Validierung einiger molekularbiologischer Methoden zur Individualisierung und zur Abstammungsbegutachtung des Menschen:
Gespeichert in:
1. Verfasser: | |
---|---|
Format: | Buch |
Sprache: | German |
Veröffentlicht: |
1994
|
Schlagworte: | |
Online-Zugang: | Inhaltsverzeichnis |
Beschreibung: | Frankfurt a. Main., Univ., Diss., 1994 |
Beschreibung: | 175 S. graph. Darst. |
Internformat
MARC
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INHALTSVERZEICHNIS
I
EINLEITUNG
2
MATERIAL
UND
METHODEN
9
2.1
PROBANDEN
9
2.1.1
VERIFIZIERUNG DER
ABSTAMMUNG
BEI
FAMILIEN
9
2.2
DNA-ISOLATION
10
2.2.1
LOESUNGEN
FUER
DIE
DNA-ISOLATION
10
2.2.2
DNA-ISOLATION
AUS
VOLLBLUT
12
2.2.3
DNA-ISOLATION
AUS
EDTA-BLUT
12
2.2.3.1
DNA-ISOLATION
AUS
KOAGULIERTEM
UND
HAEMOLYSIERTEM
BLUT
13
2.2.3.2
DNA-ISOLATION
AUS
HEPARIN-BLUT
14
2.2.4
DNA-ISOLATION
AUS
HUMANEN
GEWEBEN
14
2.2.5
DNA-ISOLATION
AUS
SPERMA
15
2.2.6
DNA-ISOLATION
AUS
FORENSISCHEM
SPURENMATERIAL
15
2.2.6.1
DNA-ISOLATION
AUS
BLUTSPUREN
15
2.2.6.2
DNA-ISOLATION
AUS
EINER
SPERMASPUR
16
2.2.7
DNA-ISOLATION
AUS
HUNDSCHLEIMHAUTEPITHELZELLEN
17
2.2.8
DNA-ISOLATION
AUS
BAKTERIEN
17
2.2.8.1
ANZUCHTMEDIEN
UND
ISOLATIONSLOESUNGEN
17
2.2.8.2
ANZUCHT
DER
BAKTERIEN
18
2.2.8.3
ISOLATION
DER
PLASMID-DNA
18
2.3
QUANTIFIZIERUNG
DER
GENOMISCHEN
DNA
20
2.4
KONTROLLE
DER
DNA-QUALITAET
20
2.5
AUFKONZENTRIERUNG
VERDUENNTER
DNA-LOESUNGEN
21
2.6
RESTRIKTIONSSPALTUNG
21
2.7
AGAROSEGELELEKTROPHORESE
21
2.7.1
LOESUNGEN
FUER
DIE
ELEKTROPHORESE
21
2.7.2
GELHERSTELLUNG
UND
ELEKTROPHORESE
22
2.8
TRANSFER
VON
NUKLEINSAEUREN
AUF
MEMBRANEN
23
2.8.1
LOESUNGEN
UND
MATERIALIEN
FUER
DEN
MEMBRANTRANSFER
23
2.8.2
DURCHFUEHRUNG
DES
SOUTHERN-BLOTTINGS
24
2.9
TROCKNEN
VON
AGAROSE-GELEN
24
2.9.1
LOESUNGEN
ZUR
HERSTELLUNG
GETROCKNETER
GELE
24
2.9.2
HANDHABUNG DER
GELE
25
2.10
VERWENDETE
DNA-SONDEN
25
2.10.1
SINGLE-LOCUS-SONDEN
(SLS)
26
2.10.2
MULTI-LOCUS-SONDEN
(MLS)
26
2.11
RADIOAKTIVE
MARKIERUNG
DER
DNA-SONDEN
27
2.11.1
"NICK"-TRANSLATION
27
2.11.2
OLIGOPRIMING
28
2.11.3
RADIOAKTIVE
MARKIERUNG
VON
OLIGONUKLEOTIDSONDEN
28
2.11.4
KONTROLLE
DER
EINBAURATE
BEI
MARKIERUNGS
REAKTIONEN
29
2.12
HYBRIDISIERUNGEN
29
2.12.1
HYBRIDISIERUNGSLOESUNGEN
30
2.12.1.1
LOESUNGEN
FUER
SLPS
30
2.12.1.2
LOESUNGEN
FUER
OLIGONUKLEOTID-SONDEN
31
2.12.2
HYBRIDISIERUNG
MIT
SINGLE-LOCUS-SONDEN
31
2.12.3
HYBRIDISIERUNG
MIT
MULTI-LOCUS-SONDEN
(CAC)
5
(CACA)
4
,
(GATA)
4
32
2.13
AUTORADIOGRAPHIE
32
2.13.1
AUSWAHL
EINER
GEEIGNETEN
ROENTGENFILM
VERSTAERKERFOLIEN-KOMBINATION
33
2.14
BESTIMMUNG
DER
RESTRIKTIONSFRAGMENTLAENGEN
34
2.14.1
MANUELLE
BESTIMMUNG
DER
FRAGMENTLAENGEN
34
2.14.2
SEMIMANUELLE
BESTIMMUNG
DER
FRAGMENTLAENGEN
34
2.14.3
AUSWERTUNG
DER
ERGEBNISSE
DES
POLYMORPHISMUS
(CAC)
5
/HINFI
35
3
ERGEBNISSE
40
3.1
UEBERPRUEFUNG
VERSCHIEDENER
KOMBINATIONSMOEGLICH
KEITEN
VON
VERSTAERKERFOLIEN
MIT
ROENTGENFILMEN
40
3.2
KRITERIEN
FUER
DIE
AUSWERTUNG
DER
RESTRIKTIONS
FRAGMENTMUSTER
42
3.2.1
AUSWERTUNG
VON
FRAGMENTMUSTERN
42
3.2.2
DEFINITION
VON
FRAGMENTEN
42
3.3
AUSWERTUNG
DER
MULTI-LOCUS-POLYMORPHISMEN
43
3.3.1
AUSWERTUNG
DER
ERGEBNISSE
MIT
DER
SONDE
(GACA}
4
43
3.3.1.1
ERGEBNISSE
DER
MIT
ALU
I
GESPALTENEN
DNA-PROBEN
43
3.3.1.1.1
FRAGMENTMUSTER
UND
HAEUFIGKEITSVERTEILUNG
MIT
DEM
SYSTEM
(
GACA)
4
/
ALUL
43
3.3.1.1.2
AUSWERTUNG
VON
FAMILIENFAELLEN:
SYSTEM
(GACA)
4
/ALUI
47
3.3.1.2
ERGEBNISSE
DER
MIT
HINFL
GESPALTENEN
DNA
MIT
DER
SONDE
(GACA)
4
48
3.3.1.2.1
FRAGMENTMUSTER
UND
HAEUFIGKEITSVERTEILUNG
MIT
DEM
SYSTEM
(GACA)
4
/HINFI
48
3.3.1.2.2
AUSWERTUNG
VON
FAMILIENFAELLEN:
SYSTEM
(GACA)
4
/HINFI
51
3.3.1.3
ERGEBNISSE
DER
MIT
MBOL
GESPALTENEN
DNA-PROBEN
52
3.3.1.3.1
FRAGMENTMUSTER
UND
HAEUFIGKEITSVERTEILUNG
IM
SYSTEM
(GACA)
4
/MBOL
52
3.3.1.3.2
AUSWERTUNG
VON
FAMILIENFAELLEN:
SYSTEM
(GACA)
4
/MBOL
53
3.3.1.3.3
VERGLEICH
DER
AUSSAGEFAEHIGKEIT
DER
VATER-KIND
ABSTAMMUNG
IN
FAMILIENAUSWERTUNGEN
MIT
(GACA)
4
HYBRIDISIERTER
DNA
NACH
SPALTUNG
MIT
DEN
ENZYMEN
ALUL,
HINFL
UND
MBOL
57
3.3.2
ERGEBNISSE
DER
UNTERSUCHUNGEN
MIT
DER
OLIGONU-
57
KLEOTIDSONDE
(GATA)
4
MIT
ALUL,
HINFL
SOWIE
MBOL
GESPALTENER
DNA
59
3.3.2.1
AUSWERTUNG
DER
MIT
DER
SONDE
(GATA)
4
HYBRIDI
SIERTEN
MUTTER-KIND-VATER
DNA-PROBEN
NACH
61
SPALTUNG
MIT
DEN
ENZYMEN
ALUL,
HINFL
UND
MBOL
3.3.3
ERGEBNISSE
MIT
DER
OLIGONUKLEOTIDSONDE
(CAC)
5
63
3.3.3.1
FRAGMENTGROESSEN
DER
VERGLEICHS-DNA
63
3.3.3.2
DIE
EINTEILUNG
DER
FRAGMENTMUSTER
IN
BEREICHE
64
3.3.3.3
BEISPIELE
FUR
BANDENKOMBINATIONEN
BEI
ELTERN
KIND-TRIOS
67
3.3.3.4
UNTERSUCHUNGSERGEBNISSE
DER
UNVERWANDTEN
PERSO
NEN
IM
SYSTEM
HINFL/(CAC)
5
69
3.3.3.4.1
BANDENHAEUFIGKEITEN
UND
VERTEILUNG
DER
BANDEN
IM
FRAGMENTMUSTER
69
3.3.3.4.2
BANDSHARING
BEI
UNVERWANDTEN
PERSONEN
IM
SYSTEM
HINFL/(CAC)
5
70
3.3.3.5
ERGEBNISSE
DER
MUTTER-KIND-VERGLELCHE
IM
HINFL/(CAC)
5
-POLYMORPHISMUS
74
3.3.3.6
ERGEBNISSE
DER
VATER-KIND-VERGLEICHE
IM
HINFL/(CAC)
5-POLYMORPHISMUS
78
3.3.3.7
AUSWERTUNG
VON
WAHREN
KIND-MUTTER-VATER-TRIOS
82
3.3.3.7.1
BANDSHARING
BEI
WAHREN
KIND-MUTTER-VATER-TRIOS
82
3.3.3.7.2
AUSSCHLUSSKONSTELLATIONEN
IN
WAHREN
FAMILIEN
86
3.3.3.8
AUSWERTUNG
VON
VATERSCHAFTSAUSSCHLUSSEN
IM
SYSTEM
HINFL/(CAC)
5
88
3.3.3.8.1
BANDSHARING
ZWISCHEN
KIND
UND
NICHTVATER
88
3.3.3.8.2
AUSSCHLUSSFRAGMENTE
BEI
KIND-MUTTER-NICHTVATER
TRIOS
89
3.3.3.8.3
BANDSHARING
BEI
KIND-MUTTER-NICHTVATER
KOMBINATIONEN
91
3.4
HYBRIDISIERUNGSERGEBNISSE
MIT
SINGLE-LOCUS-SONDEN
92
3.4.1
GENAUIGKEIT
DER
FRAGMENTGROESSENBESTIMMUNG
92
3.4.1.1
FRAGMENTGROESSENBESTIMMUNGEN
AUF
VERSCHIEDENEN
GELEN
95
3.4.1.1.1
ERMITTLUNG
DER
BESTIMMUNGSGENAUIGKEIT
DER
FRAG
MENTGROESSEN
ANHAND
DER
KONTROLL-DNA
95
3.4.1.1.2
ERMITTLUNG
DER
BESTIMMUNGSGENAUIGKEIT
DER
FRAG
MENTGROESSEN
ANHAND
VON
DOPPELBESTIMMUNGEN
98
3.4.1.1.3
VERGLEICH
DER
FRAGMENTGROESSENBESTIMMUNG
MIT
ZWEI
ANDEREN
LABORATORIEN
99
3.4.1.2
FRAGMENTGROESSENBESTIMMUNG
AUF
GLEICHEN
GELEN
102
3.4.2
BEURTEILUNG
DER
FRAGMENTMUSTER
IN
SINGLE-LOCUS-
SYSTEMEN
104
3.4.3
UNTERSUCHUNGSERGEBNISSE
AM
LOCUS
D2S44.
DAR
STELLUNG
MIT
HILFE
DER
SONDE
YNH24
107
3.4.3.1
UEBERPRUEFUNG
DES
ISOLIERTEN
INSERTS
YNH24
107
3.4.3.2
HAEUFIGKEITSVERTEILUNG
DER
IM
SYSTEM
YNH24/BAMHI
DARGESTELLTEN
FRAGMENTE
108
3.4.3.3
HAEUFIGKEITSVERTEILUNG
DER
FRAGMENTGROESSEN
IM
SYSTEM
YNH24/HINFI
109
3.4.4
HAEUFIGKEITSVERTEILUNG
DER
FRAGMENTGROESSEN
IM
SYSTEM
MSL/HINFI
(LOCUS
D1S7)
111
3.4.5
HAEUFIGKEITSVERTEILUNG
DER
FRAGMENTE
IM
SYSTEM
MS31/HINFI
(LOCUS
D7S21)
112
3.4.6
HAEUFIGKEITSVERTEILUNG
DER
FRAGMENTGROESSEN
IM
SYSTEM
MS43A/HINFI
(LOCUS
D12S11)
113
3.4.7
HAEUFIGKEITSVERTEILUNG
DER
FRAGMENTGROESSEN
IM
114
SYSTEM
G3/HINFL
(LOCUS
D7S22)
3.4.8
ZYGOTIE-RATEN
AN
DEN
LOCI
D1S7,
D7S22,
D12S11,
115
D7S21
UND
D2S44
3.4.9
FAMILIENUNTERSUCHUNGEN
MIT
SINGLE-LOCUS-SONDEN
117
3.4.9.1
DARSTELLUNG
DER
SEGREGATION
VON
DNA-FRAGMENTEN
117
3.4.9.2
BEOBACHTETE
AUSSCHLUSSRATEN
DER
SLS
119
3.4.9.3
AUSWERTUNG
DER
MEIOSEN
120
3.4.9.3.1
UEBERPRUEFUNG
DER
FAELLE
VON
NICHTUBEREINSTIMMENDEN
121
ELTER-KIND-PAAREN
3.4.9.3.2
GROESSENAENDERUNG
ZWISCHEN
DER
ERWARTETEN
UND
DER
125
BEOBACHTETEN
FRAGMENTGROESSE
VON
ELTERN
UND
KINDERN
3.4.10
BESONDERE
FRAGMENTMUSTER
126
3.4.10.1
"NATUERLICHES
AUFTRETEN"
VON
BANDENMUSTERN
126
MIT
3
FRAGMENTEN
3.4.10.2
"KUENSTLICHES
VORKOMMEN"
VON
3
UND
4-FRAGMENT
130
MUSTERN
3.4.11
FORENSISCH
RELEVANTE
UNTERSUCHUNGEN
134
3.4.11.1
IDENTITAETSUNTERSUCHUNGEN
134
3.4.11.2
UNTERSUCHUNGEN
EINES
VAGINALABSTRICHES
135
3.4.11.3
UNTERSUCHUNGEN
AN
FOETALEM
GEWEBE
137
4
DISKUSSION
139
4.1
ALLGEMEINE
BETRACHTUNG
139
4.2
MULTI-LOCUS-POLYMORPHISMEN
140
4.3
REPRODUZIERBARKEIT
DER
ERGEBNISSE
IN
MULTI-LOCUS
POLYMORPHISMEN
141
4.4
AUSSAGEFAEHIGKEIT
DER
BANDSHARINGRATE
BEI
MULTI
LOCUS-POLYMORPHISMEN
143
4.5
VERGLEICH
DER
MUTATIONSRATEN
ZWISCHEN
MULTI-LOCUS
UND
SINGLE-LOCUS-POLYMORPHISMEN
144
4.6
BEURTEILUNG
EINER
MUTATION
146
4.7
KRITERIEN
ZUR
"MATCH"-BEURTEILUNG
147
4.8
ERMITTLUNG
DER
FRAGMENTHAEUFIGKEIT
147
4.9
WAHL
DER
DATENBANK
149
4.10
BEDEUTUNG
VON
SUBPOPULATIONEN
UND
HOMOZYGOTENUEBER
SCHUESSEN
149
4.11
PROBLEMATIK
DER
PHAENOTYPFREQUENZEN
GLEICHER
PROBEN
IN
VERSCHIEDENEN
LABORATORIEN
152
4.12
UNABHAENGIGKEIT
DER VERERBUNG
153
4.13
BEDEUTUNG
DER
VNTR-POLYMORPHISMEN
FUER
DIE
CHIMAERIS
MUSANALYSE
153
4.14
DNA-POLYMORPHISMEN
UND
RECHTSPRECHUNG
IN
DEUTSCHLAND
154
4.15
DNA-POLYMORPHISMEN
UND
RECHTSPRECHUNG
IN
DEN
VEREI
NIGTEN
STAATEN
VON
AMERIKA
157
5
ZUSAMMENFASSUNG
159
6
LITERATUR
160
7
ANHANG
8
VEROEFFENTLICHUNGEN
172
9
DANKSAGUNG
173
10
LEBENSLAUF
174 |
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