Phytasen und Phytat in Wurzeln von Mais:
Gespeichert in:
1. Verfasser: | |
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Sprache: | German |
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1994
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1.
EINLEITUNG
UND
PROBLEMSTELLUNG
3
2.
LITERATURUEBERSICHT
6
2.1.
MYO-INOSITOL
1
,2,3,4,5,6-HEXAKISPHOSPHAT
(PHYTAL)
.
6
2.2.
PHYTAT
IM
BODEN
.
8
2.3.
PHYTAT
IN
QUARZSAND
UND
HYDROKULTUR
.
9
2.4.
MYO-INOSITOLHEXAPHOSPHATHYDROLASEN
(PHYTASEN)
.
11
2.5.
PHYTASEN
UND
ANDERE
PHOSPHOMONOESTERASEN
IM
BODEN
.
14
3.
MATERIAL
UND
METHODEN
16
3.1
QUANTIFIZIERUNG
VON
PHYTAT
.
16
3.2
PAPIERELEKTROPHORESE
VON
INOSITOLPHOSPHATEN
.
17
3.3
LOKALISIERUNG
VON
INOSITOLPHOSPHATEN
AUF
DEN
CHROMATOGRAMMEN
.
17
3.4
DARSTELLUNG
VON
33
P-MYO-LNOSITOL
1,2,3,4,5,6-HEXAK/SPHOSPAT
.
17
3.5
BIOCHEMISCHE
SYNTHESE
VON
33
P-MYO-LNOSITOL
1,2,3,4,5,6
HEXAK/SPHOSPHAT
.
18
3.6
SAEULENCHROMATOGRAPHISCHE
REINIGUNG
VON
INOSITOLPHOSPHATEN
.
19
3.7
MARKIERUNG
UND
BEPFLANZUNG
DES
VERSUCHSBODENS
.
21
3.8
ZERTRENNEN
DER
BODENZYLINDER
.
23
3.9
RADIOAUTOGRAPHIEN
.
24
3.10
AUSWERTUNG
DER
RADIOAUTOGRAMME
.
24
3.11
AUSWERTUNG
DER
DATEN
.
25
3.12
RECHNERISCHE
KORREKTUR
DER
VERARMUNGSPROFILE
.
27
3.13
BEURTEILUNG
DER
RECHNERISCHEN
KORREKTUR
.
27
3.14
BESTIMMUNG
DER
WURZELDURCHMESSER
.
27
3.15
BESTIMMUNG
DER
GESAMTAUFLOESUNG
.
28
3.16
VERSUCHSBODEN
.
29
3.17
PHOSPHATBESTIMMUNG
.
30
3.18
HYDROKULTUR
VON
MAIS
.
31
3.19
PROTEINBESTIMMUNG
.
32
3.20
BESTIMMUNG
DER
PHYTASE
UND
PHOSPHATASEAKTIVITAET
.
32
3.21
AUFARBEITUNG
DER
WURZELN
.
33
3.22
ISOELEKTRISCHE
FOCUSSIERUNG
VON
PROTEINEN
.
34
3.23
POLYACRYLAMID-GELELEKTROPHORESE
(PAGE)
.
35
3.24
PAGE
UNTER
NICHT
DENATURIERENDEN
BEDINGUNGEN
.
35
3.25
AKTIVITAETSFAERBUNG
VON
PHYTASEN
.
36
3.26
AKTIVITAETSFAERBUNG
VON
PHOSPHATASEN
.
37
3.27
PAGE
UNTER
DENATURIERENDEN
BEDINGUNGEN
.
38
3.28
PROTEINFAERBUNG
UND
GELTROCKNUNG
.
38
3.29
LOKALISIERUNG
DER
PHYTASE
UND
PHOSPHATASEAKTIVITAET
IM
WURZELGEWEBE
VON
MAIS
.
39
3.30
EXTRAKTION
DER
INOSITOLPHOSPHATE
AUS
MAISWURZELN
.
40
3.31
MDD-HPLC
DER
INOSITOLPHOSPHATE
.
41
3.32
PROBENVORBEREITUNG
FUER
UNTERSUCHUNGEN
IM
ELEKTRONENMIKROSKOP
.
41
3.32.1
PROBENVORBEREITUNG
FUER
UNTERSUCHUNGEN
IM
RASTERELEKTRONEN
MIKROSKOP
.
41
3.32.2
PROBENVORBEREITUNG
FUER
UNTERSUCHUNGEN
IM
TRANSMISSIONS
ELEKTRONENMIKROSKOP
.
41
3.33
EDX-MAPPING
IM
RASTERELEKTRONENMIKROSKOP
.
43
3.34
ELEMENTANALYSE
AM
TRANSMISSIONSELEKTRONENMIKROSKOP
MITTELS
ELEKTRONEN
ENERGIE-VERLUST
SPEKTROSKOPIE
(EELS)
.
44
3.35
32
P-MARKIERUNG
DER
MAISKEIMLINGE
.
46
4.
ERGEBNISSE
47
4.1
DIE
VERTEILUNG
DER
RADIOAKTIVITAET
IM
NICHT
DURCHWURZELTEN
BODEN
.
47
4.2
33
P-PHOSPHAT
UND
33
P-PHYTAT
IN
DER
RHIZOSPHAERE
VON
MAIS
.
50
4.2.1
VERTEILUNG
VON
H
3
33
PO4
IN
DER
RHIZOSPHAERE
VON
MAIS
.
50
4.2.2
VERTEILUNG
VON
33
P-PHYTAT
IN
DER
RHIZOSPHAERE
VON
MAIS
.
51
4.2.3
THEORETISCHE
AUSDEHNUNG
DER
VERARMUNGSZONEN
.
51
4.3
VERTEILUNG
VON
33
P
IM
WURZELGEWEBE
VON
MAIS
.
53
4.4
REINIGUNG
UND
CHARAKTERISIERUNG
VON
PHYTASEN
.
54
4.4.1
REINIGUNG
DER
PHYTASEN
.
54
4.4.2
BILANZIERUNG
DER
PHYTASEREINIGUNG
.
59
4.4.3
MOLEKULARGEWICHTSBESTIMMUNG
DER
PHYTASE
1.1
.
60
4.4.4
KINETISCHE
EIGENSCHAFTEN
DER
PHYTASEN
1.1.1-1.1.3
.
61
4.4.5
CHARAKTERISIERUNG
DER
HYDROLYSEPRODUKTE
.
64
4.4.5
HEMMUNG
UND
AKTIVIERUNG
DER PHYTASEN
.
68
4.5
LOKALISIERUNG
DER
PHOSPHOHYDROLASEN
IN
WURZELN
VON
MAIS
.
70
4.5.1
LOKALISIERUNG
DER
PHOSPHATASEN
IM
WURZELGEWEBE
VON
MAIS
.
71
4.5.2
LOKALISIERUNG
DER
PHYTASEN
IM
WURZELGEWEBE
VON
MAIS
.
73
4.6
IDENTIFIZIERUNG
VON
PHYTAT
IM
MAISKEIMLING
.
74
4.6.1
IDENTIFIZIERUNG
VON
PHYTAT
IN
DER
KEIMWURZEL
.
74
4.6.2
QUANTIFIZIERUNG
VON
PHYTAT
IN
DER
KEIMWURZEL
.
76
4.6.3
IDENTIFIZIERUNG
VON
PHYTAT
IM
SPROSS
DER
MAISKEIMLINGE
.
77
4.7
ELEMENTVERTEILUNG
IN
WURZELQUERSCHNITTEN
VON
MAIS
.
78
4.7.1
UNTERSUCHUNGEN
AM
RASTERELEKTRONENMIKROSKOP
MITTELS
EDX
.
78
4.7.2
UNTERSUCHUNGEN
VON
WURZELQUERSCHNITTEN
IM
TRANSMISSIONS
ELEKTRONENMIKROSKOP
MITTELS
EELS
.
80
5.
DISKUSSION
83
5.1
33
P-PHOSPHAT
UND
33
P-PHYTAT
IN
DER
RHIZOSPHAERE
VON
MAIS
.
83
5.2
REINIGUNG
DER
PHYTASEN
.
89
5.3
CHARAKTERISIERUNG
DER
PHYTASEN
.
90
PHYSIKALISCHE
EIGENSCHAFTEN
DER
PHYTASEN
.
90
KINETISCHE
EIGENSCHAFTEN
DER
PHYTASEN
.
91
LOKALISIERUNG
DER
PHYTASE
IN
DER
KEIMWURZEL
VON
MAIS
.
93
5.3
PHYTAT
IN
MAISWURZELN
.
94
6.
ZUSAMMENFASSUNG
99
LITERATURVERZEICHNIS
105
ANHANG
112 |
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