HLA-Assoziation der rezidivierenden Polychondritis:
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
1994
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| Beschreibung: | Freiburg (Breisgau), Univ., Diss., 1994 (Nicht für den Austausch) |
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GLIEDERUNG
1.
EINLEITUNG
6
1.1
DIE
REZIDIVIERENDE
POLYCHONDRITIS
6
1.2
DAS
MHC-SYSTEM
10
1.2.1
GENORGANISATION
DES
MENSCHLICHEN
MHC
10
1.2.2
STRUKTUR
VON
MHC-I
UND
II
11
1.2.3
ALLELER
POLYMORPHISMUS
DER
HLA-II-REGION
13
1.2.4
FUNKTION
DER
HLA-MOLEKUELE
14
1.2.5
HLA
ASSOZIATION
UND
KRANKHEIT
16
2.
FAGESTELLUNG
18
3.
PERSONEN,
MATERIAL
UND
METHODEN
19
3.1
AUSGEWAEHLTE
PERSONEN
19
3.2
ANLEGEN
VON
EBV-TRANSFORMIERTEN
B-ZELLINIEN
19
3.2.1
LOESUNGEN
20
3.2.2
ISOLIERUNG
VON
MONOZYTEN
20
3.2.3
ISOLIERUNG
DER
B-ZELL-FRAKTION
21
3.2.4
IMMORTALISIERUNG
DER
B-LYMPHOZYTEN
21
3.3
METHODE
I:
RADIOAKTIVE
OLIGONUKLEOTIDHYBRIDISIERUNG
DER
3.
HVR
DES
DRBL-GENS
NACH
PCR-AMPLIFIKATION
22
3.3.1
DNA-EXTRAKTION
22
3.3.1.1
LOESUNGEN
22
3.3.1.2
ISOLIERUNG
VON
LYMPHOZYTEN
23
3.3.1.3
LYSIEREN
DER
ZELLEN
23
3.3.2
POLYMERASE-KETTEN-REAKTION
(PCR)
24
3.3.2.1
LOESUNGEN,
ENZYME
24
3.3.2.2
REAKTIONSANSATZ
25
3.3.2.3
PCR
25
3.3.3
SOUTHERN-BLOT
26
3.3.3.1
LOESUNGEN
UND
MATERIALIEN
26
3.3.3.2
SOUTHERN-BLOT
26
3.3.4
RADIOAKTIVE
OLIGONUKLEOTIDHYBRIDISIERUNG
29
3.3.4.1
LOESUNGEN
UND
ENZYME
30
3.3.4.2
PRAEHYBRIDISIERUNG
32
3.3.4.3
RADIOAKTIVE
MARKIERUNG
DER
OLIGONUKLEOTID-PROBE
32
3.4
METHODE
II:
SEQUENZIEREN
DES
2.
EXONS
DES
DRBL-GENS,
NACH
RNA-PCR
UND
ANSCHLIESSENDE
KLONIERUNG
DES
PCR-PRODUKTES
35
3.4.1
RNA-EXTRAKTION
35
3.4.1.1
LOESUNGEN
35
3.4.1.2
RNA-ISOLIERUNG
36
3.4.2
CDNA-SYNTHESE
UND
POLYMERASE-KETTEN-REAKTION
(PCR)
37
3.4.2.1
LOESUNGEN
UND
ENZYME
37
3.4.2.2
CDNA-SYNTHESE
38
3.4.2.3
PCR
39
3.4.3
ISOLIERUNG
DES
PCR-PRODUKTES
39
3.4.3.1
LOESUNGEN
39
3.4.3.2
ISOLIERUNG
DER
AMPLIFIZIERTEN
DNA
MIT
SPIN
X
39
3.4.4
KLONIERUNG
DER
PCR-PRODUKTE
40
3.4.4.1
ENZYME,
LOESUNGEN
UND
MEDIEN
40
3.4.4.2
RESTRIKTION
UND
LIGATION
43
3.4.4.3
TRANSFORMATION
VON
BAKTERIEN
44
3.4.5
PLASMID
PRAEPARATION
45
3.4.5.1
LOESUNGEN
45
3.4.5.2
PLASMID
PRAEPARATION
46
3.4.5.3
RESTRIKTIONSANALYSE
46
3.4.6
SEQUENZIEREN
47
3.4.6.1
MATERIAL
47
3.4.6.2
DENATURIEREN
VON
DOPPELSTRANG-DNA
47
3.4.6.3
SEQUENZIERREAKTION
48
3.4.6.4
POLYACRYLAMID-GEL-ELEKTROPHORESE
48
4.
ERGEBNISSE
49
4.1
UEBERSICHT
UEBER
DIE
TYPISIERTEN
PATIENTEN
49
4.2
HLA-DR-TYPISIERUNG
50
4.3
HLA-DRBRO4-SUBTYPISIERUNG
52
5.
DISKUSSION
55
5.1
HLA-ASSOZIATION
DER
RP
55
5.2
DRB1*
SUBTYPENVERTEILUNG
57
5.3
THEORIEN
ZUM
MECHANISMUS
DER
HLA-ASSOZIATION
MIT
AUTOIMMUNERKRANKUNGEN
60
5.3.1
DIE
THEORIE
DER
MOLEKULAREN
MIMIKRY
60
5.3.2
SPEZIFISCHE
ANTIGEN-PRAESENTATION
DURCH
HLA-MOLEKUELE
61
5.3.3
NICHT
DIE
GENE
DER
HLA-SUBREGION
SELBST,
SONDERN
DAMIT
GEKOPPELTE
GENE
SIND
FUER
DIE
KRANKHEITSENTSTEHUNG
VEANTWORTLI
62
5.3.4
THYMUSEDUKATION
VON
T-ZELLEN
63
5.4
POLYCHONDRITIS
ALS
IMMUNERKRANKUNG
64
6.
ZUSAMMENFASSUNG
66
7.
LITERATURVERZEICHNIS
68 |
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