15-Lipoxygenase-mRNS und Atheromatose im WHHL-Kaninchen: Untersuchung einer Antioxidantien-Therapie und HMG-CoA-Reductase-Hemmertherapie auf Atheromatose und 15-Lipoxygenase-mRNS im Atherom durch kompetitive PCR
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1993
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|---|---|
| adam_text | 3 D 386 15-LIPOXYGENASE-MRNS UND ATHEROMATOSE IM WHHL- KANINCHEN:
UNTERSUCHUNG EINER ANTIOXIDANTIEN- THERAPIE UND
HMG-COA-REDUCTASE-HEMMERTHERAPIE AUF ATHEROMATOSE UND
15-LIPOXYGENASE-MRNS IM ATHEROM DURCH KOMPETITVE PCR VOM FACHBEREICH
BIOLOGIE DER UNIVERSITAET KAISERSLAUTERN ZUR VERLEIHUNG DES AKADEMISCHEN
GRADES DOKTOR DER NATURWISSENSCHAFTEN 1 GENEHMIGTE DISSERTATION
VORGELEGT VON HEIKE LUKHAUP 7. MAI 1993 VORSITZENDER: 1.
BERICHTERSTATTER: 2. BERICHTERSTATTER: PROF. DR. H. ZANKL PROF. DR. E.A.
FRIEDRICH PD DR. DR. H.A. DRESEL - KAISERSLAUTERN 1993 -
INHALTSVERZEICHNIS SEITE ZUSAMMENFASSUNG 1 A EINLEITUNG 2 B MATERIAL 14
1. HERSTELLER, SUBSTANZEN UND CHEMIKALIEN 14 2. GERAETE 16 C METHODEN 17
1. LDL-PRAEPARATION 17 1.1 PRAEPARATION DES LDL DURCH SEQUENTIELLE
ULTRAZENTRIFUGATION 17 LDL AUS HUMANPLASMA 17 LDL AUS KANINCHENBLUT 17
CHARAKTERISIERUNG DES LDL 18 SDS-POLYACRYLAMID-GELELEKTROPHORESE 18
AGAROSEGELELEKTROPHORESE ZUR CHARAKTERISIERUNG VON LIPOPROTEINEN 19
PROTEINFAERBUNG MIT COOMASSIE BRILLIANT BLUE R 250 19 PROTEINFAERBUNG MIT
SILBERREAGENZ 19 PROTEINBESTIMMUNG 2 0 TIERHALTUNG, FUETTERUNG UND
TESTSUBSTANZEN 21 DAS WATANABE HERITABLE HYPERLIPIDEMIC (WHHL) KANINCHEN
21 2.2 TIERHALTUNG UND FUETTERUNG 21 2.3 TESTSUBSTANZEN 21 2.3.1 PROBUCOL
21 2.3.2 MEVINACOR 22 3 CHOLESTERINBESTIMMUNG 23 3.1 GEWEBECHOLESTERIN
23 3.2 SERUMCHOLESTERIN 23 1.1. 1.1. 1.2 1.2. 1.2, .1 .2. 1 .2 1.2.3
1.2. 1.2 2 2.1 4 .5 L 4 DNS-METHODEN 24 4.1 DNS-PRAEPARATION 2 4 4.1.1
KARTUSCHEN-METHODE (QIAGEN) 2 4 4.1.1.1 MAXI- PRAEPARATION VON
PLASMID-DNS (BIS ZU 500 UG DNS) 2 4 4.1.1.2 MINI-PRAEPARATION VON
PLASMID-DNS (BIS ZU 20 |IG DNS) 2 4 4.2 GELELEKTROPHORESE ZUR AUFTRENNNG
VON DNS 25 4.2.1 HORIZONTALE AGAROSEGELELEKTROPHORESE 25 4.2.2
VERTIKALELEKTROPHORESE - POLYACRYLAMIDGELE 2 5 4.3
DNS-FRAGMENTISOLIERUNG 25 4.4 DNS-SEQUENZIERUNG 26 4.4.1 HERSTELLEN DER
SEQUENZIERGELE 26 4.4.2 SEQUENZIERREAKTION 2 7 4.5 SUBKLONIERUNG VON
DNS-FRAGMENTEN 28 4.5.1 ANNEALING DER OLIGONUKLEOTIDE 2 8 4.5.2
KINASIERUNG DER OLIGONUKLEOTIDE 28 4.5.3 DEPHOSPHORYLIERUNG DES VEKTORS
2 8 4.5.4 LIGATION 29 4.5.5 TRANSFORMATION 2 9 5 RNS-METHODEN 30 5.1
RNS-PRAEPARATION 30 5.1.1 CSCL-GLEICHGEWICHTSZENTRIFUGATION 3 0 5.1.2
PHENOL-CHLOROFORM-METHODE (PROMEGA) 31 5.1.3 RNAZOL* B METHODE 3 2 5.1.4
QUANTITATIVE UND QUALITATIVE ANALYSE DER RNS 3 2 5.1.4.1 QUANTIFIZIERUNG
DER RNS DURCH BESTIMMUNG DER OD 3 2 5.1.4.2 ELEKTROPHORESE DER RNS IN
DENATURIERENDEM AGAROSE/ 3 3 FORMALDEHYDGEL 5.2 REVERSE TRANSKRIPTION 34
5.2.1 PRIMERWAHL FUER DIE REVERSE TRANSKRIPTION 3 4 5.2.2 REVERSE
TRANSKRIPTION 34 6 POLYMERASE CHAIN REACTION (PCR) 35 6.1 PCR-PARAMETER
35 6.2 PRIMERWAHL FUER DIE PCR 35 6.3 QUALITATIVE PCR 36 6.4 PRINZIP DER
KOMPETITIVEN PCR 36 6.4.1 AUSWERTUNG UND QUANTIFIZIERUNG DER
PCR-PRODUKTE 3 7 D ERGEBNISSE 38 1 DIE KOMPETITIVE PCR ZUR
QUANTIFIZIERUNG VON GAPDH UND 15-LIPOXYGENASE AUS GEWEBEPROBEN 38 1.1
PRAEPARATION DER INTERNEN STANDARDS 38 1.1.1
GLYCERINALDEHYD-3-PHOSPHAT-DEHYDROGENASE (GAPDH) AUS KANINCHEN 3 8 1.1.2
15-LIPOXYGENASE (15-LOX) AUS KANINCHEN 4 2 2 EVALUIERUNG DER OPTIMALEN
BEDINGUNGEN FUER DIE RNS-QUANTIFIZIERUNG DURCH KOMPETITIVE PCR 45 2.1
REVERSE TRANSKRIPTION 45 2.1.1 2.1.2 3 3.1 3.2 3.3 3.4 3.5
RNS-PRAEPARATION PRIMERWAHL FUER DIE REVERSE TRANSKRIPTION PCR
QUANTIFIZIERUNG VON CDNS DURCH KOMPETITIVE PCR DETEKTIONSSCHWELLE
EINFLUSS DER DELETION DES KOMPETITORS AUF DIE AMPLIFIKATIONSEFFIZIENZ IN
DER PCR REPRODUZIERBARKEIT DER KOMPETITIVEN PCR AMDLIFIKATIONSEFFIZIENZ
DER GAPDH- UND 15-LOX- 45 46 47 47 48 49 50 PRIMERPAARE 5 0 4
SERUMCHOLESTERIN, OXIDATION VON LDL, GEWEBE- CHOLESTERIN UND 15-LOX-MRNS
IN DER AORTA VON HYPERCHOLESTERINAEMISCHEN WHHL-KANINCHEN 52 4.1
CHARAKTERISTIK DER WHHL-KANINCHEN 52 4.1.1 SERUMCHOLESTERINBESTIMMUNG 52
4.1.2 LDL-OXIDATIONSKINETIKEN 5 4 4.2 15-LOX-MRNS IN VERSCHIEDENEN
GEWEBEN VON WHHL-KANINCHEN 57 5 RELATION ZWISCHEN SERUMCHOLESTERIN UND
AORTENBOGENCHOLESTERIN 59 6 RELATION ZWISCHEN SERUMCHOLESTERIN UND
CHOLESTERINGEHALT IN DER AORTA THORACICA 62 7 RELATION ZWISCHEN
15-LIPOXYGENASE, SERUM- CHOLESTERIN, AORTENBOGENCHOLESTERIN UND
CHOLESTERIN DER AORTA THORACALIS 64 E DISKUSSION 67 F
LITERATURVERZEICHNIS 76 G ABKUERZUNGEN 85 ANHANG
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| title_alt | Fünfzehn-Lipoxygenase-mRNS und Atheromatose im WHHL-Kaninchen |
| title_auth | 15-Lipoxygenase-mRNS und Atheromatose im WHHL-Kaninchen Untersuchung einer Antioxidantien-Therapie und HMG-CoA-Reductase-Hemmertherapie auf Atheromatose und 15-Lipoxygenase-mRNS im Atherom durch kompetitive PCR |
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| title_fullStr | 15-Lipoxygenase-mRNS und Atheromatose im WHHL-Kaninchen Untersuchung einer Antioxidantien-Therapie und HMG-CoA-Reductase-Hemmertherapie auf Atheromatose und 15-Lipoxygenase-mRNS im Atherom durch kompetitive PCR vorgelegt von Heike Lukhaup |
| title_full_unstemmed | 15-Lipoxygenase-mRNS und Atheromatose im WHHL-Kaninchen Untersuchung einer Antioxidantien-Therapie und HMG-CoA-Reductase-Hemmertherapie auf Atheromatose und 15-Lipoxygenase-mRNS im Atherom durch kompetitive PCR vorgelegt von Heike Lukhaup |
| title_short | 15-Lipoxygenase-mRNS und Atheromatose im WHHL-Kaninchen |
| title_sort | 15 lipoxygenase mrns und atheromatose im whhl kaninchen untersuchung einer antioxidantien therapie und hmg coa reductase hemmertherapie auf atheromatose und 15 lipoxygenase mrns im atherom durch kompetitive pcr |
| title_sub | Untersuchung einer Antioxidantien-Therapie und HMG-CoA-Reductase-Hemmertherapie auf Atheromatose und 15-Lipoxygenase-mRNS im Atherom durch kompetitive PCR |
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