Wirkungen des atrialen natriuretischen Peptids auf die Glucagonsekretion isolierter Langerhansscher Inseln der Ratte: Untersuchungen zum Mechanismus
Gespeichert in:
1. Verfasser: | |
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Format: | Buch |
Sprache: | German |
Veröffentlicht: |
1995
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Schlagworte: | |
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Beschreibung: | Münster, Univ., Diss., 1995 |
Beschreibung: | V, 151 S. Ill., graph. Darst. |
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INHALTSVERZEICHNIS
I
INHALTSVERZEICHNIS
1
EINLEITUNG
.
1
1.1
DAS
ATRIALE
NATRIURETISCHE
PEPTID
UND
VERWANDTE
NATRIURETISCHE
PEPTIDE
.
1
1.1.1
VORKOMMEN
UND
STRUKTUR
.
1
1.1.2
BILDUNG
UND
FREISETZUNG
.
3
1.1.3
PHYSIOLOGISCHE
FUNKTIONEN
.
4
12,
REZEPTOREN
DER
NATRIURETISCHEN
PEPTIDE
.
6
1.2.1
DER
GUANYLATCYCLASE-REZEPTOR
.
6
1.2.1.1
MEMBRANSTAENDIGE
GUANYLATCYCLASEN
ALS
REZEPTOREN
FUER
NATRIURETISCHE
PEPTIDE
.
6
1.2.1.2
ANDERE
GUANYLATCYCLASEN
.
8
1.2.1.3
REGULATION
DES
GC-A-REZEPTORS
.
9
1.2.1.4
ANTAGONISTEN
DES
GUANYLATCYCLASE-REZEPTORS
.
11
1.2.1.5
SPEZIFISCHE
SECOND
MESSENGER
DER
NATRIURETISCHEN
PEPTIDE
.
12
1.2.2
DER
CLEARANCE-REZEPTOR
.
13
1.2.2.1
BIOCHEMISCHER
AUFBAU
.
13
1.2.2.2
SPEZIFISCHE
AGONISTEN
.
15
1.2.2.3
VORKOMMEN
.
15
1.2.2.4
FUNKTIONEN
DES
CLEARANCE-REZEPTORS
.
16
1.2.2.5
WEITERE
ABBAUSYSTEME
FUER
NATRIURETISCHE
PEPTIDE
.
19
13
REZEPTORREGULATION
.
20
1.3.1
EINFLUSS
DER
PROTEINKINASE
C
AUF
DIE
AKTIVITAET
DES
GC-REZEPTORS
.
20
1.3.2
EINFLUSS
VON
CGMP
AUF
DEN
CLEARANCE-REZQITOR
.
22
1.3.3
AUFBAU
UND
HEMMSTOFFE
DER
PROTEINKINASE
C
.
22
1.4
GLUCAGONSEKRETION
.
24
1.4.1
GHICAGON
.
24
1.4.2
ANATOMIE
DER
LANGERHANSSCHEN
INSEL
.
24
1.4.3
AN
DER
GLUCAGONSEKRETION
BETEILIGTE
MEDIATOREN
.
25
1.4.4
STIMULATOREN
DER
GLUCAGONSEKRETION
.
26
1.4.5
INHIBITOREN
DER
GLUCAGONSEKRETION
.
27
13
G-PROTEINE
.
29
1.5.1
WIRKUNGSWEISE
.
29
1.5.2
STOFFE
ZUR
UNTERSCHEIDUNG
VON
G-PROTEINEN
.
30
N
INHALTSVERZEICHNIS
1.5.3
G-PROTEIN
GEKOPPELTE
REZEPTOREN
.
31
1.5.4
VORKOMMEN
VON
G-PROTEINEN
AN
INSELN
.
32
1.6
SPANNUNGSABHAENGIGE
CALCIUMKANAELE
.
32
1.6.1
AUFBAU
UND
FUNKTIONEN
.
32
1.6.2
EIGENSCHAFTEN
VON
L
UND
T-TYP-CALCNXMKANAELEN
AN
INSELN
.
34
1.6.3
HEMMSTOFFE
DER
L
UND
T-TYP-CALCIUMKANAELE
.
35
1.7
FRAGESTELLUNG
DER
ARBEIT
.
37
2
MATERIAL
.
38
2.1
VERSUCHSTIERE
.
38
2.2
GERAETE
.
38
2.3
CHEMIKALIEN
.
39
2.4
LOESUNGEN
.
41
2.4.1
KREBS-RINGER-HEPES-PUFFER
(KRH)
.
41
2.4.2
LOESUNGEN
FUER
DEN
GHICAGON-RADIOIMMUNOASSAY
.
42
2.4.3
LOESUNGEN
FUER
DIE
BESTIMMUNG
DER
45
CALCIUM-AUFHAHME
.
42
2.4.4
LOESUNGEN
FUER
DIE
ELEKTROPHORESE
.
42
2.4.4.1
STAMMPUFFER
.
42
2.4.4.2
GELPUFFER
.
43
2.4.4.3
NICHT-REDUZIERENDER
PROBENPUFFER
.
43
2.4.4.4
DTT-LOESUNG
.
43
2.4.4.5
REDUZIERENDER
PROBENPUFFER
.
43
2.4.4.OE
APS-LOESUNG
.
43
2.4.4.7
KAPSENBERGSCHMIERE
.
44
2.4.4.8
KATHODENPUFFER
.
44
2.4.4.9
ANODENPUFFER
.
44
2.4.5
LOESUNGEN
FUER
DAS
BLOTTING
.
44
2.4.5.1
BLOTTINGPUFFER
.
44
2.4.5.2
PB
S-PUFFER
.
45
2.4.5.3
PBST-PUFFER
.
45
2.4.6
STAMMLOESUNGEN
.
45
2.4.6.1
ANP
.
45
2.4.6.2
ANTI-G-PROTEIN-IGG
.
45
2.4.6.3
ANTI-KANINCHEN-IGG,
BIOTIN-SP-KONJUGIERT
.
46
2.4.6.4
ARGININ
.
46
INHALTSVERZEICHNIS
HI
2.4.6.5
8-BR-CGMP
.
46
2.4.6.6
CANF(4-23)
.
46
2.4.6.7
GF-109203X
.
47
2.4.6.8
HS-142-1
.
47
2.4.6.9
LY83583
.
47
2.4.6.10
NICKELCHLORID
.
47
2.4.6.11
NITRENDIPIN
.
47
2.4.6.12
PERTUSSISTOXIN
.
48
2.4.6.13
STREPTAVIDIN-PEROXIDASE
.
48
2.4.6.14
ZAPRINAST
.
48
3
METHODEN
.
49
3.1
ISOLIERUNG
LANGERHANSSCHER
INSELN
AUS
DEM
PANKREAS
DER
RATTE
.
49
3.2
VERSUCHE
ZUR
GLUCAGONSEKRETION
.
50
3.2.1
DURCHFUEHRUNG
DER
VERSUCHE
.
50
3.2.1.1
VORINKUBATION
.
50
3.2.1.2
HAUPTINKUBATIONEN
.
51
33
GLUCAGONBESTINUNUNG
.
53
3.3.1
TESTPRINZIP
.
53
3.3.2
DURCHFUEHRUNG
.
54
3.3.3
AUSWERTUNG
.
54
3.4
MESSUNG
DER
45
CALCIUM-AUFNAHME
.
55
3.4.1
TESTPRINZIP
.
55
3.4.2
DURCHFUEHRUNG
.
55
3.4.3
AUSWERTUNG
.
58
33
VERSUCHE
ZUR
DESENSIBILISIERUNG
.
59
3.5.1
PROBENAUFBEREITUNG
.
59
3.5.2
POLYACRYLAMIDGELELEKTROPHORESE
(PAGE)
.
60
3.5.2.1
GELZUSAMMENSETZUNG
.
60
3.5.2.2
HERSTELLUNG
DES
GELS
.
61
3.5.2.3
DURCHFUEHRUNG
DER
GELELEKTROPHORESE
.
61
3.5.3
BLOTTING
.
62
3.5.3.1
PRINZIP
.
62
3.5.3.2
BLOTMEMBRAN
UND
BLOTTING-APPARATUR
.
63
3.5.3.3
DURCHFUEHRUNG
UND
BEDINGUNGEN
DES
BLOTTINGS
.
64
IV
INHALTSVERZEICHNIS
3.5.4
DETEKTION
DER
PROTEINBANDEN
.
65
3.5.4.1
IMMUNBLOTTING
.
65
3.5.4.2
DURCHFUEHRUNG
.
65
3.5.4.3
DENSITOMETRIE
.
67
3.S.4.4
AUSWERTUNG
.
68
3.6
STATISTIK
.
69
4
ERGEBNISSE
.
70
4.1
ANP-WIRKUNG
AUF
DIE
GLUCAGONSEKRETION
.
70
4.1.1
DOSIS-WIRKUNGSBEZIEHUNG
ZWISCHEN
DER
KONZENTRATION
DES
ANP
UND
DER
GLUCAGONSEKRETION
.
70
4.1.2
EINFLUSS
VON
VERSCHIEDENEN
GHICOSEKONZENTRATIONEN
.
71
4.1.3
EINFLUSS
VON
PERTUSSISTOXIN
.
73
4.1.4
WIRKUNG
DES
SPEZIFISCHEN
SECOND
MESSENGER-KAS&OGONS
8-BR-CGMP
AUF
DIE
GLUCAGONSEKRETION
.
73
4.1.5
EFFEKT
EINES
SPEZIFISCHEN
ANTAGONISTEN
DES
GUANYLATCYCLASE-REZEPTORS
.
76
4.2
WIRKUNG
VON
CANF(4-23)
AUF
DIE
GLUCAGONSEKRETION
.
77
4.2.1
DOSIS-WIRKUNGSBEZIEHUNG
ZWISCHEN
DER
KONZENTRATION
VON
CANF(4-23)
UND
DER
GLUCAGONSEKRETION
.
77
4.2.2
EFFEKT
VON
PERTUSSISTOXIN
.
79
4.2.3
NACHWEIS
DER
REGULATION
DER
GJ-PROTEIN-A-UNTEREINHEITEN
NACH
DAUER
STIMULATION
.
79
43
45
CALCIUM-AUFNAHME
.
83
4.3.1
EINFLUSS
DES
ANP
AUF
DIE
45
CALCIUM-AUFHAHME
.
83
4.3.2
WIRKUNG
VON
PERTUSSISTOXIN
AUF
DIE
DURCH
ANP
BEEINFLUSSTE
45
CALCIUM
AUFHAHME
.
83
4.3.3
NACHWEIS
DER
REGULATION
DER
G
O
-PROTEIN-A-UNTEREINHEITEN
NACH
DAUER
STIMULATION
.
84
4.4
DIFFERENZIERUNG
VON
SPANNUNGSABHAENGIGEN
CALCIUMKANAELEN
.
86
4.4.1
HEMMUNG
DES
T-TYP-KANALS
DURCH
NICKEL
.
86
4.4.2
HEMMUNG
DES
E-TYP-KANALS
MITTELS
NITRENDIPIN
.
88
4.4.3
ANP-WIRKUNG
AUF
DIE
DURCH
ARGININ
STIMULIERTE
GLUCAGONSEKRETION
.
89
4.5
EINFLUSS
DER
PROTEINKINASE
C
.
89
INHALTSVERZEICHNIS
V
5
DISKUSSION
.
92
5.1
BEDEUTUNG
DES
GC-A-REZEPTORS
FUER
DEN
DURCH
ANP
INDUZIERTEN
HEMM
EFFEKT
.
92
5.1.1
DOSIS-WIRKUNGSKURVE
DES
ANP
.
92
5.1.2
BETEILIGUNG
DES
GC-A-REZEPTORS
UND
EINES
MOEGLICHEN
ZWEITEN
REZEPTORS
AM
ANP-EFFEKT
.
94
5J.
BEDEUTUNG
DES
CLEARANCE-REZEPTORS
FUER
DEN
DURCH
ANP
INDUZIERTEN
HEMMEFFEKT
.
97
5.2.1
DOSIS-WIRKUNGSKURVE
VON
CANF(4-23)
.
97
5.2.2
BETEILIGUNG
DES
CLEARANCE-REZEPTORS
.
97
53
BETEILIGUNG
VON
G-PROTEINEN
AN
DER
SIGNALTRANSDUKTION
DES
ANP
.
99
5.4
EINFLUSS
VON
ANP
AUF
DEN
INTRAZELLULAEREN
CALCIUMSPIEGEL
.
102
5.4.1
BEDEUTUNG
DER
SECOND
MESSENGER
VON
ANP
.
102
5.4.2
BEEINFLUSSUNG
VON
CALCIUMKANAELEN
.103
5.5
BETEILIGUNG
DER
PROTEINKINASE
C
AM
ANP-EFFEKT
.
107
5.6
SCHLUSSBETRACHTUNG
.
109
6
ZUSAMMENFASSUNG
.
112
6.1
FRAGESTELLUNG
.
112
6J.
ERGEBNISSE
.
113
63
SCHLUSSFOLGERUNGEN
.113
7
LITERATURVERZEICHNIS
.115 |
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