Untersuchungen zum Stoffwechsel von mittelkettigen Fettsäuren und Triglyzeriden in Zellkulturen menschlicher Fibroblasten und Lymphoblasten:
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1995
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EINLEITUNG
.
2
1.
STRUKTUR,
PHYSIKALISCHE
UND
CHEMISCHE
EIGENSCHAFTEN
MITTELKETTIGER
FETTSAEUREN
UND
TRIGLYCERIDE
.
2
2.
STOFFWECHSEL
DER
MITTELKETTIGEN
FETTSAEUREN
UND
TRIGLYCERIDE
.
3
2.1.
DIGESTION
UND
ABSORPTION
.
5
2.2.
TRANSPORT
DER
MITTELKETTIGEN
FETTSAEUREN
UND
TRIGLYCERIDE
.
6
2.3
HEPATISCHE
VERSTOFFWECHSELUNG
.
6
2.4.
EXTRAHEPATISCHE
VERSTOFFWECHSELUNG
.
6
3.
THERAPEUTISCHER
EINSATZ
DER
MITTELKETTIGEN
FETTSAEUREN
UND
TRIGLYCERIDE
.
7
3.1.
MITTELKETTIGE
FETTSAEUREN
UND
TRIGLYCERIDE
IN
DER
ENTERALEN
ERNAEHRUNG
.
7
3.2.
MITTELKETTIGE
FETTSAEUREN
UND
TRIGLYCERIDE
IN
DER
PARENTERALEN
ERNAEHRUNG
.
9
4.
PROBLEMSTELLUNG
DER
VORLIEGENDEN
ARBEIT
.
11
METHODIK
.
13
A.
MATERIALIEN
UND
GERAETE
.
13
B.
METHODEN
.
15
1.
ZELLKULTUREN
15
1.1
MENSCHLICHE
HAUTFIBROBLASTEN
.
15
1.2.
MITOGEN
STIMULIERTE
MENSCHLICHE
LYMPHOBLASTEN
.
15
1.3
.
PRIMAERKULTUREN
VON
RATTENMUSKELZELLEN
.
16
2.
KONDITIONIERTE
ZELLMEDIEN
.
16
2.1.
HERSTELLUNG
VON
KONDITIONIERTEM
FIBROBLASTENMEDIUM
.
16
2.2.
HERSTELLUNG
VON
KONDITIONIERTEM LYMPHOZYTENMEDIUM
.
17
3.
INKUBATIONSLOESUNGEN
.
17
3.1
HERSTELLUNG
DER
'^C-TRI-OKTANOAT-INKUBATIONSLOESUNG
.
17
3.2.
HERSTELLUNG
DER
^H-SUCROSE-INKUBATIONSLOESUNG
.
18
3
3.
HERSTELLUNG
DER
^C-OKTANSAEURE-INKUBATIONSLOSUNG
.
18
4.
INKUBATION
.
18
4.1.
INKUBATION
DER
ZELLEN
.
18
4.1.1.
INKUBATION MIT
'^C-TRI-OKTANOAT
18
4
1.11
ZUGABE
VON
CYTOCHALASIN
B
19
4.1.2.
INKUBATION MIT
^H-SUCROSE
19
4.1.3.
INKUBATION MIT
'
4
C-OKTANSAEURE
19
4.2.
INKUBATION
DER
KONDITIONIERTEN ZELLMEDIEN
.
20
4.2.1
ZUGABE
VON
ENZYMINHIBITOREN
ZUM
KONDITIONIERTEN
ZELLMEDIEN
20
5.
EXTRAKTION
UND
MESSUNG
DER
RADIOAKTIV
MARKIERTEN
SUBSTANZEN
.
21
5.1.
EXTRAKTION
DER
LIPIDE
AUS
DEM
KULTURMEDIUM
.
21
5.2.
MESSUNG
DER
RADIOAKTIVITAET
IN
DEN
EXTRAKTEN
.
21
5.3.
MESSUNG
DER
RADIOAKTIVITAET
IN
DEN
ZELLEN
.
22
6.
NACHWEIS
UND
IDENTIFIKATION
MARKIERTER
SUBSTANZEN
MIT
HILFE
DER
DUENNSCHICHTCHROMATOGRAPHIE
.
22
6.1.
NACHWEIS
VON
TRI-OKTANOAT
IM
KULTURMEDIUM
.
22
6.2.NACHWEIS
DER
OKTANSAURE
IM
KULTURMEDIUM
VON
FIBROBLASTEN
.
23
6.3.
NACHWEIS
UND
IDENTIFIKATION
RADIOAKTIV
MARKIERTER
SUBSTANZEN
INNERHALB
DER
ZELLEN
.
23
7.
MESSUNG
DER
COJ-PRODUKTION
DURCH
DIE
ZELLEN
.
23
8.
BESTIMMUNG
DES
PROTEINGEHALTS
DER
ZELLEN
.
24
ERGEBNISSE
.
25
1.
HYDROLYSE
VON
TRI-OKTANOAT
.
25
1.1.
HYDROLYSE
VON
TRI-OKTANOAT
IM
MEDIUM
VON
MENSCHLICHEN
FIBROBLASTEN
UND
LYMPHOBLASTEN
.
25
1.2.
PRUEFUNG
DER
HYDROLYSE
IN
ZELLFREIEM
NAEHRMEDIUM
.
29
1
3.
EINFLUSS
VON
CYTOCHALASIN
B
AUF
DIE
ABNAHME
VON
TRI-OKTANOAT
IM
ZELLMEDIUM
.
30
1.4.
ANALYSE
DER
WASSERLOESLICHEN
RADIOAKTIVEN
PRODUKTE
.
32
1.5.
HYDROLYSE
VON
TRI-OKTANOAT
IN
KONDITIONIERTEM
MEDIUM
MENSCHLICHER
FIBROBLASTEN
UND
LYMPHOBLASTEN
.
35
1.6
EFFEKT
VON
ENZYMINHIBITOREN
AUF
DIE
HYDROLYSE
VON
TRI-OKTANOAT
IN
KONDITIONIERTEM
FIBROBLASTENMEDIUM
.
38
2.
VERWERTUNG
DER
OKTANSAEURE
DURCH
DIE
ZELLEN
.
40
2.1.
OXIDATION
VON
OKTANSAEURE
DURCH
FIBROBLASTEN
.
40
2
2.
OXIDATION
VON
OKTANSAEURE
DURCH
LYMPHOBLASTEN
.
42
2.3.
OXIDATION
VON
OKTANSAEURE
DURCH
RATTENMUSKELZELLEN
.
44
2.4.
EINBINDUNG
VON
OKTANSAEURE
IN
ANDERE
LIPIDE
INNERHALB
DER
ZELLE
.
46
INTERPRETATION
.
49
KRITISCHE
DISKUSSION
.
51
ZUSAMMENFASSUNG
.
53
LITERATURVERZEICHNIS |
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