Der Einfluss von Schwermetall-Ionen auf physiologische Eigenschaften und plasmamembrangebundene Transportvorgänge von Schizosaccharomyces pombe:
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1995
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INHALTSVERZEICHNIS
INHALT S'VER Z EI CHM IS
1. EINLEITUNG 1
1.1 ALLGEMEINE EINFUEHRUNG 1
1.2 CHEMISCHE EIGENSCHAFTEN DER
SCHWERMETALLE 2
1.3 SCHWERMETALLE UND IHRE PHYSIOLOGISCHE
WIRKUNG 4
1.3.1 SCHWERMETALLE UND PROTEINE 4
1.3.2 SCHWERMETALLE UND PLASMAMEMBRAN 8
1.4 MECHANISMEN ZUR ENTGIFTUNG DER ZELLEN 9
1.4.1 DIE ENTGIFTUNG DER ZELLE DURCH AKTIVE
TRANSPORTSYSTEME 10
1.4.2 PHYTOCHELATINE - UNERSETZLICHES MITTEL FUER
DEN KAMPF GEGEN DIE SCHWERMETALLTOXIZITAET LL
1.5 ZIELSETZUNG DER ARBEIT 15
2. MATERIAL UND METHODEN 18
2.1 DER HEFESTAMM 18
2.2 NAEHRMEDIEN 18
2.2.1 SCHRAEGAGAR 18
2.2.2 FLUESSIGES NAEHRMEDIUM 18
2.3 ANZUCHT DER HEFE 20
2.4 ERMITTLUNG DER GESAMTZELLZAHL 21
2.5 ERNTE DER HEFE 21
2.5.1 ERNTE 21
2.5.2 BESTIMMUNG DES TROCKENGEWICHTS 21
2.6 MESSUNG DER D-GLUCOSEAUFNAEHME 21
2.6.1 VERSUCHSVORBEREITUNG UND PROBENENTNAHME 21
2.6.2 BESTIMMUNG DER GLUCOSEKONZENTRATION 22
2.7 ERMITTLUNG DER PROTONENTRANSLOKATION 24
2.8 POLAROGRAPHISCHE MESSUNG DER ATMUNGSRATEN 24
2.9 BESTIMMUNG DER INTRAZELLULAEREN VOLUMINA 25
I
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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INHALTSVERZEICHNIS
2.10
2.11
2
.11.1
2
.11.2
2.12
2
.12.1
2
.12.2
2.12.3
2.12.4
2.13
2.14
2.14.1
2.14.2
2.15
MESSUNG DER MEMBRANFLUIDITAET AN
PLASMAMEMBRANEN
BESTIMMUNG DER KALIUM- UND SCHWERMETALL-
KONZENTRATION
MESSUNGEN AN LEBENDEN ZELLEN
MESSUNGEN AN LIPOSOMEN UND PROTEOLIPOSOMEN
PRAEPERATION DER PLASMAMEMBRANEN
AUFSCHLUSS DER ZELLEN
PROTEINBESTIMMUNG
SAEUREPRAEZIPITATION
BESTIMMUNG DER ATPASE-AKTIVITAET
REKONSTITUTION DER PLASMAMEMBRAN
FLUORIMETRISCHE BESTIMMUNG DES PH-GRADIENTEN
AN PLASMAMEMBRANVESIKELN
FLUORIMETRISCHE BESTIMMUNG EINES ATP-INDU-
ZIERTEN PH-GRADIENTEN AN PROTEOLIPOSOMEN
FLUORIMETRISCHE BESTIMMUNG EINES PASSIV
GEBILDETEN PH-GRADIENTEN AN PROTEOLIPOSOMEN
CHEMIKALIEN
27
29
29
29
31
31
32
34
35
33
41
41
44
45
ERGEBNISSE
46
3.1
3.2
3.3
3.4
3.4.1
3.4.2
3.5
3.5.1
3.5.2
3.5.3
BESTIMMUNG DES INTRAZELLULAEREN VOLUMENS
EINFLUSS DER SCHWERMETALLE AUF DAS WACHSTUM V
SCHIZOSACCHAROMYCES POMBE
MESSUNG DER ATMUNGSRATEN
PHYSIOLOGISCHE UNTERSUCHUNGEN PLASMAMEMBRAN-
GEBUNDENER TRANSPORTVORGAENGE
H+-TRANSLOKATION UND D-GLUCOSETRANSPORT
H -ATPASE-AKTIVITAET
SCHWERMETALLAUFNAHME IN DIE ZELLE UND IHRE
AUSWIRKUNG AUF DEN ZELLULAREN K+-HAUSHALT
SCHWERMETA11AUFNAEHME
ZELLULARER K+-VERLUST NACH SCHWERMETALL-
AKKUMULATION
SCHWERMETALLWIRKUNG AUF PROTEOLIPOSOMEN
UND LIPOSOMEN
46
47
54
58
58
62
69
69
75
78
II
3.6
3.6.1
3.6.2
3.6.3
3.7
3.7.1
3.7.2
4.
4.1
4.2
4.3
4.3.1
4.3.2
4.3.3
4.4
4.4.1
4.4.2
4.5
5.
6
.
FLUIDITAETSUNTERSUCHUNGEN AN ZELLEN, LIPOSOMEN,
PROTEOLIPOSOMEN UND MEMBRANFRAGMENTEN
ALLGEMEINE WIRKUNG DER SCHWERMETALLE AUF DIE
MEMBRANFLUIDITAET DER ZELLEN
FLUIDITAETSUNTERSUCHUNGEN AN PROTEOLIPO
SOMEN, LIPOSOMEN UND MEMBRANFRAGMENTEN
DIE^SCHUETZENDE WIRKUNG VON ZN
2+ AUF EINE DURCH
CD
2+ INDUZIERTE MEMBRANFLUIDISIERUNG
AUFBAU VON PH-GRADIENTEN IN PROTEOLIPOSOMEN
AUFBAU DES PH-GRADIENTEN DURCH ATPASE-
STIMULIERUNG
PASSIVER AUFBAU DES PH-GRADIENTEN
81
81
84
87
89
90
93
DISKUSSION
97
DER EINFLUSS DER SCHWERMETALLE AUF VERSCHIE
DENE PHYSIOLOGISCHE PARAMETER DER ZELLE VON
SCHIZOSACCHAROMYCES POMBE
SCHWERMETALL-TRANSPORTMECHANISMEN
DIE H -ATPASE, DAS SCHLUESSELENZYM ZUR CHARAK
TERISIERUNG DER SCHWERMETALLTOXIZITAET
DER EINFLUSS DER MEMBRANFLUIDITAET AUF DIE
H+-ATPASE
DIE WECHSELWIRKUNG DER SCHWERMETALL-IONEN
MIT DER PROTEINSTRUKTUR DER H+-ATPASE
DIE URSACHE DES ZELLULAEREN K
+-VERLUSTES NACH
SCHWERMETALLAPPLIKATION UNTER BESONDERER
BERUECKSICHTIGUNG DER H+-ATPASE
DIE WIRKUNG DER SCHWERMETALL-IONEN AUF DIE
LIPIDMATRIX
ALLGEMEINE WIRKUNG DER SCHWERMETALL-IONEN
DIE ROLLE VON ZN2+ ALS SCHUTZFAKTOR
SCHLUSSFOLGERUNG UEBER DEN MOEGLICHEN
SCHAEDIGUNGSORT DER SCHWERMETALLE
97
102
105
105
108
111
118
118
123
128
ZUSAMMENFASSUNG
130
LITERATURVERZEICHNIS
133 |
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