Einfluss von Wachstumsfaktoren auf die frühe Embryonalentwicklung beim Kaninchen:
Gespeichert in:
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
1994
|
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| Beschreibung: | Marburg, Univ., Diss., 1994 |
| Beschreibung: | 110 S. Ill., graph. Darst. |
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INHALTSVERZEICHNIS
1.
EINLEITUNG
1
2.
MATERIAL
UND
METHODE
5
2.1.
VERSUCHSTIERE
5
2.1.1
TIERE
UND
TIERHALTUNG
5
2.1.2.
ERZEUGUNG
VON
PSEUDOGRAVIDITAET
5
2.1.3.
GEWINNUNG
VON
BLASTOCYSTEN
UND
UTERUSSEKRET
5
2.1.4.
GEWINNUNG
VON
ENDOMETRIUMGEWEBE
6
2
J.
IN
VITRO
KULTUR
7
2.2.1.
KULTURBEDINGUNGEN
ALLGEMEIN
7
2.2.2.
ZUGABE
VON
WACHSTUMSFAKTOREN
8
23.
HISTOLOGISCHE
UND
IMMUNHISTOLOGISCHE
METHODEN
9
2.3.1.
FLAT
MOUNT
TECHNIK
9
2.3.2.
KUNSTSTOFFEINBETTUNG
UND
HERSTELLUNG
VON
SEMIDUENNSCHNITTEN
10
2.3.3.
HERSTELLUNG
VON
KRYOSTATSCHNITTEN
10
2.3.4.
IMMUNHISTOCHEMIE
AN
GEFRIERSCHNITTEN
11
2.3.5.
BINDUNGSSTUDIEN
MIT
12$
J-EGF
11
2.3.6.
LICHTMIKROSKOPISCHE
AUTORADIOGRAPHIE
12
2.3.7.
WHOLE
MOUNT
ANTIKOERPERFARBUNG
12
2.4.
BIOCHEMISCHE
UND
IMMUNOLOGISCHE
TECHNIKEN
13
2.4.1.
AUFARBEITUNG
DER
BLASTOCYSTENGEWEBE
13
2.4.2.
QUANTITATIVE
PROTEINBESTIMMUNG
14
2.4.3.
EINDIMENSIONALE
POLYACRYLAMID
GRADIENTENGELELEKTROPHORESE
15
2.4.4.
ZWEIDIMENSIONALE
POLYACRYLAMID
GRADIENTENGELELEKTROPHORESE
16
2.4.5.
SILBERFARBUNG
VON
PROTEINEN
NACH
PAGE
18
2.4.6.
FHIOROGRAPHIE
19
2.4.7.
WESTERN
-
BLOTTING
19
2.4.8.
INDIREKTE
IMMUNFILLUNG
21
2J5.
MOLEKULARBIOLOGISCHE
METHODEN
22
2.5.1.
LAGERUNG
DER
NUKLEINSAEUREN
22
2.5.2.
BESTIMMUNG
DER
KONZENTRATION
UND
REINHEIT
DER
NUKLEINSAEUREN
22
2.5.3.
TRANSFORMATIONSKOMPETENTE
E.COLI-ZELLEN
23
2.5.3.1.
HERSTELLUNG
KOMPETENTER
E.COLI-ZELLEN
2.5.3.2.
TRANSFORMATION
VON
E.COLI-ZELLEN
2.5.4.
PRAEPARATION
VON
RNA
24
2.5.4.1.
GESAMT-RNA
2.5.4.2.
POLY(A)
+
RNA
2.5.5.
PRAEPARATION
VON
PLASMID
DNA
AUS
E.COLI
ZELLEN
26
2.5.5.1.
MINI
PRAEPARATION
2.S.5.2.
MIDI
PRAEPARATION
MIT
QIAGEN-SAEULEN
2.5.5.3.
RESTRIKTION
(EISENGEWINNUNG)
2.5.6.
IN
SITU
HYBRIDISIERUNG
28
2.5.6.1.
DIG
MARKIERUNG
DER
SONDE
2.S.6.2.
WHOLE
MOUNT
IN
SITU
HYBRIDISIERUNG
2.5.7.
IN
VITRO
TRANSLATION
30
2.6.
FOTODOKUMENTATION
30
2.7.
STATISTISCHE
BERECHNUNGEN
31
3.
ERGEBNISSE
33
3.1.
IN
VITRO
KULTUR
DER
BLASTOCYSTEN
IN
HARNS
FLO-POLYVINYLPYRROLIDON
OHNE
ZUSATZ
VON
WACHSTUMSFAKTOREN
33
3.1.1.
GROESSE
UND
ENTWICKLUNGSZUSTAND
DER
BLASTOCYSTEN
ZUM
ZEITPUNKT
DER
ENTNAHME
AUS
DEM
UTERUS
33
3.1.2.
WACHSTUM
DER
BLASTOCYSTEN
IN
DER
KULTUR
33
3.1.3.
PROTEINSYNTHESE
VON
EMBRYOBLAST
UND
TROPHOBLAST
IN
DER
KULTUR
36
3.1.4.
ENTWICKLUNG
DER
KEIMSCHEIBEN
IN
DER
KULTUR
38
3.2
IN
VITRO
KULTUR
DER
BLASTOCYSTEN
IN
ANWESENHEIT
VON
TRANSFORMING
GROWTH
FACTOR
A
(TGFA)
40
3.2.1.
EINFLUSS
VON
TGFA
AUF
DIE
WACHSTUMSRATE
DER
TAG
6
BLASTOCYSTEN
IN
DER
LANGZEITKULTUR
40
3.2.2.
EINFLUSS
VON
TGFA
AUF
DIE
PROTEINSYNTHESE
DER
TAG
6
BLASTOCYSTEN
IN
DER
LANGZEITKULTUR
40
3.2.3.
EINFLUSS
VON
EPIDERMAL
GROWTH
FACTOR
(EGF)
AUF
WACHSTUM
UND
PROTEINSYNTHESE
DER
TAG
6
BLASTOCYSTEN
IN
DER
LANGZEITKULTUR
42
3.2.4.
NACHWEIS
VON
EGF/TGFA
BINDUNGSSTELLEN
IN
DEN
TAG
6
BLASTOCYSTEN
42
33.
IN
VITRO
KULTUR
DER
BLASTOCYSTEN
IN
ANWESENHEIT
VON
BASIC
FIBROBLAST
GROWTH
FACTOR
(BFGF)
44
3.3.1.
EINFLUSS
VON
BFGF
AUF
WACHSTUMSRATE
UND
DIFFERENZIERUNG
VON
TAG
5
UND
TAG
7
BLASTOCYSTEN
IN
DER
KULTUR
44
3.3.2.
EINFLUSS
VON
BFGF
AUF
WACHSTUMSRATE
UND
DIFFERENZIERUNG
VON
TAG
6
BLASTOCYSTEN
IN
DER
KULTUR
45
3.3.3.
HISTOLOGIE
48
3.3.4.
EXPRESSION
DES
T-GENS
UND
SEINES
TRANSLATIONSPRODUKTS
50
3.3.5.
EINFLUSS
VON
BFGF
AUF
DIE
PROTEINSYNTHESE
DER
KEIMSCHEIBE
IN
DER
KULTUR
54
3.4.
SUCHE
NACH
EINEM
BFGF-AEHNLICHEN
WACHSTUMSFAKTOR
IN
VIVO
54
3.4.1.
NACHWEIS
VON
BFGF
MRNA
IN
BLASTOCYSTE
UND
ENDOMETRIUM
54
3.4.2.
IMMUNHISTOCHEMISCHER
NACHWEIS
VON
BFGF
IN
BLASTOCYSTE
UND
ENDOMETRIUM
56
3.4.3.
NACHWEIS
VON
BFGF
IM
UTERUSSEKRET
GRAVIDER
UND
PSEUDOGRAVIDER
KANINCHEN
58
3.5.
EINFLUSS
DER
WACHSTUMSFAKTOREN
AFGF,
TGFSSJ,
ACTIVIN
SSA, IGF
VII,
NGF,
PDGF
AA.PDGF
BB
UND
ASFP
AUF
DIE
ENTWICKLUNG
DER
BLASTOCYSTEN
IN
DER
IN
VITRO
KULTUR
60
4.
DISKUSSION
62
5.
ZUSAMMENFASSUNG
81
6.
LITERATURVERZEICHNIS
84 |
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