Zur Sauerstoff-abhängigen Umwandlung von Flavinmononucleotid in 5,6-Dimethylbenzimidazol:
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Format: | Buch |
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Veröffentlicht: |
1993
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Beschreibung: | Hohenheim, Univ., Diss., 1993 |
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-I-
INHALTSVERZEICHNIS
INHALTSVERZEICHNIS
ABKUERZUNGEN
VI
1.
EINLEITUNG
1
2.1.2
LOESUNGEN
10
2.
MATERIAL
UND
METHODEN
8
2.1
CHEMIKALIEN
UND
LOESUNGEN
8
2.1.1
CHEMIKALIEN
8
2.2
PHYSIKALISCHE
METHODEN
12
2.2.1
ZENTRIFUGATIONEN
12
2.2.2
DUENNSCHICHT-,
PAPIER
UND
SAEULENCHROMATOGRAPHIE
12
2.2.3
SPEKTRALPHOTOMETRIE
14
2.2.4
HOCHDRUCKFLUESSIGKEITSCHROMATOGRAPHIE
15
2.2.5
MASSENSPEKTROMETRIE
16
2.2.6
KEMRESONANZSPEKTROSKOPIE
17
2.2.7
DREHWERTMESSUNG
19
2.2.8
MESSUNG
DER
RADIOAKTIVITAET 20
2.3
MIKROBIOLOGISCHE
METHODEN
21
2.3.1
ZUECHTUNG
VON
PROPIONIBACTERIUM
SHERMANII
ST.
33
21
2.3.2
KONSERVIERUNG
VON
P.
SHERMANII
23
2.3.2.1
TIEFSTICHKULTUREN
23
2.3.22
DAUERKULTUREN
23
2.3.3
ANZUCHT
VON
EINZELKOLONIEN
VON
PROPIONIBACTERIUM
SHERMANII
24
INHALTSVERZEICHNIS
-II
2.4
CHEMISCHE
SYNTHESEN
24
2.4.1
SYNTHESE
VON
[1'
2
H,]RIBOFLAVIN
24
2.4.1.1
SYNTHESE
VON
(1
'
R)-[1
'
-
2
H
,
JRIBOFLAVIN
24
2.4.1.2
SYNTHESE
VON
(1'S)-[1
'^HJRIBOFLAVIN
26
2.4.2
SYNTHESE
VON
[2'
13
C]RIBOFLAVIN
26
2.4.3
REINIGUNG
DER
RIBOFLAVIN-PRAEPARATE
27
2.5
ENZYMATISCHE
UNTERSUCHUNGEN
29
2.5.1
INKUBATIONSBEDINGUNGEN
29
2.5.1.1
ENZYMATISCHE
UMWANDLUNG
VON
RIBOFLAVIN
BZW.
FMN
IN
5,6-DI
METHYLBENZIMIDAZOL
BEI
PROPIONIBACTERIUM
SHERMANII
29
2.5.1.2
UNTERSUCHUNG,
OB
AN
ENZYM
GEBUNDENES
5,6-DIMETHYLBENZ-
IMIDAZOL
DURCH
EINWIRKUNG
VON
PRONASE
ABGELOEST
WERDEN
KANN
40
2.5.1.3
ENZYMATISCHE
UMWANDLUNG
VON
5,6-DIMETHYLBENZIMIDAZOL
IN
1-A
D-RIBOFURANOSYL-5,6-DIMETHYLBENZIMIDAZOL
MIT
HILFE
DER
TRANS-W
GLYKOSIDASE
AUS
PROPIONIBACTERIUM
SHERMANII
40
2.5.2
HERSTELLUNG
DES
HOMOGENATS
41
2.5.3
ENZYMANREICHERUNG
41
2.5.3.1
TRENNUNG
DES
HOMOGENATS
IN
ROHEXTRAKT
UND
SEDIMENT
41
2.5.3.2
AMMONIUMSULFATFAELLUNG
UND
DIALYSE
42
2.5.3.3
GELFILTRATIONSCHROMATOGRAPHIE
MIT
SEPHADEX
G-1
50
44
2.5.3.4
ANIONENAUSTAUSCH-CHROMATOGRAPHIE
MIT
DEAE-CELLULOSE 44
2.6
BIOCHEMISCHE
METHODEN
47
2.6.1
ISOLIERUNG
VON
5,6-DIMETHYLBENZIMIDAZOL
AUS
HOMOGENAT
NACH
INKUBATION
MIT
[T^HJRIBOFLAVIN
BZW.
RIBOFLAVIN 47
2.6.2
SCHRITTWEISE
ANREICHERUNG
VON
KOHLENHYDRATEN
AUS
DEM
HOMO
GENAT
NACH
INKUBATION
MIT
[2'
13
CJRIBOFLAVIN
48
2.7
ANALYTISCHE
METHODEN
52
2.7.1
BESTIMMUNG
DES
GEHALTS
VON
5,6-DIMETHYLBENZIMIDAZOL
IN
ENZYMHALTIGEN
PROBEN
52
2.7.1.1
GRUNDSAETZLICH
ANGEWANDTES
VERFAHREN
52
-III-
INHALTSVERZEICHNIS
2.7.1.2
ISOTOPENVERDUENNUNGSMETHODE
52
2.7.1.3
INKUBATION
MIT
14
C-MARKIERTEM
SUBSTRAT
53
2.7.1.4
BESTIMMUNG
DES
5,6-DIMETHYLBENZIMIDAZOL-GEHALTS
MIT
HILFE
DER
HOCHDRUCKFLUESSIGKEITSCHROMATOGRAPHIE
54
2.7.2
UNTERSUCHUNG
AUF
KOHLENHYDRATE
MIT
ANILINPHTHALAT-SPRUEHREAGENZ
55
2.7.3
BESTIMMUNG
DES
PROTEINGEHALTS
55
2.7.3.1
BIURET-METHODE
55
2.7.3.2 METHODE
NACH
WARBURG
UND
CHRISTIAN
56
2.7.4
BESTIMMUNG
DES
GEHALTS
VON
1-A-D-RIBOFURANOSYL-5,6-DIMETHYL
BENZIMIDAZOL
IN
ENZYMHALTIGEN
PROBEN
56
3.
ERGEBNISSE
58
3.1
UNTERSUCHUNG
DER
EIGENSCHAFTEN
DES
HOMOGENATS
VON
PROPIONIBACTERIUM
SHERMANII
58
3.1.1
ZIEL
DER
UNTERSUCHUNG
58
3.1.2 INKUBATION
VON
HOMOGENAT
IM
10-ML-MASSSTAB
58
3.1.3
INKUBATIONEN
NACH
TRENNUNG
DES
HOMOGENATS
IN
SEDIMENT
UND
ROHEXTRAKT
59
3.1.4
VERSUCHE
ZUR
ERHOEHUNG
DER
PRODUKTMENGE
59
3.1.4.1
INKUBATION
VON
HOMOGENATEN
AUS
10
TAGE
BZW.
5
MONATE
ALTEN
BAKTERIEN
59
3.1.4.2
INKUBATION
VON
HOMOGENAT
MIT
ERHOEHTER
SUBSTRATZUGABE
60
3.2
UNTERSUCHUNG,
OB
AN
ENZYM
GEBUNDENES
5,6-DIMETHYLBENZ
IMIDAZOL
DURCH
EINWIRKUNG
VON
PRONASE
ABGELOEST
WERDEN
KANN
61
3.3
UNTERSUCHUNG
DER
UMWANDLUNG
VON
[T
'
HJRIBOFLAVIN
(R
BZW.
S-ISOMER)
IM
HOMOGENAT
VON
P.
SHERMANII
62
3.3.1
ZIEL
DER
UNTERSUCHUNG
62
3.3.2
SYNTHESE
VON
[T
2
H,]RIBOFLAVIN
62
INHALTSVERZEICHNIS
-IV
3.3.3
UMWANDLUNG
VON
[L-H^RIBOFLAVIN
IN
5,6-DIMETHYLBENZIMIDAZOL
IM
HOMOGENAT
VON
P.
SHERMANII
81
3.3.4
UMWANDLUNG
VON
UNMARKIERTEM
RIBOFLAVIN
IN
5,6-DIMETHYLBENZ-
IMIDAZOL
IN
MIT
2
H
2
O
HERGESTELLTEM
HOMOGENAT
VON
P.
SHERMANII
83
3.3.5
ERGEBNIS
DER
UNTERSUCHUNG
83
3.4
UNTERSUCHUNG
DER
UMWANDLUNG
VON
[2'
1J
C]RIBOFLAVIN
IM
HOMOGENAT
VON
P.
SHERMANII
84
3.4.1
ZIEL
DER
UNTERSUCHUNG
84
3.4.2
SYNTHESE
UND
NMR-SPEKTROSKOPIE
VON
[2'
13
C]RIBOFLAVIN
84
3.4.3
VERSTOFFWECHSLUNG
VON
[2'
'
3
C]RIBOFLAVIN
IM
HOMOGENAT
VON
P.
SHERMANII
UND
ISOLIERUNG
DER
DABEI
GEBILDETEN
MONOSACCHARIDE
87
3.5
VERSUCHE
ZUR
ANREICHERUNG
DES
5,6-DIMETHYLBENZIMIDAZOL-
SYNTHETISIERENDEN
ENZYMSYSTEMS
AUS
HOMOGENAT
VON
P.
SHERMANII
92
3.5.1
EIGENSCHAFTEN
VERSCHIEDENER
AMMONIUMSULFAT-FRAKTIONEN
92
3.5.2
EIGENSCHAFTEN
PROTEINHALTIGER
FRAKTIONEN
NACH
AUFTRENNUNG
MIT
TELS
SEPHADEX
G-1
50
96
3.5.3
EIGENSCHAFTEN
PROTEINHALTIGER
FRAKTIONEN
NACH
AUFTRENNUNG
AN
DEAE-CELLULOSE
100
3.6
HOMOGENAT
UND
ROHEXTRAKT-VERDUENNUNGSREIHEN
107
3.7
UNTERSUCHUNG
DER
VERSTOFFWECHSLUNG
VON
2-CARBOXY-5,6-DI
METHYLBENZIMIDAZOL
UND
FORMYLMETHYLFLAVIN
IM
HOMOGENAT
VON
P.
SHERMANII
108
4.
DISKUSSION
110
4.1
UMWANDLUNG
VON
[1'
2
HJRIBOFLAVIN
IN
5,6-DIMETHYLBENZ
IMIDAZOL
IM
HOMOGENAT
VON
PROPIONIBACTERIUM
SHERMANII
110
-
V
-
INHALTSVERZEICHNIS
4.2
UMWANDLUNG
VON
[2'
"
C]RIBOFLAVIN
IM
HOMOGENAT
VON
P.
SHERMAN
LI
112
4.3
UNTERSUCHUNGEN
ZU
EIGENSCHAFTEN
UND
ANREICHERUNGS
MOEGLICHKEITEN
DES
5,6-DIMETHYLBENZIMIDAZOL-SYNTHETISIEREN
DEN
ENZYMSYSTEMS
AUS
HOMOGENAT
VON
P.
SHERMANII
114
5.
ZUSAMMENFASSUNG
120
6.
LITERATURVERZEICHNIS
124 |
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spelling | Lingens, Brigitte Verfasser aut Zur Sauerstoff-abhängigen Umwandlung von Flavinmononucleotid in 5,6-Dimethylbenzimidazol vorgelegt von Brigitte Lingens 1993 VI, 137 S. graph. Darst. txt rdacontent n rdamedia nc rdacarrier Hohenheim, Univ., Diss., 1993 Reaktionsmechanismus (DE-588)4177123-0 gnd rswk-swf Propionibacterium freudenreichii (DE-588)4277419-6 gnd rswk-swf Biosynthese (DE-588)4006902-3 gnd rswk-swf Vitamin B12 (DE-588)4140950-4 gnd rswk-swf (DE-588)4113937-9 Hochschulschrift gnd-content Dimethylbenzinidazol gnd rswk-swf Propionibacterium freudenreichii (DE-588)4277419-6 s Vitamin B12 (DE-588)4140950-4 s Biosynthese (DE-588)4006902-3 s Reaktionsmechanismus (DE-588)4177123-0 s DE-604 Dimethylbenzinidazol f DNB Datenaustausch application/pdf http://bvbr.bib-bvb.de:8991/F?func=service&doc_library=BVB01&local_base=BVB01&doc_number=006905515&sequence=000001&line_number=0001&func_code=DB_RECORDS&service_type=MEDIA Inhaltsverzeichnis |
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