Vergleich des Verhaltens der H + -Pyrophosphatase des Tonoplasten von einer C 3 -Pflanze, CAM-Pflanze und einer C 3 -CAM-intermediären Pflanze während der Reinigung:
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| Format: | Abschlussarbeit Mikrofilm Buch |
| Sprache: | German |
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1993
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INHALTSVERZEICHNIS
1
. EINLEITUNG.
1.1
DIE VAKUOLAERE H+-PPJASE. ~~ ^
1
.
1.1
PHYLOGENETISCHER URSPRUNG DER VAKUOLAEREN H^-PPJASE .1
1.1.2 VORKOMMEN UND CHARAKTERISTIKA DER VAKUOLAEREN H
+-PPJASE 2
1
.
1.3
PHYSIOLOGISCHE BEDEUTUNG DER VAKUOLAEREN H+-PPJASE .3
1
.
1.4
STRUKTUR DER H+-PPJASE . 6
1.2
DIE VAKUOLAERE H+-ATPASE. 7
1.3 DER CRASSULACEEN-SAEURESTOFFWECHSEL .
8
1.4
DIE VERSUCHSPFIANZEN. G
1.5
ZIELSETZUNG . 10
2. MATERIALIEN UND METHODEN .
2.1 PFLANZENMATERIALIEN UND -ANZUCHTBEDINGUNGEN. ^2
2
.
1.1
KALANCHOE DAIGREMONTIANA
.
^2
2
.
1.2
MESEMBRYANTHEMUM CRYSTALLINUM
.
13
2.1.2.1 ZELLSAFTGEWINNUNG . 14
2.1.2.2 OSMOLARITAETSBESTIMMUNG. 14
2.
1
.
2.3
MALATBESTIMMUNG . 14
2
.
1.3
CATHARANTHUS ROSEUS
. 16
2.2 ISOLIERUNG VON TONOPLASTENVESIKELN. 17
2.2.1 ISOLIERUNG VON TONOPLASTENVESIKELN AUS MESOPHYLLHOMOGENATEN .17
2
2
.
1.1
TONOPLASTENVESIKEL VON K. DAIGREMONTIANA.17
2
.
2
.1.2 TONOPLASTENVESIKEL VON M. CRYSTALLINUM.19
2
.
2.2
ISOLIERUNG VON TONOPLASTENVESIKELN AUS MESOPHYLLPROTOPLASTEN 20
2.2.2.1 PROTOPLASTENISOLIERUNG. 20
2
.2.2.2 ISOLIERUNG VON TONOPLASTENVESIKELN AUS PROTOPLASTEN.21
2
.
2.3
PRAEPARATIVE FREE-FLOW-ELEKTROPHORESE . 22
2
.
2
.
3
.1 PRAEPARATION DER MIKROSOMALEN MEMBRANEN.
24
2
.
2
.
3.2
ISOLIERUNG VON TONOPLASTEN- UND PLASMALEMMAMEMBRANEN
MITTELS FREE-FLOW-ELEKTROPHORESE.
25
2.3 PROTEINBESTIMMUNG. 25
2.4
BESTIMMUNG DER ATPASE- UND PPJASE-AKTIVITAET.
27
2.5
CHARAKTERISIERUNG DER VESIKELPRAEPARATE .
28
2.6 PROTONENTRANSPORTMESSUNG . 29
2.7
BEHANDLUNG DER TONOPLASTENPRAEPARATE VON K. DAIGREMONTIANA
MIT
KALIUMJODID . 31
2.8 SOLUBILISIERUNG DER MEMBRANVESIKEL . 31
2.9
REKONSTITUTION SOLUBILISIERTER TONOPLASTENPROTEINE .33
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
HTTP://D-NB.INFO/942171535
2.10 CHROMATOGRAPHISCHE VERFAHREN.
2
.
10.1
MOLEKULARE AUSSCHLUSSCHROMATOGRAPHIE.
2
.
10.2
LONENAUSTAUSCHCHROMATOGRAPHIE .
2.11
SDS-POLYACRYLAMID-GELELEKTROPHORESE (SDS-PAGE).
2.11.1 PROBENVORBEREITUNG .
2.11.2 SDS-PAGE NACH
LAEMMLI
(1970, VERAENDERT).
2.11.3 SDS-PAGE NACH
SCHAEGGER & JAGOW
(1987, VERAENDERT) .
2.12 FAERBUNG DER POLYACRYLAMIDGELE.
2.12.1 COOMASSIE FAERBUNG .
2.12.2 SILBERFAERBUNG .
2.12.3 ENTFAERBUNG VON SDS-POLYACRYLAMIDGELEN
2.13 BROMCYANSPALTUNG.
2.14 IMMUNOBIOTTING .
2.14.1 TRANSFER DER PROTEINE AUF TEFLONMEMBRAN.
2.14.2 IMMUNO-GOLD-FAERBUNG DER GEBLOTTETEN PROTEIN
2.14.3 SILBERVERSTAERKUNG DER IMMUNO-GOLD-FAERBUNG.
2.15 ELEKTRONENMIKROSKOPIE .
2.15.1 GEFRIERBRUCHTECHNIK .
2.15.2 BILDAUSWERTUNG .
2.16 CHEMIKALIEN.
ERGEBNISSE.
3.1 PROTEINGEHALTE DER TONOPLASTENPRAEPARATE
3.2 ATP- UND PPJ-HYDROLYSEAKTIVITAETEN.
3.3 CHARAKTERISIERUNG DER TONOPLASTENPRAEPARATE
3.3.1
KALANCHOAE DAIGREMONTIANA.
3.3.2
MESEMBRYANTHEMUM CRYSTALLINUM (C3-ZUSTAND).
3.3.3 CATHARANTHUS ROSEUS .
3.4
PROTONENTRANSPORTMESSUNGEN .
3.5 ENTFERNEN MEMBRANPERIPHERER PROTEINE AUS TONOPLASTENPRAEPARATEN VON
K. DAIGREMONTIANA MIT DEM CHAOTROPEN ION JODID
3.6 SOLUBILISIERUNG DER TONOPLASTENPROTEINE .
3.6.1 SOLUBILISIERUNG DER TONOPLASTENPROTEINE VON
K. DAIGREMONTIANA MIT
OCTYLGLUCOSID .
3.6.2 SOLUBILISIERUNG DER TONOPLASTENPROTEINE VON
M. CRYSTALLINUM.
3.6.3 SOLUBILISIERUNG DER TONOPLASTENPROTEINE VON C.
ROSEUS.
3.6.3.1 OCTYLGLUCOSID .
3.6.3.2 TRITON X-100.
3.6.3.3 SOLUBILISIERUNGSEFFIZIENZ BEI VERWENDUNG HOHER PROTEINKON
ZENTRATIONEN .
.35
.35
.36
.37
.38
.39
.41
.42
.42
.43
.44
.44
.45
.45
.46
.47
.47
.47
.49
.49
.51
.51
.52
.53
.54
.54
.55
.57
.58
.61
63
66
67
67
71
74
3.7 REINIGUNG DER TONOPLASTEN-PPJASE .
74
3.7.1 TRENNUNG DER TONOPLASTENPROTEINE VON
K. DAIGREMONTIANA.
75
3.7.
1.1
TRENNUNG DER TONOPLASTENPROTEINE VON K. DAIGREMONTIANA
OHNE VERWENDUNG VON PROTEASEINHIBITOREN.
75
3.7.
1.2
TRENNUNG DER TONOPLASTENPROTEINE UNTER VERWENDUNG VON
PROTEASEINHIBITOREN .
81
3.7.1.3 BILANZ DER REINIGUNG DER PPJASE VON
K. DAIGREMONTIANA BEI
VERWENDUNG VON PROTEASEINHIBITOREN.89
3.7.2 TRENNUNG DER TONOPLASTENPROTEINE VON M. CRYSTALLINUM.90
3.7.3 TRENNUNG DER TONOPLASTENPROTEINE VON C.
ROSEUS .
95
3.7.4 VERGLEICH DER KALIUMABHAENGIGKEIT VON NATIVER UND GEREINIGTER
PPJASE .
3.8 IMMUNOLOGISCHE IDENTIFIZIERUNG DER L-T-PPJASE.
101
3.9 BROMCYANSPALTUNG DER MIT PP
RHYDROLYSEAKTIVITAET KORRELIERTEN POLYPEPTIDE VON
K. DAIGREMONTIANA.
103
3.10 REKONSTITUTION DER PPJASE VON
K. DAIGREMONTIANA.104
3.10.1 REKONSTITUTION AUSGEHEND VON EINEM SOLUBILISAT ALLER TONOPLASTEN
PROTEINE .
3.10.2 REKONSTITUTION AUSGEHEND VON PARTIELL GEREINIGTER PPJASE.108
3.11 CAM-INDUKTIONSREIHE VON M. CRYSTALLINUM. HO
4. DISKUSSION.
115
4.1 ANMERKUNGEN ZU DEN TONOPLASTENPRAEPARATEN .
115
4.2 REINIGUNG UND IDENTIFIZIERUNG DER H
+-PPJASE DES TONOPLASTEN.
117
4.2.1 REINIGUNG UND IDENTIFIZIERUNG DER H
+-PPJASE VON K. DAIGREMONTIANA.117
4.2.2 REINIGUNG UND IDENTIFIZIERUNG DER H
+-PPJASEN VON M. CRYSTALLINUM UND
C. ROSEUS./. HG
4.3 DIE FUNKTIONELLE MOLMASSE DER VAKUOLAEREN H
+-PPJASEN VON K. DAIGREMONTIANA
M. CRYSTALLINUM UND C. ROSEUS. 'L
2
I
4.4 STABILITAET DER TONOPLASTIDAEREN H
+-PPJASE .
123
4.4.1 VERWENDUNG VON PROTEASEINHIBITOREN.
124
4
.
4.2
ZUSATZ EXOGENER PHOSPHOLIPIDE .
126
4.5 DIE KALIUMUNABHAENGIGE PP,ASE.
127
4.6
BEWERTUNG DER CHROMATOGRAPHISCHEN TRENNVERFAHREN .
131
4.7 DIE REKONSTITUTION DER VAKUOLAEREN H
+-PPJASE AUS K. DAIGREMONTIANA .132
4.7.1 REKONSTITUTION AUSGEHEND VON EINEM SOLUBILISAT ALLER TONOPLASTEN
PROTEINE .
132
4.7.2 REKONSTITUTION DER PARTIELL GEREINIGTEN VAKUOLAEREN PP,ASE.
134
4.8 CAM-INDUKTIONSREIHE VON M. CRYSTALLINUM.
136
5
. ZUSAMMENFASSUNG.
1
3G
6. LITERATURVERZEICHNIS .
1
4Q |
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| spelling | Becker, Andrea Verfasser aut Vergleich des Verhaltens der H + -Pyrophosphatase des Tonoplasten von einer C 3 -Pflanze, CAM-Pflanze und einer C 3 -CAM-intermediären Pflanze während der Reinigung von Andrea Becker [Mikrofiche-Ausg.] 1993 154 S. Ill., graph. Darst. txt rdacontent h rdamedia he rdacarrier Darmstadt, Techn. Hochsch., Diss., 1993 Mikroform-Ausgabe Mikrofiche-Ausg.: 3 Mikrofiches : 24x C3-Pflanzen - Tonoplast - Pyrophosphatasen - Isolierung <Chemie> - CAM-Pflanzen Tonoplast (DE-588)4296595-0 gnd rswk-swf CAM-Pflanzen (DE-588)4351679-8 gnd rswk-swf Pyrophosphatasen (DE-588)4351678-6 gnd rswk-swf C3-Pflanzen (DE-588)4339617-3 gnd rswk-swf Isolierung Chemie (DE-588)4122223-4 gnd rswk-swf (DE-588)4113937-9 Hochschulschrift gnd-content C3-Pflanzen (DE-588)4339617-3 s Tonoplast (DE-588)4296595-0 s Pyrophosphatasen (DE-588)4351678-6 s Isolierung Chemie (DE-588)4122223-4 s CAM-Pflanzen (DE-588)4351679-8 s DE-604 Reproduktion von Becker, Andrea Vergleich des Verhaltens der H + -Pyrophosphatase des Tonoplasten von einer C 3 -Pflanze, CAM-Pflanze und einer C 3 -CAM-intermediären Pflanze während der Reinigung 1993 DNB Datenaustausch application/pdf http://bvbr.bib-bvb.de:8991/F?func=service&doc_library=BVB01&local_base=BVB01&doc_number=006548730&sequence=000001&line_number=0001&func_code=DB_RECORDS&service_type=MEDIA Inhaltsverzeichnis |
| spellingShingle | Becker, Andrea Vergleich des Verhaltens der H + -Pyrophosphatase des Tonoplasten von einer C 3 -Pflanze, CAM-Pflanze und einer C 3 -CAM-intermediären Pflanze während der Reinigung C3-Pflanzen - Tonoplast - Pyrophosphatasen - Isolierung <Chemie> - CAM-Pflanzen Tonoplast (DE-588)4296595-0 gnd CAM-Pflanzen (DE-588)4351679-8 gnd Pyrophosphatasen (DE-588)4351678-6 gnd C3-Pflanzen (DE-588)4339617-3 gnd Isolierung Chemie (DE-588)4122223-4 gnd |
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