Biosynthese cyanogener Glukoside: Glukosyltransferasen in Maniok (Manihot esculenta Crantz)
Gespeichert in:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
1995
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| Beschreibung: | 116 S. graph. Darst. |
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INHALTSVERZEICHNIS
1.
EINLEITUNG
1
2.
MATERIAL
UND
METHODEN
6
2.1.
PFLANZENMATERIAL
6
2.1.1.
SAMENMATERIAL
6
2.1.2.
SAEMLINGSANZUCHT
6
2.1.3.
PFLANZENANZUCHT
6
2.1.4.
BLATTMATERIAL
6
2.2.
BESTIMMUNG
DES
HCN-POTENTIALS
7
2.2.1.
EXTRAKTION
DER
CYANOGENEN
GLUKOSIDE
7
2.2.2.
ENZYMATISCHE
SPALTUNG
DER
CYANOGENEN
GLUKOSIDE
7
2.2.3.
CYANIDBESTIMMUNG
8
2.3.
BESTIMMUNG
DER
DISSOZIATION
VON
CYANHYDRINEN
8
2.4.
EXTRAKTION
UND
REINIGUNG
DER
GLUKOSYLTRANSFERASEN
9
2.4.1.
HERSTELLUNG
EINES
ACETONTROCKENPULVERS
9
2.4.2.
HERSTELLUNG
DES
ENZYMEXTRAKTES
9
2.4.3.
FRAKTIONIERTE
AMMONIUMSULFATFAELLUNG
10
2.4.4.
GELFILTRATION
10
2.4.5.
AFFINITAETSCHROMATOGRAPHIE
MIT
REACTIVE
RED-AGAROSE
11
2.4.6.
ANIONENAUSTAUSCHCHROMATOGRAPHIE
MIT
DEAE-SEPHACEL
11
2.4.7.
AFFINITAETSCHROMATOGRAPHIE
MIT
CON-A-AGAROSE
12
2.5.
BESTIMMUNGEN
DER
ENZYMAKTIVITAET
12
2.5.1.
AKTIVITAETSBESTIMMUNGEN
DER
GLUKOSYLTRANSFERASEN
12
2.5.1.1.
CYANHYDRINE
ALS
SUBSTRATE
FUER
DIE
GLUKOSYLTRANSFERASE
12
2.5.1.2.
FLAVONOIDE
ALS
SUBSTRATE
FUER
DIE
GLUKOSYLTRANSFERASE
14
2.5.1.3.
CUMARINE
ALS
SUBSTRATE
FUER
DIE
GLUKOSYLTRANSFERASE
14
2.5.2.
AKTIVITAETSBESTIMMUNG
DER
SS-GLUKOSIDASE
15
2.5.3.
AKTIVITAETSBESTIMMUNG
DER
A-HYDROXYNITRIL-LYASE
15
2.6.
SCINTILLATLONSZAEHLUNG
15
2.7.
ANALYTISCHE
VERFAHREN
16
2.7.1.
TRENNUNG
CYANOGENER
GLUKOSIDE
DURCH
HOCHDRUCK
FLUESSIGKEITSCHROMATOGRAPHIE
(HPLC)
16
2.7.2.
DUENNSCHICHTCHROMATOGRAPHIE
17
2.8.
GELELEKTROPHORESE
17
2.8.1.
DISKONTINUIERLICHE
SDS-POLYACRYLAMID-GELELEKTROPHORESE
17
2.8.2.
FAERBUNG
DER
POLYACRYLAMIDGELE
MIT
COOMASSIE
BRILLIANT
BLUE
18
2.8.3.
SILBERFAERBUNG
DER
POLYACRYLAMIDGELE
19
2.8.4
TROCKNEN
DER
GELE
19
2.9.
PROTEINBESTIMMUNG
19
3.
ERGEBNISSE
21
3.1.
OPTIMIERUNG
DER
MESSBEDINGUNGEN
21
3.1.1.
PFLANZENMATERIAL
21
3.1.2.
AKTIVITAETSBESTIMMUNG
DER
CYANO-GLUKOSYLTRANSFERASE
24
3.1.3.
BESONDERE
FAKTOREN
BEI
DER
IN
VITRO
AKTIVITAETSBESTIMMUNG
DER
CYANO-GLUKOSYLTRANSFERASE
AUS
MANIOK
29
3.1.3.1.
EINFLUSS
DER
SS-GLUKOSIDASE
29
3.1.3.2.
EINFLUSS
DER
A-HYDROXYNITRIL-LYASE
30
3.1.3.3.
DISSOZIATION
DER
CYANHYDRINE
31
3.1.4.
STABILISIERUNG
DER
AKTIVITAET
DER
GLUKOSYLTRANSFERASE
IN
WAESSRIGEN
MEDIEN
41
3.2.
AUFREINIGUNG
UND
DIFFERENZIERUNG
DER
GLUKOSYLTRANS
FERASEN
AUS
MANIOK
46
3.3.
CHARAKTERISIERUNG
ZWEIER
CYANO-GLUKOSYLTRANSFERASEN
AUS
MANIOK
60
3.3.1.
ABHAENGIGKEIT
DER
AKTIVITAET
DER
GLUKOSYLTRANSFERASEN
VOM
PH-WERT
60
3.3.2.
ABHAENGIGKEIT
DER
AKTIVITAET
DER
GLUKOSYLTRANSFERASEN
VON
DER
SUBSTRATKONZENTRATION
66
3.3.2.1.
KM-WERTE
DER
GLUKOSYLTRANSFERASEN
FUER
UDP-GLUKOSE
66
3.3.2.2.
KM-WERTE
DER
GLUKOSYLTRANSFERASEN
FUER
CYANHYDRINE
69
3.3.3.
SUBSTRATSPEZIFITAET
DER
GLUKOSYLTRANSFERASEN
79
4.
DISKUSSION
84
4.1.
GLUKOSYLTRANSFERASEN
IN
MANIOK
84
4.1.1.
SUBSTRATSPEZIFITAET
84
4.1.2.
KOMPARTIMENTIERUNG
90
4.1
3.
KINETISCHE
EIGENSCHAFTEN
93
4.2.
MOLEKULARBIOLOGISCHE
STRATEGIEN
FUER
EINE
ACYANOGENE
MANIOKVARIETAET
98
4.3.
GLYKOSYLIERUNG
SEKUNDAERER
PFLANZENSTOFFE
100
5.
ZUSAMMENFASSUNG
105
6.
LITERATURVERZEICHNIS
107 |
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