Aktivierung von Rinderalveolarmakrophagen zur Freisetzung von reaktiven Sauerstoffintermediaten und Stickstoffmonoxid durch Feinstäube und metalloxid-beschichtete Partikel:
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Veröffentlicht: |
1993
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Beschreibung: | Hamburg, Univ., Diss., 1994 |
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INHALTSVERZEICHNIS
SEITE
1
EINLEITUNG
.
1
1
.
1
ALVEOLARMAKROPHAGEN
.
1
1
2
MECHANISMEN
DER
MAKROPHAGEN-VERMITTELTEN
ZYTOTOXIZITAET
.
.
2
1.2.1
PHAGOZYTOSE
UND
DEGRANULATION
.
2
1.2.2
NADPH-OXIDASE
.
2
1.2.3
NO-SYNTHASE
.
4
1
.3
SIGNALTRANSDUKTION
.
6
1
4
WIRKUNG
VON
STAEUBEN
AUF
DIE
LUNGE
.
7
2
PROBLEMSTELLUNG
.
11
3
MATERIAL
UND
METHODEN
.
13
3
.
1
STAEUBE
.
13
3.1.1
HERKUNFT
DER
STAEUBE
.
13
3.1.2
FRAKTIONIERUNG
.
14
3.1.3
CHARAKTERISIERUNG
DER
FEINFRAKTION
.
14
3
.
1
.
3
.
1
ELEMENTARANALYSE
.
14
3
1.3.2
MORPHOLOGIE
.
15
3.1.4
BESCHICHTUNG
EINES
KIESELGELSTAUBES
MIT
METALLOXIDEN
.
15
3
.
1
.
4.1
HERSTELLUNG
DER
METALLOXIDSCHICHT
.
15
3.
1.4.2
CHARAKTERISIERUNG
DER
BESCHICHTETEN
PARTIKELN
.
16
3.2
ZELLISOLIERUNG
.
17
3.2.1
HERKUNFT
DER
RINDERLUNGEN
.
17
3.2.2
DURCHFUEHRUNG
DER
LUNGENSPUELUNG
UND
REINIGUNG
DER
ZELLEN
.
1
7
3.2.3
ZELLCHARAKTERISIERUNG
UND
-VITALITAET
.
18
3.2
.
3
.
1
VITALITAETSBESTIMMUNG
.
18
3.2.3.2
CHARAKTERISIERUNG
DER
ALVEOLARMAKROPHAGEN
.
18
3.3
ZELLKULTUR
IN
MONOLAYERN
.
19
3.4
INKUBATIONEN
MIT
STAEUBEN
UND
SCHWERMETALLVERBINDUNGEN
.
.
19
3.5
BESTIMMUNGEN
DER
REAKTIVEN
SAUERSTOFFINTERMEDIATE
.
20
3.5.1
SUPEROXIDANIONEN
.
2
0
3.5.2
WASSERSTOFFPEROXID
.
20
3.5.3
HYDROXYLRADIKALE
.
21
SEITE
3
.
S
.
4
BILDUNG
VON
REAKTIVEN
SAUERSTOFFINTERMEDIATEN
IM
ZELLFREIEN
SYSTEM
.
21
3.6
DURCHFLUSSZYTOMETRIE
.
22
3.6.1
MESSUNG
DES
INTRAZELLULAEREN
CALCIUMSPIEGELS
.
2
3
3.6.2
MESSUNG
DES
ZYTOSOLISCHEN
PH-WERTES
.
2
4
3.6.3
MESSUNG
DES
MEMBRANPOTENTIALS
.
24
3.7
BESTIMMUNG
VON
NO
.
2
5
3.8
ELEKTRONENMIKROSKOPIE
.
2
5
3.9
PROTEINBESTIMMUNG
.
26
3.10
BESTIMMUNG
DER
LACTATDEHYDROGENASE
.
27
3.11
MATERIAL
.
28
3.11.1
CHEMIKALIEN
.
28
3.11.2
NAEHRMEDIEN
UND
PUFFER
.
29
3.11.3
GERAETE
.
29
4
ERGEBNISSE
.
31
4.1
CHARAKTERISIERUNG
DER
STAUBPROBEN
.
31
4.1.1
ELEMENTARANALYSE
.
31
4.1.2
RASTERELEKTRONENMIKROSKOPISCHE
UNTERSUCHUNG
DER
STAEUBE.
.
.
31
4.1.3
KORNGROESSENVERTEILUNG
.
35
4.1.4
BESCHICHTUNG
VON
KIESELGELPARTIKELN
.
37
4.1.4.1
MORPHOLOGIE
.
3
7
4.1.4.2
ELEMENTARANAIYSE
.
40
4.2
CHARAKTERISIERUNG
DER
ALVEOLARMAKROPHAGEN
.
42
4.3
KONTROLLE
DER
PHAGOZYTOSELEISTUNG
.
42
4.4
OPTIMIERUNG
DER
ZELLKULTUR
.
46
4.5
AUSWIRKUNG
DER
INKUBATION
DER
ALVEOLARMAKROPHAGEN
MIT
STAEUBEN
AUF
DIE
ZELLFORM
UND
-VITALITAET
.
47
4.5.1
VERAENDERUNG
DER
VITALITAET
.
47
4.5.2
MORPHOLOGISCHE
VERAENDERUNGEN
.
48
4.6
SEKRETION
VON
REAKTIVEN
SAUERSTOFFINTERMEDIATEN
NACH
STAUB
STIMULATION
.
54
4.6.1
ABHAENGIGKEIT
VON
DER
STAUBKONZENTRATION
.
54
4.6.2
ZEITABHAENGIGKEIT
.
58
4.6.3
LINEARE
REGRESSION
.
60
4.6.4
FREISETZUNG
DER
REAKTIVEN
SAUERSTOFFINTERMEDIATE
NACH
STI
MULATION
MIT
DEN
METALLOXID-BESCHICHTETEN
STAEUBEN
.
62
4.6.5
STAUBKATALYSIERTE
BILDUNG
VON
HYDROXYLRADIKALEN
.
64
SEITE
4.7
INKUBATION
MIT
METALLVERBINDUNGEN
UND
QUARZSTAUB
.
66
4.7.1
EISEN
.
66
4.7.2
VANADIUM
.
67
4.7.3
ARSEN
.
68
4.7.4
CADMIUM
.
68
4.7.5
NICKEL
.
69
4.7.6
CER
.
70
4.8
CA
2+
-
UND
MG
2+
-ABHAENGIGKEIT
DER
STIMULATION
DER
NADPH-OXIDASE
.
71
4.9
DURCHFLUSSZYTOMETRISCHE
MESSUNGEN
.
72
4.9.1
VERAENDERUNGEN
DES
ZYTOSOLISCHEN
CA
2+
-SPIEGELS
NACH
STIMULATION
MIT
STAEUBEN
.
72
4.9.2
DER
INTRAZELLULAERE
PH-WERT
NACH
STAUBINKUBATION
.
76
4.9.3
STAUBINDUZIERTE
VERAENDERUNGEN
IM
MEMBRANPOTENTIAL
.
82
4.9.4
DER
EINFLUSS
VON
GELOESTEM
VANADIUM(IV)
ODER
-(V)
AUF
DIE
CALCIUMANTWORT
NACH
QUARZSTIMULATION
.
84
4.9.5
UNTERSUCHUNG
DER
ZYTOSOLISCHEN
PARAMETER
NACH
INKUBATION
MIT
METALLOXID-BESCHICHTETEN
PARTIKELN
.
86
4.10
EINFLUSS
DER
OBERFLAECHENBEHANDLUNG
VON
QUARZSTAUB
AUF
DIE
STIMULATION
VON
ALVEOLARMAKROPHAGEN
.
90
4.11
VERAENDERUNG
DER
NO-SYNTHESE
NACH
INKUBATION
MIT
SCHWERMETALLHALTIGEN
STAEUBEN
.
93
4.11.1
BASISAKTIVITAET
DER
NO-SYNTHASE
.
93
4.11.2
EINFLUSS
VON
SCHWERMETALLHALTIGEN
STAEUBEN
.
94
4.11.3
LINEARE
REGRESSION
.
97
S
DISKUSSION
.
98
5
.
1
STAUBINDUZIERTE
BILDUNG
VON
REAKTIVEN
SAUERSTOFFINTER
MEDIATEN
.
98
5.2
DURCHFLUSSZYTOMETRIE
.
109
5.3
VERAENDERUNG
DER
NO-BLLDUNG
NACH
STAUBEXPOSITION
.
117
6
ZUSAMMENFASSUNG.
119
7
LITERATURVERZEICHNIS
.
123 |
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