Regulation der Glucoseaufnahme durch kultivierte Mikro- und Makrovaskuläre Endothelzellen:
Gespeichert in:
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
1995
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| Beschreibung: | Köln, Univ., Diss., 1994 |
| Beschreibung: | 157 S. Ill., graph. Darst. |
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1.
EINLEITUNG
1
2.
MATERIAL
UND
METHODEN
11
2.1
PRAEPARATION
VON
ENDOTHELZELLEN
11
2.2
ZELLKULTUR
21
2.3
CHARAKTERISIERUNG
VON
ENDOTHELZELLEN
30
2.4
MEMBRANPRAEPARATIONEN
33
2.5
PROTEINBESTIMMUNG
NACH
PIERCE
35
2.6
BESTIMMUNG
DES
ATP-GEHALTES
IN
ENDOTHELZELLEN
36
2.7
BESTIMMUNG
DES
SORBITOLGEHALTES
IN
ENDOTHELZELLEN
38
2.8
BESTIMMUNG
DES
GLUCOSEEINBAUS
IN
GLYKOGEN
39
2.9
LACTATBESTIMMUNG
39
2.10
BESTIMMUNG
DES
INTRAZELLULAEREN
VERTEILUNGSVOLUMENS
41
2.11
VERSUCHE
ZUR
AUFNAHME
VON
AMINOISOBUTTERSAEURE
42
2.12
VERSUCHE
ZUM
HEXOSETRANSPORT
VON
ENDOTHELZELLEN
43
2.13
SAEULENCHROMATOGRAPHISCHE
TRENNUNG
VON
DEOXYGLUCOSE
UND
DEOXYGLUCOSE-6-PHOSPHAT
44
2.14
SDS-GELELEKTROPHORESE
47
2.15
TRANSFER
UND
IMMUNOLOGISCHER
NACHWEIS
VON
PROTEINEN
AUF
NITROCELLULOSEMEMBRANEN
52
3.
ERGEBNISSE
61
3.1
ENDOTHELZELLEN
AUS
RATTENHERZEN
-
ISOLIERUNG
UND
KULTIVIERUNG
61
3.2
CHARAKTERISIERUNG
DER
ENDOTHELZELLEN
70
3.3
VERSUCHE
ZUR
INSULINSENSITIVITAET
VON
RHEC
74
3.4
BESTIMMUNG
DES
ZELLVOLUMENS
78
3.5
SORBITOLGEHALT
VON
RHEC
80
3.6
HEXOSETRANSPORT
BEI
ENDOTHELZELLEN
82
3.6.1
AUFNAHME
VON
HEXOSEN
BEI
RHEC
82
3.6.1.1
AUFNAHME
VON
14C-DOG
DURCH
RHEC
83
3.6.1.2
AUFNAHME
VON
14C-GLUCOSE
DURCH
RHEC
90
3.6.2
AUFNAHME
VON
HEXOSEN
BEI
BAEC
94
3.6.2.1
AUFNAHME
VON
14C-GLUCOSE
DURCH
BAEC
94
3.6.2.2
AUFNAHME
VON
14C-DOG
96
3.6.2.3
WESTERN-BLOT-ANALYSEN
VON
GLUT-I
UND
GLUT-IV-PROTEIN
IN
BAEC
99
3.6.2.4
ATP
IN
BAEC
IN
ABHAENGIGKEIT
ZUR
GLUCOSEKONZENTRATION
DES
MEDIUMS
103
3.6.2.5
VERSUCHE
ZUR
KINETIK
DES
HEXOSETRANSPORT
UND
PHOSPHORYLIERUNGSSYSTEMS
BEI
BAEC
105
3.6.2.6
TRENNUNG
DER
ZELLULAEREN
DOG
VON
DOG-6-P
MITTELS
ANIONENTAUSCHER
109
4.
DISKUSSION
112
5.
ZUSAMMENFASSUNG
134
6.
ANHANG
136
7.
LITERATUR
145 |
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