Die Enzyme der alternativen mitochondrialen Atmungskette in Ascomyceten:
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INHALTSVERZEICHNIS
ZUSAMMENFASSUNG
5
1.
EINLEITUNG
7
1.1.
DER
MITOCHONDRIALE
ELEKTRONENTRANSPORT
IN
EUKARYONTEN
7
1.1.1.
ENERGIEKONSERVIERENDER
ELEKTRONENTRANSPORT
7
1.1.2.
NICHT-ENERGIEKONSERVIERENDER
ELEKTRONENTRANSPORT
12
NICHT-ENERGIEKONSERVIERENDE
NADFPJH-DEHYDROGENASEN
12
NICHT-ENERGIEKONSERVIERENDE
UHICHINOL-OXIDASEN
16
1.2.
DER
ELEKTRONENTRANSPORT
IN
PROKARYONTEN
17
1.3.
DIE
FUNKTION
DES
NICHT-ENERGIEKONSERVIERENDEN
ELEKTRONEN
TRANSPORTS
19
1.4.
ZIEL
DER
ARBEIT
20
2.
MATERIAL
UND
METHODEN
21
2.1.
ANZUCHT
VON
NEUROSPORA
CRASSA
UND
SORDARIA
FIMICOLA
21
2.2.
ISOLIERUNG
VON
MITOCHONDRIENMEMBRANEN
AUS
MIT
CHLORAMPHENICOL
ANGEZOGENEN
HYPHEN
22
2.3.
VERSUCHE
ZUR
SOLUBILISIERUNG
DER
ALTERNATIVEN
OXIDASEAKTIVITAET
22
2.4.
ISOLIERUNG
DER
ALTERNATIVEN
NADH-DEHYDROGENASE
AUS
MITOCHONDRIENMEMBRANEN
24
2.5.
ISOLIERUNG
DER
DIHYDROLIPONAMID-DEHYDROGENASE
AUS
MITOCHON
DRIENMEMBRANEN
27
2.6.
BESTIMMUNG
DER
AMINOSAEURESEQUENZ
DURCH
EDMAN-ABBAU
28
2.7.
BROMCYAN-SPALTUNG
29
2.8.
IMMUNOLOGISCHE
METHODEN
29
2.9.
VERSCHIEDENE
PRAEPARATIVE
METHODEN
30
REDUKTION
DER
CHINONE
30
HERSTELLUNG
EINER
PHOSPHOLIPID-LOESUNG
31
SYNTHESE
VON
D,
L-DIHYDROLIPONAMID
31
2.10.
VERSCHIEDENE
ENZYMATISCHE
ANALYSEN
32
AKTIVITAETSMESSUNGEN
MIT
DER
SAUERSTOFFELEKTRODE
32
PHOTOMETRISCHE
AKTIVITAETSMESSUNGEN
32
2.11.
VERSCHIEDENE
ANDERE
ANALYTISCHE
METHODEN
34
LICHTAHSORPTIONSSPEKTREN
34
PROTEINBESTIMMUNG
34
SDS-POLYACRYLAMID-GELELEKTROPHORESE
(SDS-PAGE)
34
3.
ERGEBNISSE 35
3.1.
ATMUNGSAKTIVITAETEN
VON
MITOCHONDRIEN
UND
MITOCHONDRIEN
MEMBRANEN
AUS
N.
CRASSA
UND
X.
JIMICOLA-HYPHEN,
DIE
MIT
CHLORAMPHENICOL
ANGEZOGEN
WURDEN
35
3.2.
EINFLUSS
VERSCHIEDENER
FAKTOREN
AUF
DIE
UBICHINOL-OXIDASE
35
3.3.
VERSUCHE
ZUR
SOLUBILISIERUNG
DER
ALTERNATIVEN
UBICHINOL-OXIDASE
38
3.4.
ISOLIERUNG
DER
ALTERNATIVEN
NADH-DEHYDROGENASE
45
3.5.
KINETISCHE
EIGENSCHAFTEN
DER
ISOLIERTEN
ALTERNATIVEN
NADH-DEHYDROGENASE
53
3.6.
REDOXGRUPPE
DER
ALTERNATIVEN
NADH-DEHYDROGENASE
54
3.7.
AMINOTERMINALE
SEQUENZ
DER
ALTERNATIVEN
NADH-DEHYDROGENASE
56
3.8.
BROMCYAN-SPALTUNG
59
3.9.
WESTEM-BLOT
-
ANALYSE
60
3.10.
VERSUCH
DER
IMMUNPRAEZIPITATION
DER
ALTERNATIVEN
NADH-DEHYDROGENASE
62
4.
DISKUSSION
63
4.1.
VERSUCHE
ZUR
SOLUBILISIERUNG
DER
ALTERNATIVEN
UBICHINOL-OXIDASE
AUS
SORDARIA
FIMICOLA
63
4.2.
4.3.
4.4.
ISOLIERUNG
DER
ALTERNATIVEN
NADH-DEHYDROGENASE
67
CHARAKTERISIERUNG
DES
ENZYMS
MIT
NADH/Q
2
-
REDUKTASEAKTIVITAET
69
AUSBLICK
72
5.
LITERATURVERZEICHNIS
75 |
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