Struktur-Funktions-Analyse von humanem Interleukin-6:
Gespeichert in:
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
1994
|
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| Beschreibung: | Aachen, Techn. Hochsch., Diss., 1994 |
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INHALTSUEBERSICHT
SEITE
ABKUERZUNGEN
IX
1
EINLEITUNG
1
2
ERGEBNISSE
UND
DISKUSSION
4
2.1
KONSTRUKTION
VON
C-TERMINALEN
IL-6-DELETIONS
4
MUTANTEN
UND
VERGLEICH
IHRER
BIOLOGISCHEN
AKTIVITAETEN
2.1.1
KONSTRUKTION
VON
PGEM3-IL-6
4
2.1.2
EXONUKLEASE-III-VERKUERZUNG
DER
IL-6-CDNA
5
2.1.3
IN
VITRO
TRANSKRIPTION
DER
KONSTRUKTE
7
2.1.4
IN
VITRO
TRANSLATION,
STANDARDISIERUNG,
B9-TEST
8
2.2
KONSTRUKTION
DER
C-TERMINALEN
DELETIONSMUTANTEN
10
-1,-2,-3
UND
VERGLEICH
IHRER
BIOLOGISCHEN
AKTIVITAETEN
2.2.1
PCR-KLONIERUNG
DER
DELETIONSMUTANTEN
-1
,-2,-3
10
2.2.2
IN
VITRO
TRANSKRIPTION
UND
TRANSLATION
11
2.2.3
UEBERPRUEFUNG
DER
BIOLOGISCHEN
AKTIVITAET
12
2.3
KONSTRUKTION
VON
PUNKTMUTANTEN
UND
VERGLEICH
13
IHRER
BIOLOGISCHEN
AKTIVITAETEN
2.3.1
PCR-KLONIERUNG
DER
PUNKTMUTANTEN
13
2.3.2
TRANSKRIPTION,
TRANSLATION
UND
BIOASSAYS
15
2.4
SEKUNDAERSTRUKTUR-VORHERSAGEN
FUER
IL-6
16
2.5
EINSATZ
EINES
SYNTHETISCHEN
PEPTIDES
ALS
17
IL-6-INHIBITOR
3
ZUSAMMENFASSUNG
19
4
MATERIAL
20
4.1
CHEMIKALIEN
20
4.2
BIOCHEMIKALIEN
20
4.3
RADIOCHEMIKALIEN
20
4.4
PLASMIDE
21
4.5
LOESUNGEN
UND
PUFFER
21
5
METHODEN
26
5.1
ISOLIERUNG
UND
REINIGUNG
VON
PLASMIDEN
26
5.1.1
PLASMIDPRAEPARATION
26
5.1.1.1
PHENOLEXTRAKTION
26
5.1.1.2
FAELLUNG
VON
NUKLEINSAEUREN
26
5.1.2
MINIPRAEPARATION
26
5.1.3
ARGAROSEGELE
27
5.2
KLONIERUNG
VON
DNA
27
5.2.1
VORBEREITUNG
DES
VEKTORS
27
5.2.1.1
SPALTUNG
VON
DNA
MIT
RESTRIKTIONSENZYMEN
27
5.2.1.2
DEPHOSPHORYLIERUNG
VON
DNA
27
5.2.2
VORBEREITUNG
DES
ZU
MONIERENDEN
DNA-FRAGMENTES
27
5.2.2.1
RESTRIKTION
UND
AUFTRENNUNG
DER
FRAGMENTE
28
5.2.2.2
ELEKTROELUTION
28
5.2.2.3
REINIGUNG
DER
DNA
UEBER
NACS-SAEULEN
28
5.2.3
LIGATION
28
5.2.4
TRANSFORMATION
VON
BAKTERIEN
28
5.2.4.1
HERSTELLUNG
KOMPETENTER
BAKTERIEN
28
5.2.4.2
TRANSFORMATION
29
5.3.1
PRIMER-SYNTHESE
UND
REINIGUNG
29
5.3.2
SEQUENZIER-REAKTION
30
5.3.3
DENATURIERENDE
GELE
30
5.4
VERKUERZUNG
DER
DNA
MIT
EXONUMEASE-III
31
5.5
PCR-KLONIERUNG
32
5.6
IN
VITRO
TRANSKRIPTION
32
5.7
IN
VITRO
TRANSLATION
32
5.8
SDS-PAGE
33
5.9
FLUOROGRAPHIE
34
5.10
B9-PROLIFERATIONS-TEST
35
5.10.1
AUFBEREITUNG
DER
B9-ZELLEN
FUER
DEN
TEST
35
5.11
FIBRINOGEN-INDUKTIONS-TEST
36
6
LITERATUR
38
7
DANKSAGUNG
45 |
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