Untersuchungen zur Bildung von Tight Junctions am Beispiel der Colon-Adenocarcinom-Zellinie HT29:
Gespeichert in:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
1989
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IV
INHALTSVERZEICHNIS
VERZEICHNIS
DER
ABBILDUNGEN
UND
TABELLEN
.
VIII
VERZEICHNIS
DER
ABKUERZUNGEN
.
XII
A
EINLEITUNG
1.
TIGHT
JUNCTIONS
.
1
1.1
STRUKTUR
.
1
1.1.1
MORPHOLOGIE
.
3
1.1.2
VORKOMMEN
UND
TOPOLOGIE
.
4
1.1.3
MOLEKULARER
AUFBAU
.
8
1.2
FUNKTION
.
11
1.2.1
TJ
ALS
PERMEABILITATSBARRIERE
.
11
1.2.2
TJ
ALS
KOMPARTIMENTIERUNGSHILFE
VON
MEMBRANDOMAENEN
.
13
1.2.3
TJ
ZUR
STEIGERUNG
DER
ZELLKOHAESION
.
15
1.2.4
TJ
ALS
RICHTSCHNUR
BEI
PLATZWECHSELVORGAENGEN
IN
GEWEBEN
.
16
1.3
REGULATION
UND
METABOLISCHE
WECHSELWIRKUNGEN
.
17
1.3.1
BILDUNG
VON
TJ
.
17
1.3.2
ABBAU
VON
TJ
.
23
2.
ADENOCARCINOM
HT29
.
24
2.1
CHARAKTERISIERUNG
DER
ZELLINIE
.
24
2.2
HT29
UND
ABGELEITETE
KLONE
.
27
2.3
HT29
UND
ZELLDIFFERENZIERUNG
.
28
2.4
HT29
ZELLEN
UND
TJ
.
29
B
EXPERIMENTELLER
TEIL
3.
MATERIALIEN
.
31
3.1
GERAETE
.
31
3.2
CHEMIKALIEN
UND
REAGENZIEN
.
32
3.3
ZELLEN
.
32
3.4
ZELLKULTURARTIKEL
UND
MEDIEN
.
33
V
4.
METHODEN
.
34
4.1
ZELLKULTURVERFAHREN
.
34
4.1.1
ZELLPASSAGE
.
34
4.1.2
STANDARDKULTURBEDINGUNGEN
.
34
4.1.3
ZELLZAHLBESTIMMUNG
.
35
4.1.4
VITALITAETSPRUEFUNGEN
.
35
4.1.5
MYKOPLASMENTEST
.
36
4.1.6
ZELLKLONIERUNG
.
37
4.1.7
WACHSTUMSKURVE
.
38
4.1.8
ANZUCHT
AUF
VISKING-FOLIEN
.
38
4.2
NUCLEOTIDBESTIMMUNG
.
39
4.2.1
NUCLEOTIDEXTRAKTION
.
40
4.2.2
BIOLUMINOMETRISCHE
ATP-BESTIMMUNG
.
40
4.2.3
BESTIMMUNG
VON
AMP
UND
ADP
.
41
4.3
PROTEINBESTIMMUNG
.
43
4.4
MIKROSKOPISCHE
VERFAHREN
.
44
4.4.1
LICHTMIKROSKOPIE
.
44
4.4.2
RASTERELEKTRONENMIKROSKOPIE
.
44
4.4.3
TRANSMISSIONSELEKTRONENMIKROSKOPIE
.
45
4.4.4
FOTOGRAFISCHE
DOKUMENTATION
.
45
4.5
GEFRIERBRUCHPRAEPARATION
.
46
4.6
QUANTIFIZIERUNNG
VON
TJ
.
47
4.6.1
ZAEHLMETHODE
.
47
4.6.2
MORPHOMETRIE
.
47
4.7
ZELLFRAKTIONIERUNG
.
48
4.7.1
ZELLAUFSCHLUSS
.
48
4.7.2
ANREICHERUNG
VON
PLASMAMEMBRANSTUECKEN
.
50
4.7.3
DICHTEBESTIMMUNG
DES
PERCOLL-GRADIENTEN
.
50
4.8
ENZYMTESTS
.
51
4.9
ANTI-HT29-ANTIKOERPER
.
54
C
ERGEBNISSE
5.
INDUKTION
VON
TJ
DURCH
HYPERTONE
LOESUNGEN
VON
SALZEN
UND
NICHT-ELEKTROLYTEN
.
58
5.1
INDUKTION
VON
TJ
DURCH
MANNIT,
ARABINOSE
UND
SACCHAROSE
.
58
5.2
INDUKTION
VON
TJ
DURCH
HYPERTONE
SALZE
.
60
5.2.1
INDUKTION
DURCH
ALKALI-UND
AMMONIUMSALZE
.
61
VI
5.2.2
INDUKTION
DURCH
CACL
2
UND
MGCL
2
.
67
5.3
ZELLWACHSTUM
IN
NA
2
SO
4
UND
NA-CITRAT
.
69
5.4
HEMMUNG
DER
(NH^SC^-INDUKTION
DURCH
AMINOSAEUREN
.
73
6.
EINFLUSS
METABOLISCHER
INHIBITOREN
AUF
DIE
TJ-BILDUNG
.
76
6.1
WIRKUNGEN
AUF
DEN
ENERGIESTOFFWECHSEL
.
77
6.1.1
ATP-GEHALT
UNTER
VERSCHIEDENEN
INHIBITOREN
.
77
6.1.2
"ENERGY
CHARGE
"
.
87
6.2
EINFLUSS
AUF
DIE
ZELLVITALITAET
.
90
6.3
TJ-BILDUNG
.
96
6.3.1
INDUKTION
MIT
TRYPSIN
.
96
6.3.2
KINETIK
DER
TRYPSIN-INDUKTION
.
106
6.3.3
INDUKTION
MIT
(NH
4
)
2
SO
4
.
109
6.3.4
TRENNUNG
VON
INDUKTION
UND
EXPRESSION
.
111
7.
ZELLWACHSTUM
AUF
SEMIPERMEABLEM
SUBSTRAT
.
113
7.1
VERSUCHSANORDNUNG
.
113
7.2
WACHSTUMSVERHALTEN
VON
HT29
ZELLEN
.
113
8.
KLONIERUNG
DER
HT29
ZELLINIE
.
121
8.1
KLONHT29-B3
.
122
8.2
KLON
HT29-D5
.
125
9.
TJ-BILDUNG
IN
GEGENWART
VON
ANTI-HT29-ANTISERUM
.
128
9.1
ANREICHERUNG
VON
PLASMAMEMBRANEN
AUS
HT29
ZELLEN
.
128
9.2
GEWINNUNG
VON
ANTI-HT29-ANTISERUM
.
133
9.2.1
NACHWEIS
VON
ANTI-HT29-ANTIKOERPERN
.
133
9.3
EXPRESSION
VON
TJ
IN
GEGENWART
DES
ANTISERUMS
.
135
9.4
NACHWEIS
VON
TJ
IN
FRAGMENTIERTEN
HT29
ZELLEN
.
136
D
DISKUSSION
10.1
ZUR
SALZINDUKTION
.
139
10.2
ZUR
ENERGIEABHAENGIGKEIT
DER
TJ-BILDUNG
.
144
10.3
ZUM
ZELLWACHSTUM
AUF
FOLIE
.
149
10.4
ZUR
KLONIERUNG
DER
HT29
ZELLINIE
.
151
VN
E
ZUSAMMENFASSUNG
F
ANHANG
11.
11.1
11.2
ZAEHLSTATISTIK
ZUR
QUANTIFIZIERUNG
DER
TJ-INDUKTION
.
154
MITTELWERT-VERTEILUNG
UND-ENTWICKLUNG
.
154
VERTRAUENSGRENZEN
UND
STICHPROBENUMFANG
.
160
G
LITERATURVERZEICHNIS |
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