Charakterisierung von Bakteriorhodopsin-Systemen: photochemische Eigenschaften und Retinalkonfigurationen
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1995
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adam_text | - VA1- 0 CHARAKTERISIERUNG VON BAKTERIORHODOPSIN-SYSTEMEN -
PHOTOCHEMISCHE EIGENSCHAFTEN UND RETINALKONFIGURATIONEN DISSERTATION ZUR
ERLANGUNG DES DOKTORGRADES DER FAKULTAET FUER CHEMIE UND PHARMAZIE DER
LUDWIG-MAXIMILIANS-UNIVERSITAET MUENCHEN VON MARKUS WOLPERDINGER AUS
MUENCHEN FEBRUAR 1995 INHALTSVERZEICHNIS 1. EINLEITUNG 1 2.
BAKTERIORHODOPSIN 3 2. 1 NATUERLICHES VORKOMMEN 3 2.2 PURPURMEMBRAN UND
BAKTERIORHODOPSIN 4 2.2.1 AUFBAU UND STRUKTUR 4 2.2.2 FUNKTIONELLE
EIGENSCHAFTEN 6 2.2.3 DER RETINALCHROMOPHOR 7 2.2.4 DER OPSIN-SHIFT IN
BAKTERIORHODOPSIN 9 2.2.5 DER PHOTOZYKLUS DES WILDTYPS 10 2.2.6
ABSORPTIONSSPEKTREN DER INTERMEDIATE 13 2.3 VERAENDERTE BAKTERIORHODOPSIN
SYSTEME 14 2.3.1 FILME MIT REDUZIERTEM FEUCHTIGKEITSGEHALT 14 2.3.2
BLAUE MEMBRAN 18 2.3.3 GENTECHNOLOGISCH ERZEUGTE MUTANTEN 21 3.
PROBENPRAEPARATION 26 3.1 BAKTERIORHODOPSIN IN SUSPENSION 26 3.1.1
PRAEPARATION WAESSRIGER SYSTEME 27 3.1.2 HERSTELLUNG VON BLAUER MEMBRAN 27
3.2 BAKTERIORHODOPSIN FILME 29 3.2.1 FILME AUS POLYACRYLAMIDGEL 29 3.2.2
DIALYSIERTE FILME 30 3.2.3 AUFGETROCKNETE FILME : 31 3.2.4
ZENTRIFUGIERTE FILME 34 3.2.5 ZUSAMMENFASSUNG DER FILMEIGENSCHAFTEN 35
4. METHODEN UND VERFAHREN ZUR CHARAKTERISIERUNG VON BAKTERIORHODOPSIN 37
4.1 MESSUNGEN VON ABSORPTIONSEIGENSCHAFTEN 37 4.2 LANGZEITBELICHTUNGEN
40 4.3 RETINALEXTRAKTIONEN 41 4.4 BANDENANPASSUNG UND SPEKTRENSIMULATION
44 5. GRUNDLEGENDE EIGENSCHAFTEN EINIGER BAKTERIORHODOPSIN-SYSTEME 46
5.1 WAESSRIGE SUSPENSIONEN 47 5.1.1 SPEKTREN UND RETINALISOMERE BEI
VERSCHIEDENEN PH-WERTEN 47 5.1.1.1 WILDTYP, D96N UND D85E 48 5.1.1.2
BLAUE MEMBRAN, D85N UND D2N 50 5.1.2 LICHT- UND DUNKELADAPTION 53 5.2
FILME MIT REDUZIERTEM FEUCHTIGKEITSGEHALT 57 5.2.1 ABSORPTIONSSPEKTREN
57 5.2.2 RETINALISOMERE BEI UNTERSCHIEDLICHEN TROCKNUNGSGRADEN 61 5.2.3
ISOMERENZUSAMMENSETZUNG UND PH-WERT 66 5.3 ZUSAMMENFASSUNG UND VERGLEICH
69 6. EIGENSCHAFTEN DES WILDTYPS UND DER VARIANTE D96N IN
GLYCERINHALTIGEN FILMEN ... 72 6. 1 DIE LICHT-/DUNKELADAPTION 73 6.1.1
ZUSAMMENSETZUNG DER RETINALISOMERE 74 6.1.2 SPEKTRALES VERHALTEN BEI
LICHTADAPTION 76 6.1.3 SPEKTRALES VERHALTEN BEI DUNKELADAPTION 78 6.1.4
ZUSAMMENFASSUNG 79 6.2 DAS PHOTOCHEMISCHE VERHALTEN 80 6.2.1 SCHWACH
GETROCKNETE FILME 80 6.2.2 STARK GETROCKNETE FILME 82 6.2.3
PHOTOZYKLUSMODELL FUER GLYCERINHALTIGE FILME 86 6.3 DAS O-INTERMEDIAT 87
6.3.1 PHOTOAKTIVITAET DES O-INTERMEDIATES 88 6.3.2 ANREICHERUNG DER
PHOTOPRODUKTE DES O-INTERMEDIATES 90 6.3.3 REAKTIONEN DER PHOTOPRODUKTE
DES O-INTERMEDIATES 93 6.3.4 ERWEITERTES PHOTOZYKLUSMODELL 97 6.4
ZUSAMMENFASSUNG UND KONSEQUENZEN 99 7. PHOTOCHEMIE DER VARIANTEN D8SN
UND D2N IN DER GELBEN FORM 101 7.1 PHOTOCHEMISCHES VERHALTEN DER
SUSPENSIONEN 102 7.2 PHOTOCHEMIE DER FILME 103 7.3 ZUSAMMENFASSUNG UND
VERGLEICH 107 8. PHOTOCHEMIE DER VARIANTEN D85N, D2N UND D8SE IN DER
BLAUEN FORM SOWIE DER BLAUEN MEMBRAN 108 8.1 PHOTOCHEMISCHES VERHALTEN
DER SUSPENSIONEN 109 8.2 BLEICHEIGENSCHAFTEN GLYCERINHALTIGER D2N-FILME
112 8.2.1 EINFLUSS VON WASSERGEHALT UND GLYCERINGEHALT 112 8.2.2
AUSWIRKUNG DER TEMPERATUR 114 8.2.3 BLEICHUNG IN SUSPENSIONEN UND FILMEN
BEI RAUMTEMPERATUR 116 8.2.4 ZUSAMMENFASSUNG DES BLEICHVERHALTENS VON
D2N-FILMEN 118 8.3 BLEICHVERHALTEN UND BILDUNG VON 9-CIS RETINAL 119 8.4
EIGENSCHAFTEN DER PHOTOPRODUKTE 122 8.4.1 THERMISCHE RELAXATION 122
8.4.2 PHOTOCHEMISCHE KONVERSIONEN 124 8.4.3 ZUSAMMENFASSUNG 127 8.5
QUANTENAUSBEUTEN DER PHOTOREAKTIONEN 127 8.6 BEISPIELE FUER
DATENSPEICHERUNG 134 8.6.1 AUFLOESUNG VON STRUKTUREN 134 8.6.2
SEQUENZIELLE SCHREIB-/LESE-/LOESCHPROZESSE 135 8.7 ZUSAMMENFASSUNG UND
DISKUSSION 138 9. ZUSAMMENFASSUNG 142 10. LITERATUR 145 11. ANHANG 161
11.1 ARBEITSVORSCHRIFTEN ZUR FILMHERSTELLUNG 161 11.2 BERECHNUNGEN ZUR
FILMPRAEPARATION 166 11.3 ABKUERZUNGEN IM TEXT 168
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