Metabolisierung von Estern aus kosmetischen und dermatologischen Präparaten durch die Carboxylesterasen der Haut und der Subcutis des Menschen:
Gespeichert in:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
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| Veröffentlicht: |
1994
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INHALTSVERZEICHNIS
1.
ABKUERZUNGS
UND
SYMBOLVERZEICHNIS
.
1
2.
EINLEITUNG
.
2
3.
MATERIAL
.
7
3
1
CHEMIKALIEN
.
7
3.2
UNTERSUCHUNGSMATERIAL
.
8
4.
METHODEN
.
.
9
4.1
PRAEPARATIVE
ANREICHERUNGSVERFAHREN
.
9
4.1.1
HERSTELLUNG
DER
EXTRAKTE
AUS
ZELLKULTUREN
UND
.
VERSCHIEDENEN
KOMPARTIMENTEN
DER
HAUT
.
9
4.1.1.1
EXTRAKTE
AUS
EPIDERMIS
UND
DENNIS
.
9
4
1
1.1.1
EPIDERMIS-DERMIS-EXTRAKT
(EDE)
.
9
4.1
1.1.2
KERATINOCYTEN-EXTRAKT
.
,
.
10
4.1
1.1.3
KOMEOCYTEN-EXTRAKT
.
YY;
.
10
4.1.1
14
DERMIS-EXTRAKT
.
10
4.1
1.2
UNTERHAUTFETTGEWEBE-EXTRAKT
(UHFG)
.
.
Y
.
11
4.1.1.3
VOLLBLUT-EXTRAKT
.
11
4.1
1.4
HACAT-EXTRAKT
.
11
4.1.1.5
FIBROBLASTEN-EXTRAKT
.
11
4
1.2
WEITERE
REINIGUNG
DER
ESTERASE
.
YY
.
12
4.1
2.1
PRAEPARATIVE
LONENAUSTAUSCHCHROMATOGRAPHIE
VON
EPIDERMIS
DERMIS-EXTRAKT
UND
UNTERHAUTFETTGEWEBE-EXTRAKT
.
12
4.1
2
2
DIALYSE
.
12
4.1.2.3
ULTRAFILTRATION
.
13
4.1.2.4
GELFILTRATIONSCHROMATOGRAPHIE
.
13
4.1.2
5
FPLC
(FAST
PROTEIN
LIQUID
CHROMATOGRAPHY)
.
14
4.1.2.5
1
PRAPARATIVE
TRENNUNG
DER
ESTERASE-PRAEPARATE
AUS
EPIDERMIS-DERMIS-EXTRAKT
UND
UNTERHAUTFETTGEWEBE
.
14
4.1
2.5.2
VERGLEICHENDE
LONENAUSTAUSCHCHROMATOGRAPHIE
DER
ROHEXTRAKTE
EDE,
UHFG
UND
HACAT-EXTRAKT
AN
DEAE-SEPHACEL.
.
.
.
15
4
1
2.5.3
PRAEPARATIVE
LONENAUSTAUSCHCHROMATOGRAPHIE
VON
HACAT-EXTRAKT
AN
DEAE-SEPHACEL
.
15
4.1
2.6
PRAEPARATIVE
ISOELEKTRISCHE
FOKUSSIERUNG
.
15
4.2
CHARAKTERISIERUNGSVERFAHREN
.
16
4.2.1
MOLEKULARGEWICHTSBESTIMMUNG
.
16
4
2
2
NATRIUMDODECYLSULFAT-DISK-ELEKTROPHORESE
.
17
YY
4
2.3
ANALYTISCHE
ISOELEKTROFOKUSSIERUNG
.
18
4.2.3.1
GELANFARBUNG
MIT
DER
TWEEN
60-METHODE
.
19
4
2.3.2
THIOCHOLIN-METHODE
.
19
4.2
3.3
ESTERASEFARBUNG
DURCH
AZOFARBSTOFFKUPPLUNGSREAKTION
.
20
4
3
HEMMWIRKUNG
VERSCHIEDENER
INHIBITOREN
AUF
DIE
UNSPEZIFISCHEN
CARBOXYLESTERASEN
.
.
20
4.4
SUBZELLULAERE
FRAKTIONIERUNG
KULTIVIERTER
KERATINOCYTEN
(HACAT-ZELLEN)
.
21
4.4.1
BESTIMMUNG
DER
LACTAT-DEHYDROGENASE
ALS
LEITENZYM
DER
LOESLICHEN
FRAKTION
.
21
4.4.2
BESTIMMUNG
LYSOSOMALER
ENZYME
.
22
4.4.2
1
/I-GLUCURONIDASE-AKTIVITAETSTEST
.
22
4.4.2.2
CATHEPSIN
B-AKTIVITAETSTEST
.
22
4.4.3
BESTIMMUNG
DER
PLASMAMEMBRANGEBUNDENEN
ENZYME
.
'
.
22
4.4.3.1
5'-NUCLEOTIDASE-AKTIVITATSTEST
.
22
4.4.3.2
GLUTAMYL-TRANSFERASE
(Y-GT)-AKTIVITATSTEST
.
23
4.5
PROTEINBESTIMMUNG
.
23
4.5.1
UV-ABSORPTIONSMETHODE
BEI
280
NM
.
23
4.5.2
FOLINPHENOLMETHODE
.
23
4
5.3
MIKRO-BIURET-METHODE
.
23
4.6
BESTIMMUNG
DER
CARBOXYLESTERASEAKTIVITAET
.
24
4.6
1
TEST
MIT
1-NAPHTHYLBUTYRAT
.
24
4.6.2
TEST
MIT
1-NAPHTHYLACETAT
.
24
4.6
3
TEST
MIT
4-NITROPHENYLACETAT
.
25
4.7
SPALTUNG
VON
XENOBIOTIKA
DURCH
CARBOXYLESTERASEN
DER
HAUT
.
26
4.7.1
UNTERSUCHUNG
ZUM
METABOLISMUS
VON
PARABENEN
.
26
4.7.2
UNTERSUCHUNG
ZUM
METABOLISMUS
VON
GLUCOCORTICOIDEN
.
26
5.
ERGEBNISSE
.
.
28
5.1
LOKALISIERUNG
DER
CARBOXYLESTERASEN
IN
DER
HUMANHAUT
UND
VORVERSUCHE
ZUR
IHRER
ANREICHERUNG
.
28
5.1.1
NACHWEIS
UNSPEZIFISCHER
CARBOXYLESTERASEN
IN
VERSCHIEDENEN
KOMPARTIMENTEN
DER
HAUT
.
28
5.1.2
HEMMWIRKUNG
VERSCHIEDENER
INHIBITOREN
AUF
DIE
UNSPEZIFISCHEN
CARBOXYLESTERASEN
.
32
5.1
3
VORVERSUCHE
ZUR
ANREICHERUNG
DER
AKTIVSTEN
CARBOXYLESTERASEN
.
38
5.1.3.1
EDE,
UHFG
UND
HACAT
IM
VERGLEICH
.
38
5.1.3.2
VERTEILUNG
DER
ESTERASEAKTIVITAET
IM
HACAT-EXTRAKT
.
40
5.1.3.3
PRAEPARATIVE
ISOELEKTROFOKUSSIERUNG
.
42
5,2
ANREICHERUNG
VON
CARBOXYLESTERASEN
AUS
EDE
.
42
5.2.1
OPTIMIERUNG
DER
HOMOGENISATION
.
42
5.2.2
PRAEPARATIVE
LONENAUSTAUSCHCHROMATOGRAPHIE
AN
DEAE-SEPHACEL
.
44
5.2.3
GELFILTRATIONSCHROMATOGRAPHIE
(EDE)
.
47
5.2.3.1
GELFILTRATIONSCHROMATOGRAPHIE
AN
SEPHACRYL
S-300,
TRENNUNG
VON
EDE-DEAE-ELUAT
II
.
47
5.2.3
2
GELFILTRATIONSCHROMATOGRAPHIE
AN
SEPHACRYL
S-200-HR,
TRENNUNG
VON
EDE-DEAE-ELUAT
I
.
:.
49
5.2
3
3
GELFILTRATIONSCHROMATOGRAPHIE
AN
SEPHACRYL
S-200-HR,
TRENNUNG
VON
EDE-DEAE-ELUAT
III
.
50
5.2.4
FAST
PROTEIN
LIQUID
CHROMATOGRAPHY
(EDE)
.
52
5.2.5
ZUSAMMENFASSENDER
UEBERBLICK
.UEBER
DIE
ERGEBNISSE
DER
ANREICHERUNG
VON
CARBOXYLESTERASEN
AUS
EDE
.
58
5.3
ANREICHERUNG
VON
CARBOXYLESTERASEN
AUS
UHFG
.
60
5
3.1
PRAEPARATIVE
LONENAUSTAUSCHCHROMATOGRAPHIE
AN
DEAE-SEPHACEL
.
60
5.3.2
GELFILTRATIONSCHROMATOGRAPHIE
(UHFG)
.
62
5
3.2.1
GELFILTRATIONSCHROMATOGRAPHIE
AN
SEPHACRYL
S-300,
TRENNUNG
VON
UHFG-DEAE-ELUAT
II
.
62
5.3
2
2
GELFILTRATIONSCHROMATOGRAPHIE
AN
SEPHACRYL
S-200-HR,
TRENNUNG
VON
UHFG-DEAE-ELUAT
I
.
-
.
64
5
3
3
FAST
PROTEIN
LIQUID
CHROMATOGRAPHY
(UHFG)
.
65
5.3
3.1
FPLC
MIT
DER
PRAEPARATIVEN
TRENNSAEULE
EMD-TMAE,
TRENNUNG
VON
UHFG-GELFILTRAT
II
.
65
5.3.3.2
TRENNUNG
VON
UHFG-GELFILTRAT
III
DURCH
FPLC
.
67
5.3.4
ZUSAMMENFASSENDER
UEBERBLICK
UEBER
DIE
ERGEBNISSE
DER
ANREICHERUNG
VON
CARBOXYLESTERASEN
AUS
UHFG
.
75
5.4
WEITERE
CHARAKTERISIERUNG
DER
CARBOXYLESTERASEN
AUS
MENSCHLICHER
HAUT
.
.
.
.
75
5.4
1
MOLEKULARGEWICHTSBESTIMMUNG
.
75
5.4.1.1
MOLEKULARGEWICHTSBESTIMMUNG
DER
NATIVEN
ENZYME
AN
SEPHACRYL
S-300
.
75
5.4.1
2
MOLEKULARGEWICHTSBESTIMMUNG
DER
NATIVEN
ENZYME
AN
SEPHACRYL
S-200-HR
.
76
5.4.1
3
KONTROLLE
DER
REINIGUNGSSCHRITTE
DURCH
NATRIUMDODECYLSULFAT
DISK-ELEKTROPHORESE
UND
ABSCHAETZUNG
DES
UNTEREINHEITEN
MOLEKULARGEWICHTS
.
.
.
78
5.4
2
SUBZELLULARE
VERTEILUNG
DER
ESTERASEN
IN
KULTIVIERTEN
KERATINOCYTEN
(HACAT-ZELLEN)
.
82
5.4
3
EXPERIMENT
MIT
NEURAMINIDASE
.
85
5
5
UNTERSUCHUNGEN
MIT
UNTERSCHIEDLICHEN
XENOBIOTIKA
.
,
.
.85
5
5
1
UNTERSUCHUNGEN
ZUM
METABOLISMUS
VON
PARABENEN
.
85
5
5
11
ENZYMATISCHE
HYDROLYSE
DER
PHB-ESTER,
MESSUNG
DER
AKTIVITAETEN
.
.
86
5
5
12
HEMMUNG
DER
ENZYMAKTIVITAT
DURCH
PARAOXON
.
89
5.5.2
UNTERSUCHUNGEN
ZUM
METABOLISMUS
VON
GLUCOCORTICOIDEN
.
89
5.5.2
1
MESSUNG
DER
ENZYMATISCHEN
HYDROLYSE
.
.
.
90
5
5
2.2
ISOMERISATIONEN
IN
DEN
HYDROLYSEANSATZEN
.
93
5
5
2
3
HEMMWIRKUNG
VON
PARAOXON
AUF
DIE
MIT
STEROIDEN
GETESTETE
ESTERASEAKTIVITAT
.
97
5.5
2
4
MESSUNG
DER
HYDROLYSE
GEGENUEBER
GEREINIGTEN
FRAKTIONEN
DES
EPIDERMIS-DENNIS-EXTRAKTES
UND
DES
UNTERHAUTFETTGEWEBES
.
.
98
6.
DISKUSSION
.
101
7.
ZUSAMMENFASSUNG
.
118
8.
LITERATURVERZEICHNIS
.
120
9.
DANKSAGUNG
.
.132 |
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| spelling | Tschoetschel, Carla Verfasser aut Metabolisierung von Estern aus kosmetischen und dermatologischen Präparaten durch die Carboxylesterasen der Haut und der Subcutis des Menschen vorgelegt von Carla Tschoetschel 1994 132 S. Ill., graph. Darst. txt rdacontent n rdamedia nc rdacarrier Osnabrück, Univ., Diss. Haut (DE-588)4023838-6 gnd rswk-swf Stoffwechsel (DE-588)4057699-1 gnd rswk-swf Carboxylesterase (DE-588)4147328-0 gnd rswk-swf Mensch (DE-588)4038639-9 gnd rswk-swf (DE-588)4113937-9 Hochschulschrift gnd-content Mensch (DE-588)4038639-9 s Haut (DE-588)4023838-6 s Carboxylesterase (DE-588)4147328-0 s Stoffwechsel (DE-588)4057699-1 s DE-604 DNB Datenaustausch application/pdf http://bvbr.bib-bvb.de:8991/F?func=service&doc_library=BVB01&local_base=BVB01&doc_number=006906108&sequence=000001&line_number=0001&func_code=DB_RECORDS&service_type=MEDIA Inhaltsverzeichnis |
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