
DER
B-ZELL
OBER
FLAECHE
.
12
3.3.2.
IMMUNFLUORESZENZMARKIERUNG
VON
OBERFLAECHENANTIGENEN
UND
BESTIMMUNG
IM
DURCHFLUSSZYTOMETER
.
13
3.3.3.
INDUKTION
DER
B-ZELLPROLIFERATION
.
14
3.3.4.
BESTIMMUNG
DES
3H-THYMIDINEINBAUS
.
14
3.4.
VERSUCHE
ZUR
ANREICHERUNG
UND
KLONIERUNG
ANTIGENSPEZIFISCHER
(TT-SPEZIFISCHER)
T-LYMPHOZYTEN
.
15
3.4.1.
SELEKTIVE
STIMULATION
TT-SPEZIFISCHER
T-LYMPHOZYTEN
.
15
3.4.2.
PROLIFERATIONSTEST
AUF
SPEZIFITAET
DER
GEWACHSENEN
ZELLEN
.
16
3.4.3.
KLONIERUNG
DER
GEWACHSENEN
ZELLEN
.
17
3.5.
VERSUCHE
MIT
DEN
SUBKLONIERTEN
TT-SPEZIFISEHEN
T
LYMPHOZYTEN
.
18
3.5.1.
KOINKUBATION
VON
TT-SPEZIFISCHEN
T-LYMPHOZYTEN,
AUTOLOGEN
B-LYMPHOZYTEN
UND
TETANUSTOXOID
.
18
3.5.2.
BESTIMMUNG
DER
CD
23-EXPRESSION
AUF
DEN
B-LYMPHOZYTEN
.
18
3.5.3.
BESTIMMUNG
VON
GAMMA-INTERFERON
UND
IL-4
IN
DEN
KULTURUEBERSTAENDEN
.
19
3.5.3.1.
PRINZIP
.
19
3.5.3.2.
BESTIMMUNG
VON
IL-4
.
21
3.5.3.3.
BESTIMMUNG
VON
GAMMA-INTERFERON
.
21
4.
ERGEBNISSE
BISHERIGER
FORSCHUNG
.
23
4.1.
STIMULATION
VON
B-LYMPHOZYTEN
DURCH
VERNETZUNG
IHRER
MEMBRANSTAENDIGEN
IMMUNGLOBULINREZEPTOREN
.
23
4.1.1.
SIGNALUEBERTRAGUNGSMECHANISMUS
.
23
4.1.2.
EINFLUSS
AUF
DIE
EXPRESSION
VON
HLA-KLASSE
II
MOLEKUELEN
.
24
4.1.3.
PROLIFERATION
VON
B-ZELLEN
NACH
ANTI-IG-STIMULATION
.
25
4.1.4.
VERSTAERKTE
EXPRESSION
VON
IL-4-REZEPTOREN
.
25
4.1.5.
KOSTIMULATION
VON
B-ZELLEN
MIT
ANTI-IG
UND
IL-4
.
25
4.2.
STIMULATION
VON
B-LYMPHOZYTEN
DURCH
IL-4
.
26
4.2.1.
SIGNALUEBERTRAGUNGSMECHANISMUS
.
26
4.2.2.
INDUKTION
VERSTAERKTER
CD
23-INDUKTION
AUF
B
LYMPHOZYTEN
DURCH
IL-4
.
27
4.2.3.
INDUKTION
VERSTAERKTER
MHC-KLASSE
II-EXPRESSION
AUF
B-LYMPHOZYTEN
DURCH
IL-4
.
28
4.2.4.
WIRKUNG
VON
IL-4
AUF
DIE
PROLIFERATION
VON
B-ZELLEN
.
28
4.2.5.
SONSTIGE
DURCH
IL-4
BEWIRKTE
VERAENDERUNGEN
.
28
4.3.
DAS
ZUSAMMENWIRKEN
VON
B
UND
T-LYMPHOZYTEN
.
29
5.
ERGEBNISSE
EIGENER
UNTERSUCHUNGEN
.
32
5.1.
AKTIVIERUNG
VON
NORMALEN
B-LYMPHOZYTEN
MIT
VERSCHIEDENEN
STIMULANTIEN
.
32
5.1.1.
INDUKTION
DER
PROLIFERATION
VON
B-LYMPHOZYTEN
.
32
5.1.1.1.
PROLIFERATIONSINDUKTION
DURCH
SAC
.
32
5.1.1.2.
PROLIFERATIONSINDUKTION
DURCH
ANTI-IGM
ANTIKOERPER
.
33
5.1.2.
REGULATION
VON
CD
23
UND
HLA-MOLEKUELEN
.
33
5.1.2.1.
INDUKTION
VON
CD
23
DURCH
IL-4
UND
ANTI-IGM
BZW.
PMA
.
34
5.1.2.2.
DOSISABHAENGIGKEIT
DER
IL-4-INDUZIERBAREN
CD
23-EXPRESSION
AUF
NORMALEN
B-ZELLEN
.
36
5.1.2.3.
INDUKTION
DER
HLA-DR-EXPRESSION
AUF
NORMALEN
B-ZELLEN
.
39
5.2.
AKTIVIERUNG
VON
B-LYMPHOMZELLEN
MIT
VERSCHIEDENEN
STIMULANTIEN
.
40
5.2.1.
INDUKTION
DER
PROLIFERATION
VON
B-LYMPHOMZELLEN
.
41
5.2.2.
INDUKTION
VON
CD
23
AUF
B-LYMPHOMZELLEN
DURCH
IL-4,
F(AB')2P
UND
PMA
.
42
5.2.3.
INDUKTION
DER
VERSTAERKTEN
HLA-DR-EXPRESSION
.
47
5.3.
UNTERSUCHUNG
ZUR
INDUKTION
VON
CD
23
AUF
B-ZELLEN
DURCH
ANTIGENSPEZIFISCHE
MHC-RESTRINGIERTE
INTERAKTION
MIT
HELFER
T-LYMPHOZYTEN
.
48
5.3.1.
VERSUCHE
AUS
DEM
BLUT
EINES
GESUNDEN
PROBANDEN
.
49
5.3.1.1.
SELEKTIVE
STIMULATION
TT-SPEZIFISCHER
T
LYMPHOZYTEN
.
49
5.3.1.2.
KLONIERUNG
UND
SUBKLONIERUNG
DER
TT
SPEZIFISCHEN
T-LYMPHOZYTEN
.
50
5.3.1.3.
PROLIFERATIONSTEST
AUF
TT-SPEZIFITAET
DER
SUBKLONE
.
51
5.3.1.4.
TYPISIERUNG
DER
DREI
AUSGEWAEHLTEN
T-ZELL
LINIEN
ANHAND
IHRER
OBERFLAECHENANTIGENE
.
53
5.3.1.5.
ABHAENGIGKEIT
DER
PROLIFERATION
DER
TT
SPEZIFISCHEN
T-ZELLKLONE
VON
DER
ANZAHL
DER
ANTIGENPRAESENTIERENDEN
ZELLEN
.
54
5.3.1.6.
INDUKTION
VON
CD
23-EXPRESSION
AUF
B-ZELLEN
DURCH
ANTIGENSPEZIFISCHE
INTERAKTION
MIT
T
HELFERZELLKLONEN
.
56
5.3.1.6.1.
BESTIMMUNG
DER
CD
23-EXPRESSION
AUF
DEN
B-LYMPHOZYTEN
.
56
5.3.1.6.2.
BESTIMMUNG
VON
IL-4
UND
GAMMA-INTERFERON
IN
DEN
ZELLKULTURUEBERSTAENDEN
.
58
5.3.1.6.3.
EFFEKT
DER
T-B-INTERAKTION
AUF
DIE
IL-4
REAKTIVITAET
DER
B-ZELLE
.
58
6.
DISKUSSION
.
61
7.
ZUSAMMENFASSUNG
.
70
8.
LITERATURVERZEICHNIS
.
72 |
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