Expression heterologer Gene in Physcomitrella patens (Hedw.) B.S.G.:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
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| Veröffentlicht: |
1994
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INHALTSVERZEICHNIS
INHALTSVERZEICHNIS
ABKORZUNGSVERZEICHNIS
4
ZUSAMMENFASSUNG
5
1.
EINLEITUNG
7
2.
MATERIAL
UND
METHODEN
15
2.1.
CHEMIKALIEN
15
2.2.
PFLANZENMATERIAL
15
2.3.
KULTUR
VON
PHYSCOMITRELLA
PATENS
17
2.3.1.
KULTUR
IM
3
1-GLASRUNDKOLBEN
17
2.3.2.
FERMENTERKULTUR
19
2.3.3.
GAMETANGIENINDUKTION
UND
SPORENAUSSAAT
21
2.4.
BAKTERIEN
UND
PLASMIDE
22
2.5.
TRANSFORMATION
VON
PHYSCOMITRELLAPATENS
25
2.5.1.
AGROINOKULATION
25
2.5.2.
PEG-VERMITTELTER
DIREKTER
DNA-TRANSFER
IN
PROTOPLASTEN
26
2.6.
ISOLIERUNG
VON
NUKLEINSAEUREN
AUS
PHYSCOMITRELLA
PATENS
28
2.6.1.
ISOLIERUNG
VON
DNA
28
2.6.2.
ISOLIERUNG
VON
RNA
28
2.7.
HYBRIDISIERUNGEN
28
2.7.1.
SOUTHERN-HYBRIDISIERUNG
28
2.7.2.
NORTHERN-HYBRIDISIERUNG
29
2.8.
BESTIMMUNG
DER
SS-GLUCURONIDASEAKTIVITAET
29
2.9.
BESTIMMUNG
DER
ENDOGENEN
PHYTOHORMONGEHALTE
30
2.9.1.
EXTRAKTION
DER
PHYTOHORMONE
31
2.9.2.
ELISA
VON
PHYTOHORMONEN
32
2.10.
BESTIMMUNG
DES
PROTEINGEHALTES
33
2.11.
BESTIMMUNG
DES
CHLOROPHYLLGEHALTES
33
INHALTSVERZEICHNIS
3.
ERGEBNISSE
34
3.1.
AGROINOKULATION
34
3.1.1.
BLATTSCHEIBEN
34
3.1.2.
PROTOPLASTEN
37
3.1.3.
PROTONEMEN
AUS
FLUESSIGKULTUR
39
3.2.
POLYETHYLENGLYCOL-VERMITTELTER
DNA-TRANSFER
IN
PROTOPLASTEN
43
3.2.1.
ANALYSE
DER
TRANSFORMANDEN
MIT
DEM
PLASMID
P35SGUS
46
3.2.2.
ANALYSE
DER
TRANSFORMANDEN
MIT
DEM
PLASMID
PGL2HPT
56
3.2.3.
ANALYSE
DER
TRANSFORMANDEN
MIT
DEM
PLASMID
PSR8-3LYS
60
3.2.4.
ANALYSE
DER
TRANSFORMANDEN
MIT
DEM
PLASMID
PIPT
66
3.2.5.
VERGLEICH
DER
TRANSFORMATIONSRATEN
80
3.3.
PRODUKTION
HETEROLOGER
PROTEINE
IN
FLUESSIGKULTUREN
81
3.3.1.
PROTONEMAENTWICKLUNG
82
3.3.2.
ENTWICKLUNG
DER
BIOMASSE
84
3.3.3.
PRODUKTION
DER
SS-GLUCURONIDASE
85
4.
DISKUSSION
87
4.1.
AGROINOKULATION
VON
PHYSCOMITRELLA
PATENS
87
4.2.
POLYETHYLENGLYCOL-VERMITTELTER
DIREKTER
DNA-TRANSFER
IN
PROTOPLASTEN
93
4.3.
PRODUKTION
HETEROLOGER
PROTEINE
IN
FLUESSIGKULTUREN
103
4.4.
WEITERFUEHRENDE
UNTERSUCHUNGEN
105
5.
LITERATURVERZEICHNIS
108 |
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