Untersuchungen zur Bildung extrazellulärer polymerer Substanzen mit pathophysiologischer Bedeutung durch Pseudomonas syringae pv. phaseolicola unter besonderer Berücksichtigung extrazellulärer Lipopolysaccaride (LPS):
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| Sprache: | German |
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1993
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| Beschreibung: | Jena, Univ., Diss., 1993 |
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INHALTSVERZEICHNIS
1. EINLEITUNG.7
1.1. V ORBEMERKUNGEN.7
1.2. STAND DER FORSCHUNG.8
1.3. ZIELE DER ARBEIT.12
2. MATERIAL UND METHODEN.14
2.1. CHEMIKALIEN UND WASSER.14
2.2. BAKTERIENSTAEMME UND KULTURFUEHRUNG.14
2.2.1. BAKTERIENSTAEMME.14
2.2.2. STAMMHALTUNG.15
2.2.3. FLUESSIGKULTUR AUF ROTATIONSSCHRAETTLER.15
2.2.4. APPLIKATION VON RADIOAKTIV MARKIERTEN ZUCKERN.15
2.2.5. FERMENTERKULTUR.16
2.2.6. KULTIVIERUNG IN ANWESENHEIT VON CHLORAMPHENICOL.16
2.2.7. PROBENNAHME, ZELLEMTE.17
2.3. MESSUNG VON RADIOAKTIV MARKIERTEN PROBEN.18
2.4. PRAEPARATION UND ANALYSE DES HOCHMOLEKULAREN PRODUKTANTEILES.19
2.4.1. GELFILTRATION.19
2.4.2. DIALYSE.19
2.4.3. ULTRAFILTRATION.19
2.4.4. IONENAUSTAUSCHCHROMATOGRAPHIE.20
2.4.5. KOLORIMETRISCHE TESTS.20
2.4.5.1. PROTEIN.20
2.4.5.2. KETOSEN.21
2.4.5.3. URONSAEUREN. 21
2.4.5.4. DESOXYHEXOSEN.21
2.4.5.5. KDO.22
2.4.5.6. PHOSPHAT.22
2.4.5.7. LIPIDE.22
2.4.6. HYDROLYSE VON POLYSACCHARIDEN UND PAPIERCHROMATOGRAPHIE.23
2.4.7. NACHWEIS VON FRUCTOSE ALS BESTANDTEIL EXTRAZELLULAERER
POLYSACCHARIDE.23
2.5. PRAEPARATION UND ANALYSE VON LPS.24
2.5.1. IONENAUSTAUSCHCHROMATOGRAPHIE.24
2.5.2. ULTRAZENTRIFUGATION.24
2.5.3. PHENOL-WASSER-EXTRAKTION UND ENDREINIGUNG VON LPS.24
YY PRAEPARATION ZELLASSOZIIERTER LPS.24
YY PRAEPARATION EXTRAZELLULAERER LPS.25
YY
LPS-MINIPRAEPARATION.25
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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2.5.4. MILDE HYDROLYTISCHE SPALTUNG IN LIPID A UND
POLYSACCHARID-SEITENKETTEN.25
2.5.5. TOTALHYDROLYSE VON LPS.26
2.5.6. DUENNSCHICHTCHROMATOGRAPHIE.26
2.5.7. POLYACRYLAMID-GELELEKTROPHORESE.26
2.5.8. GASCHROMATOGRAPHIE.27
2.5.9. KEMMAGNETRESONANZ-SPEKTROSKOPIE (NMR).28
2.5.10. INFRAROT-SPEKTROSKOPIE.28
2.6. PRAEPARATION UND ANALYSE VON
OUTER MEMBRANE BLEBS
(MEMBRANVESIKEL).28
2.6.1. ISOLATION.28
2.6.2. BIOCHEMISCHE ANALYSE.29
2.6.3. ELEKTRONENMIKROSKOPIE.29
2.7. UNTERSUCHUNGEN AN PFLANZENZELLKULTUREN.30
2.7.1. STAEMME, NAEHRMEDIEN UND KULTURFUEHRUNG.30
2.7.2. APPLIKATION DER TESTSUBSTANZEN UND PROBENNAHMEN.31
2.7.3. BESTIMMUNG DER TROCKENMASSE.31
2.7.4. VITALITAETSTEST.31
2.7.5. BESTIMMUNG VON ENZYMAKTIVITAETEN.32
YY PHENYLALANIN-AMMONIUM-LYASE (PAL).32
YY POLYPHENOLOXIDASE (PPO).32
YY PEROXIDASE (PERO).33
2.7.6. BESTIMMUNG VON ETHYLEN.33
2.8. UNTERSUCHUNGEN AN PFLANZEN.34
3. ERGEBNISSE.35
3.1. ANALYSE DES VON
P. S.
PV.
PHASEOLICOLA
GEBILDETEN HOCHMOLEKULAREN
PRODUKTANTEILS.35
3.2. NACHWEIS DER BILDUNG EXTRAZELLULAERER LPS DURCH
P. S.
PV.
PHASEOLICOLA
.46
3.3. CHARAKTERISIERUNG DER EXTRAZELLULAEREN LIPOPOLYSACCARIDE ALS ECHTES
PRODUKT.51
3.4. BILDUNG VON EXTRAZELLULAEREN LPS DURCH VERSCHIEDENE STAEMME VON
P. S. PV.
PHASEOLICOLA
SOWIE AUF UNTERSCHIEDLICHEN C- UND ENERGIEQUELLEN.56
3.5. KINETIK DER FREISETZUNG VON EXTRAZELLULAEREN LPS UND ALGINAT.62
3.6. ANALYTISCHER VERGLEICH ZWISCHEN ZELLASSOZIIERTER UND
EXTRAZELLULAERER LPS.65
YY KOLORIMETRISCHE ANALYSE.66
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YY GELELEKTROPHORESE.68
YY GASCHROMATOGRAPHIE.70
YY IR-SPEKTROSKOPIE, 'H-NMR-UND
,3C-NMR-SPEKTROSKOPIE.72
3.7. MORPHOLOGISCHE ASPEKTE DER FREISETZUNG EXTRAZELLULAERER LPS.74
3.8. WIRKUNG VON LPS IN PFLANZLICHEN SYSTEMEN.79
3.8.1. EINFLUSS VON LPS AUF PFLANZENZELLKULTUREN.79
YY TROCKENMASSE.80
YY VITALITAETSTEST (TTC-TEST).80
YY PHENYLALANIN-AMMONIUM-LYASE / PEROXIDASE / POLYPHENOLOXIDASE.80
YY ETHYLENBILDUNG.81
3.8.2. EINFLUSS VON LPS AUF TABAKPFLANZEN.83
3.8.3. EINFLUSS VON LPS AUF BOHNENPFLANZEN.87
4. DISKUSSION.91
4.1. ANALYSE DES HOCHMOLEKULAREN PRODUKTANTEILS VON P. S. PV.
PHASEOLICOLA.91
4.2. LIPOPOLYSACCHARIDE ALS BESTANDTEIL DES HOCHMOLEKULAREN
PRODUKTANTEILS.97
4.3. ELPS ALS ECHTES PRODUKT.101
4.4. STRUKTURVERGLEICH ZWISCHEN LPS. UND ELPS.102
4.5. NACHWEIS UND CHARAKTERISIERUNG VON
IN VITRO GEBILDETEN BLEBS.103
4.6. EFFEKT VON LPS AUF PFLANZENZELLKULTUREN.106
4.7. WIRKUNG VON LPS
IN PLANTA.108
5. ABSCHLUSSDISKUSSION.112
YY KOMPATIBLE INTERAKTION.112
YY INKOMPATIBLE INTERAKTION.113
6. ZUSAMMENFASSUNG.116
6.1. ANALYSE DES HOCHMOLEKULAREN PRODUKTANTEILS (HMP).116
6.2. UNTERSUCHUNGEN ZUM PRODUKTCHARAKTER VON ELPS.117
6.3. BILDUNG VON ELPS DURCH VERSCHIEDENE STAEMME VON PSEUDOMONAS SYRINGAE
UND AUF VERSCHIEDENEN C- UND ENERGIEQUELLEN.117
*
6.4. ANALYTISCHER VERGLEICH ZWISCHEN ZELLASSOZIIERTER UND
EXTRAZELLULAERER LPS.118
6.5. ELEKTRONENMIKROSKOPISCHE UNTERSUCHUNGEN.118
6.6. EINFLUSS VON LPS/ELPS AUF PFLANZLICHE SYSTEME.119
YY PFLANZENZELLKULTUREN.119
YY TABAKPFLANZEN.119
YY BOHNENPFLANZEN.119
7. LITERATURVERZEICHNIS.121 |
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