Untersuchungen zur BiP-Interaktion, Kettenassoziation und Degradation leichter Ketten von Immunglobulinen:
Gespeichert in:
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
1994
|
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| Beschreibung: | Köln, Univ., Diss., 1994 |
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INHALTSVERZEICHNIS
A.
EINLEITUNG
.
1
A.I
BIP
-
EINE
ALLGEMEINE
EINFUEHRUNG
.
1
A.II
BIP-LIGANDEN-INTERAKTION
.
2
A.IN
PRAE-GOLGI-DEGRADATION
.
8
A.IV
PROBLEMSTELLUNG
DER
ARBEIT
.
11
B.
MATERIAL
UND
METHODEN
.
15
B.I
CHEMIKALIEN,
RADIOCHEMIKALIEN
UND
ENZYME
.
15
B.N
METHODEN
IM
UMGANG
MIT
BAKTERIEN
.
19
B.II.L
BAKTERIEN
.
19
B.II.2
BAKTERIENKULTIVIERUNG
.
19
B.N.3
HERSTELLUNG
KOMPETENTER
BAKTERIEN
.
20
B.N.4
TRANSFORMATION
VON
BAKTERIEN
MIT
PLASMID-DNA
.
21
B.HI
MOLEKULARBIOLOGISCHE
METHODEN
.
21
B.IH.L
VERWENDETE
KLONIERUNGS-UND
EXPRESSIONSVEKTOREN
.
21
B.M.2
BEHANDLUNG
VON
PLASMID-DNA
MIT
RESTRIKTIONSENZYMEN
.
23
B.HI.3
GELELEKTROPHORETISCHE
TRENNUNG,
ISOLIERUNG
UND
REINIGUNG
VON
DNA-FRAGMENTEN
.
24
B.M.4
VERKNUEPFUNG
VON
DNA
IN
VITRO
.
25
B.HI.5
PLASMID-PRAEPARATION
AUS
BAKTERIENKULTUREN
.
25
B.HI.6
ANALYTISCHE
PLASMID-PRAEPARATION
.
26
B.M.7
KONSTRUKTION
VON
IG-EXPRESSIONSVEKTOREN
.
27
B.TV
METHODEN
IM
UMGANG
MIT
ZELLEN
.
30
B.IV.L
ZELLINIEN
.
30
B.IV.2
KULTIVIERUNG
UND
AUFBEWAHRUNG
VON
ZELLEN
.
32
B.IV.3
TRANSFEKTION
VON
ZELLEN
.
33
B.IV.4
SELEKTION
STABILER
TRANSFEKTANDEN
.
33
B.V
BIOCHEMISCHE
METHODEN
.
34
B.V.L
IMMUNFLUORESZENZANALYSE
.
34
B.V.
1.1
CYTOPLASMATISCHE
ANFAERBUNG
ETHANOL-EISESSIG-FIXIERTER
ZELLEN
.
34
B.V.1.2
CYTOPLASMATISCHE
ANFAERBUNG
FORMALDEHYD-FIXIERTER
ZELLEN
.
35
B.V.1.3
SPEZIFISCHE
ANFAERBUNG
DES
ENDOPLASMATISCHEN
RETIKULUMS
MIT
DEM
FLUORESZENZFARBSTOFF
DIOC
6
(3)
(3,3
'
-DIHEXYLOXACARBOCYANINIODID)
.
36
B.V.2
CYTOMORPHOLOGISCHE
CYCLOHEXIMID-CHASE-ANALYSE
.
36
B.V.3
BIOSYNTHETISCHE
MARKIERUNG
MIT
33
S-METHIONIN
UND
HERSTELLUNG
VON
ZELL-LYSATEN
.
37
B.V.4
PULSE-CHASE-EXPERIMENTE
.
38
B.V.5
IMMUNPRAEZIPITATION
.
38
B.V.6
AUFTRENNUNG
VON
PROTEINEN
IN
SDS-POLYACRYLAMIDGELEN
.
40
B.V.7
COOMASSIEFAERBUNG,
SENSIBILISIERUNG
UND
FLUOROGRAPHIE
VON
SDS-GELEN
.
40
B.V.8
WESTEMBLOTANALYSE
.
41
B.V.9
ANALYTISCHE
GELFILTRATION
.
42
B.V.10
CROSS-LINK
VON
PROTEINEN
MIT
DSP
(DITHIOWS(SUCCINIMIDYLPROPIONAT))
.
43
C.
ERGEBNISSE
.
44
C.I
CHARAKTERISIERUNG
DER
BIP-IGL-INTERAKTION
IN
IGL-SEZEMIERENDEN
UND
NICHT-SEZEMIERENDEN
ZELLINIEN
.
44
C.I.
1
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
INTERAKTION
VON
BIP
MIT
NICHT-SEZEMIERBAREN
IGL-KETTEN
DER
ZELLINIE
NS1
.
44
C.I.
2
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
INTERAKTION
VON
BIP
MIT
SEZEMIERBAREN
IGL-KETTEN
DER
ZELLINIE
J558L
.
52
C.I.3
NACHWEIS
DER
BIP-IGL-INTERAKTION
ALS
GENERELLES
PHAENOMEN
.
56
C.N
CHARAKTERISIERUNG
DES
BIP-IGL-KOMPLEXES
.
58
C.N.
1
BESTIMMUNG
DES
MOLEKULARGEWICHTS
DES
BIP-IGL-KOMPLEXES
UEBER
GELFILTRATIONSANALYSE
.
58
C.N.2
CHARAKTERISIERUNG
DER
MOLEKULAREN
ZUSAMMENSETZUNG
DES
BIP-IGL-KOMPLEXES
UEBER
CROSS-LINK-ANALYSE
.
60
C.II.3
ANALYSEN
ZUR
KONFORMATION
BIP-ASSOZIIERTER
IGL-KETTEN
.
63
C.IN
UNTERSUCHUNGEN
ZUM
ASSOZIATIONSVERHALTEN
SEZEMIERBARER
UND
NICHT-SEZEMIERBARER
IGL-KETTEN
.
69
C.NI.
1
NACHWEIS
KOVALENTER
UND
NICHT-KOVALENTER
IGL-DIMERE
IN
J558L
.
69
C.HI.2
ANALYSEN
ZUM
ASSOZIATIONSVERHALTEN
VON
IG-KETTEN
MIT
UNTERSCHIEDLICHEN
V-DOMAENEN
.
74
C.IV
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
DEGRADATION
NICHT-SEZEMIERBARER
IGL-KETTEN
.
80
C.IV.
1
CHARAKTERISIERUNG
DER
AN
DER
IGL-DEGRADATION
BETEILIGTEN
PROTEOLYTISCHEN
AKTIVITAET
.
80
C.IV.2
DEGRADATION
NICHT-SEZEMIERBARER
BIP-LIGANDEN
KORRELIERT
MIT
DER
DISSOZIATION
DES
BIP-LIGANDEN
KOMPLEXES
(CHARAKTERISIERUNG
DER
BIP-X
I
FS62-INTERAKTION)
.
82
C.IV.
3
SUBZELLULAERE
LOKALISIERUNG
DER
IGL-DEGRADATION
.
86
C.IV.
4
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
SUBSTRATSPEZIFITAET
DER
IGL-DEGRADATION
.
94
D.
DISKUSSION
.
99
D.I
BIP-IGL-INTERAKTION
.
99
D.N
ASSOZIATIONSVERHALTEN
SEZEMIERBARER
UND
NICHT-SEZEMIERBARER
IGL-KETTEN
.
103
D.M
ER-DEGRADATION
NICHT-SEZEMIERBARER
IGL-KETTEN:
BIP,
EIN
MOLEKULARES
BINDEGLIED
ZWISCHEN
FALTUNG
UND
ABBAU
.
108
E.
ZUSAMMENFASSUNG
.
113
F.
LITERATURVERZEICHNIS
.
115 |
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