Redoxkontrolle der Plasmalemma-H + -ATPase:
Gespeichert in:
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| Format: | Abschlussarbeit Mikrofilm Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
1993
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| Ausgabe: | [Mikrofiche-Ausg.] |
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| Online-Zugang: | Inhaltsverzeichnis |
| Beschreibung: | 125 Bl. Ill., graph. Darst. |
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INHALTSVERZEICHNIS
ABKUERZUNGEN
1. EINLEITUNG.1
1.1 DIE PLASMALEMMA-H
+-ATPASE.1
1.2 REGULATION VON ENZYMAKTIVITAETEN UEBER THIOLMODULATION.2
1.3 ZIEL DER ARBEIT.6
2. MATERIAL UND METHODEN.8
2.1 ANZUCHT.8
2.2 PRAEPARATION DER PLASMALEMMA-VESIKEL.8
2.2.1 HOMOGENISIERUNG UND DIFFERENTIELLE ZENTRIFUGATION.8
2.2.2 WAESSRIGE ZWEIPHASENTRENNUNG.9
2.2.3 TRENNUNG UEBER EINEN DISKONTINUIERLICHEN
SACCHAROSE-GRADIENTEN.13
2.3 PROTEINBESTIMMUNGEN.14
2.3.1 PROTEINBESTIMMUNG NACH PETERSON.14
2.3.2 PROTEINBESTIMMUNG NACH BRADFORD.15
2.4 BESTIMMUNG DER ATP-HYDROLYSE-AKTIVITAET.16
2.4.1 STANDARDREAKTIONSANSATZ UND EINSATZ VON INHIBITOREN.16
2.4.2 ABHAENGIGKEIT DER ATP-HYDROLYSE
VON DER BRIJ 58-KONZENTRATION.18
2.5 CHARAKTERISIERUNG ANHAND WEITERER MARKERENZYME.19
2.5.1 NADPH-CYTOCHROM C-REDUKTASE.19
2.5.2 CYTOCHROM C-OXIDASE.19
*
2.6 SOLUBILISIERUNG DER PLASMALEMMA-H
+-ATPASE.20
2.7 PARTIELLE REINIGUNG DER PLASMALEMMA-H+-ATPASE.22
2.8 SDS-POLYACRYLAMID-GELELEKTROPHORESE.24
2.9 SILBERFAERBUNG.29
2.10 IMMUNOLOGISCHER NACHWEIS DER PLASMALEMMA-
H+-ATPASE.29
2.10.1 IMMUNOBLOT.29
2.10.2 IMMUNFAELLUNG.33
2.11 BESTIMMUNG DER PROTONENTRANSPORT-AKTIVITAET.35
2.12 NACHWEIS ESSENTIELLER SULFHYDRYLGRUPPEN
DER PLASMALEMMA-H
+-ATPASE.36
2.12.1 HEMMUNG DURCH NEM.36
2.12.2 HEMMUNG DURCH PCMBS.38
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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2.13 OXIDATION UND REDUKTION DER ESSENTIELLEN SH-GRUPPEN
DER PLASMALEMMA-H
+-ATPASE.40
2.13.1 EINFLUSS VON DTNB.40
2.13.2 EINFLUSS VON LUFTSAUERSTOFF.42
2.13.3 EINFLUSS VON DITHIOTHREITOL.42
2.13.4 EINFLUSS VON REDUZIERTEM GLUTATHION.42
2.14 ERFASSUNG VON REAKTIONSKINETIKEN.43
2.14.1 REAKTIONSKINETIK IN GEGENWART VON GLUTATHION.43
2.14.2 REAKTIONSKINETIK IN GEGENWART VON DTNB.43
2.15 CHEMIKALIEN.44
3. ERGEBNISSE.46
3.1 OPTIMIERUNG DER REINIGUNG VON PLASMALEMMA-VESIKELN.
DURCH DIE ZWEIPHASENTRENNUNG.46
3.2 ABHAENGIGKEIT DER ATP-HYDROLYSE-AKTIVITAET VON DER .
BRIJ 58-KONZENTRATION.48
3.3 SOLUBILISIERUNG DER PLASMALEMMA-H
+-ATPASE.50
3.3.1 PROTEINBILANZ UND AKTIVITAETEN NACH DER VORSOLUBILISIERUNG. 50
3.3.2 PROTEINGEHALTE, AKTIVITAETEN UND PROTEINVERTEILUNG
IM VERLAUF DER SOLUBILISIERUNG.52
3.4 PARTIELLE REINIGUNG DER PLASMALEMMA-H
+-ATPASE.59
3.5 IMMUNOLOGISCHER NACHWEIS DER PLASMALEMMA-
H
+-ATPASE.61
3.5.1 IMMUNOBLOT.61
3.5.2 IMMUNFAELLUNG.63
3.6 NACHWEIS ESSENTIELLER SH-GRUPPEN DER
PLASMALEMMA-H
+-ATPASE.65
3.6.1 HEMMUNG DURCH NEM.65
3.6.2 HEMMUNG DURCH PCMBS. 72
3.6.3 ZUSAMMENFASSUNG DER WIRKUNG DER VERWENDETEN
SH-REAGENZIEN AUF DIE ATPASE-AKTIVITAET.80
3.7 OXIDATION UND REDUKTION DER ESSENTIELLEN SH-GRUPPEN
DER PLASMALEMMA-H
+-ATPASE.81
3.8 ERFASSUNG VON REAKTIONSKINETIKEN.88
3.8.1 REAKTIONSKINETIK IN GEGENWART VON GSH.88
3.8.2 REAKTIONSKINETIK IN GEGENWART VON DTNB.92
4. DISKUSSION.95
4.1. OPTIMIERUNG DER ZWEIPHASENTRENNUNG UND CHARAKTERISIERUNG
DER PLASMALEMMA-FRAKTIONEN.95
4.2 SOLUBILISIERUNG UND PARTIELLE REINIGUNG
DER PLASMALEMMA-H+-AETPASE .96
4.3 IMMUNOLOGISCHER NACHWEIS DER PLASMALEMMA-
H
+-ATPASE.99
4.4 NACHWEIS ESSENTIELLER SH-GRUPPEN
DER PLASMALEMMA-H+-ATPASE.101
4.5 REDOXKONTROLLE DER PLASMALEMMA-H+-ATPASE.107
5. ZUSAMMENFASSUNG.112
6. LITERATURVERZEICHNIS
113 |
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