Untersuchungen zu regulatorischen Funktionen der Butyrylcholinesterase: Anzucht, immunologische Charakterrisierung und Stimulation von Schwann-Zellen aus dem Ischiasnerven des Hühnerembryos
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INHALTSVERZEICHNIS
INHALTSVERZEICHNIS
INHALTSVERZEICHNIS
1
ABKUERZUNGEN
V
A.
EINLEITUNG
I
1.
GLIAZELLEN
SIND
MEHR
ALS
STIITZZELLEN
IM
NERVENSYSTEM
1
2.
SCHWANN-ZEILEN
BILDEN
DIE
PERIPHERE
GLIA
2
2.1.
MEDIZINISCHE RELEVANZ
DER
SCHWANN-ZELLEN
2
2.2.
MOLEKULARBIOLOGIE
DER
SCHWANN-ZELLEN
3
3.
WELCHE
FUNKTIONEN
HABEN
DIE
CHOLINESTERASEN
DER
GLIAZELLEN
?
8
4.
FRAGESTELLUNGEN
11
B.
MATERIAL
UND METHODEN
12
1.
CHEMIKALIEN
12
2.
PUFFER
UND
MEDIEN
12
3.
PROTEINBESTIMMUNG
15
3.1.
BRADFORD-METHODE
13
3.2.
BCA-METHODE
15
4.
NACHWEISMETHODEN
FUER
CHOLINESTERASEN
1
INHALTSVERZEICHNIS
4.1.
KOLORIMETRISCHE
BESTIMMUNG
16
4.2.
HISTOCHEMISCHER
NACHWEIS
16
5.
HISTOLOGIE
18
5.1.
ANTIKOERPER-FAERBUNGEN
VON
GEFRIERSCHNITTEN
18
YY
5.2.
ANTIKOERPER-FAERBUNGEN
VON
ZELLKULTUREN
18
5.3.
MYELINFAERBUNG
MIT
SUDANSCHWARZ
19
5.4.
MIKROSKOP
UND
FOTOGRAFIE
19
6.
BESCHICHTUNG
VON
ZELLKULTURGEFAESSEN
MIT
VERSCHIEDENEN
SUBSTRATEN
19
6.1.
POLY-L-LYSIN
19
6.2.
LAMININ
20
6.3.
KOLLAGEN
20
7.
GEWEBEPRAEPARATION
20
7.1.
PRAEPARATION
VON
SCHWANN-ZELLEN
AUS
ISCHIASNERVEN
20
7.2.
PRAEPARATION
VON
HINTERWURZELGANGLIEN
21
7.3.
NEURALROHRPRAEPARATION
22
8.
ZELLKULTUREN
22
8.1.
UNTERDRUECKUNG
DER
FIBROBLASTENPROLIFERATION
IN
SCHWANN-ZELL-KULTUREN
22
8.2.
SUBKULTIVIEREN
VON
LANGZEITKULTUREN
AUS
SCHWANN-ZELLEN
23
8.3.
KOKULTUREN
VON
SCHWANN-ZELLEN
UND
HINTERWURZELGANGLIEN
23
9.
HERSTELLUNG
VON
MONOKLONALEN
ANTIKOERPERN
GEGEN
SCHWANN-ZELLEN
24
9.1.
GEWINNUNG
VON
PERITONEAL-MAKROPHAGEN
ALS
FEEDERLAYER
FUER
HYBRIDOMAZELLEN
24
9.2.
IMMUNISIERUNG
VON
BALB/C
MAEUSEN
24
9.3.
ZELLFUSION
25
9.4.
SCREENING
DER
HYBRIDOMAKLONE
25
9.5.
SUBKLONIERUNG
POSITIVER
HYBRIDOMAKLONE
26
9.6.
REINIGUNG
MONOKLONALER
ANTIKOERPER
26
10.
AUFARBEITUNG
VON
KULTIVIERTEN
SCHWANN-ZELLEN
27
10.1.
KONZENTRATION
DER
CHOLINESTERASEN
FUER
ELEKTROPHORETISCHE
AUFTRENNUNGEN
27
10.2.
HERSTELLUNG
EINES
ZELLHOMOGENATES
FUER
DIE
MESSUNG
DER
CHOLINESTERASEN
MIT
DER
KOLORIMETRISCHEN
METHODE
NACH
ELLMAN
28
11.
SDS-POLYACRYLAMID-GEIELEKTROPHORESE (PAGE)
28
12.
WESTERNBLOT
29
INHALTSVERZEICHNIS
III
13.
STIMULATIONSEXPERIMENTE
MIT
SCHWANN-ZELL-LANGZEITKULTUREN
29
13.1.
MTT-TEST
ZUR
BESTIMMUNG
DER
ZELLPROLIFERATION
UND
ZELLAKTIVIERUNG
32
13.2.
STIMULATION
VON
SCHWANN-ZELLEN
UND
MESSUNG
DER
CHOLINESTERASE-AKTIVITAET
33
C.
ERGEBNISSE
34
1.
ETABLIERUNG
EINER
ZELLKULTUR
MIT
SCHWANN-ZELLEN
AUS
DEM
ISCHIASNERVEN
DES
HUEHNEREMBRYOS
34
1.1.
EINFLUSS
DES
SUBSTRATES
AUF
DIE
MORPHOLOGIE
DER
SCHWANN-ZELLEN
34
1.2.
EINFLUSS
DES
KULTURMEDIUMS
AUF
DIE
MORPHOLOGIE
UND
REINHEIT
DER
SCHWANN-ZELLEN
37
2.
HERSTELLUNG
VON
MONOKLONALEN
ANTIKOERPERN
GEGEN
SCHWANN-ZELLEN
41
2.1.
REINIGUNG
DER
MONOKLONALEN
ANTIKOERPER
42
2.2.
ERKENNUNG
VON
SCHWANN-ZELL-PROTEINEN
IM
WESTEMBLOT
43
2.3.
FAERBUNG
VON
KULTIVIERTEN
SCHWANN-ZELLEN
MIT
MONOKLONALEN
ANTIKOERPERN
45
2.4.
FAERBUNG
EMBRYONALER
GEWEBE
MIT
MONOKLONALEN
ANTIKOERPERN
GEGEN
SCHWANN-ZELLEN
47
3.
CHOLINESTERASE-AKTIVITAETEN
KULTIVIERTER
SCHWANN-ZELLEN
52
3.1.
ABHAENGIGKEIT
DER
CHOLINESTERASE-AKTIVITAET
VOM
KULTURMEDIUM
52
3.2.
ABHAENGIGKEIT
DER
CHOLINESTERASE-AKTIVITAET
VOM
ALTER
DER
KULTUREN
54
3.3.
LANGZEITKULTUREN
MIT
VERAENDERTER
MORPHOLOGIE
55
3.4.
AUFARBEITUNG
VON
SCHWANN-ZELLEN
FUER
SDS-PAGE
56
4.
HISTOLOGISCHE
LOKALISATION
DER
BCHE
IN
SCHWANN-ZELLEN
58
5.
CHARAKTERISIERUNG
VON
SCHWANN-ZELLEN
MITTELS
ANTIKOERPERFAERBUNGEN
60
6.
EXPLANTATKULTUREN
VON
HINTERWURZELGANGLIEN
62
7.
KOKULTUREN
VON
SCHWANN-ZELLEN
UND
HINTERWURZELGANGLIEN
64
7.1.
ZEITLICHER
VERLAUF
DER
EXPRIMIERUNG
VON
CHOLINESTERASEN
64
7.2.
MYELINISIERUNG
ALS
NACHWEIS
DER
FUNKTIONELLEN
FAEHIGKEITEN
KULTIVIERTER
SCHWANN-ZELLEN
67
8.
PROLIFERATION
UND
CHOLINESTERASE-AKTIVITAETEN
STIMULIERTER
SCHWANN-ZELLEN
70
IV
INHALTSVERZEICHNIS
8.1.
STIMULATION
MIT
INTERFERON-GAMMA
71
8.2.
STIMULATION
MIT
INTERLEUKIN
1
SS
73
8.3.
STIMULATION
MIT
FORSKOLIN
74
8.4.
STIMULATION
MIT
LAMININ
76
8.5.
STIMULATION
MIT
HIMANHANGSDRIISENEXTRAKT
(PEX)
77
8.6.
STIMULATION
MIT
BUTYRYLCHOLINESTERASE
79
8.7.
KONTROLLEXPERIMENT
MIT
ZUGABE
DES
BCHE-INHIBITORS ISO-OMPA
82
D.
DISKUSSION
85
1.
SCHWANN-ZELLEN
ALS
LEITSTRUKTUREN
DES
AXONALEN
FASERWACHSTUMS
85
2.
KULTURSYSTEM
FUER
SCHWANN-ZELLEN
87
3.
MONOKLONALE
ANTIKOERPER
GEGEN
SCHWANN-ZELLEN
ZUR
IDENTIFIZIERUNG
FRUEHER
GLIAEPITOPE
88
4.
KOKULTUREN
VON
SCHWANN-ZELLEN
UND
HINTERWURZELGANGLIEN
ALS
GLIA-NEURON-MODELLSYSTEME
92
5.
FUNKTION
DER
SCHWANN-ZELLEN
ALS
BCHE
PRODUZIERENDE
GLIAZELLEN
93
5.1.
REGULATION
DER
CHOLINESTERASE-AKTIVITAETEN
BEI
NEUROPATHIEN
93
5.2.
BUTYRYLCHOLINESTERASE
ALS
POSITIVER
REGULATOR
BEI
DER
REGENERATION
IM
PNS
95
5.3.
EINE
REGULATORISCHE
FUNKTION
DER
BUTYRYLCHOLINESTERASE
KANN
IM
IN
VITRO
SYSTEM
UNTERSUCHT
WERDEN
96
5.4.
DIE
BUTYRYLCHOLINESTERASE
IST
DAS
BESTE
MITOGEN
FUER
SCHWANN-ZELLEN
IN
VITRO
98
5.5.
VORSCHLAEGE
ZU
WIRKUNGSMECHANISMEN
DER
BUTYRYLCHOLINESTERASE
IN
VIVO
103
E.
ZUSAMMENFASSUNG
LOS
F.
LITERATUR
107 |
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spelling | Weiss, Bettina Verfasser aut Untersuchungen zu regulatorischen Funktionen der Butyrylcholinesterase Anzucht, immunologische Charakterrisierung und Stimulation von Schwann-Zellen aus dem Ischiasnerven des Hühnerembryos vorgelegt von Bettina Weiß 1994 VI, 133 S. Ill., graph. Darst. txt rdacontent n rdamedia nc rdacarrier Tübingen, Univ., Diss., 1994 Tiermodell (DE-588)4140660-6 gnd rswk-swf Ischiasnerv (DE-588)4162458-0 gnd rswk-swf In vitro (DE-588)4250701-7 gnd rswk-swf Enzymaktivität (DE-588)4152470-6 gnd rswk-swf Zellteilung (DE-588)4190668-8 gnd rswk-swf Cholinesterase (DE-588)4122098-5 gnd rswk-swf Schwann-Zelle (DE-588)4231189-5 gnd rswk-swf Zellkultur (DE-588)4067547-6 gnd rswk-swf Genexpression (DE-588)4020136-3 gnd rswk-swf (DE-588)4113937-9 Hochschulschrift gnd-content Ischiasnerv (DE-588)4162458-0 s Schwann-Zelle (DE-588)4231189-5 s Zellkultur (DE-588)4067547-6 s Tiermodell (DE-588)4140660-6 s DE-604 Zellteilung (DE-588)4190668-8 s Cholinesterase (DE-588)4122098-5 s Enzymaktivität (DE-588)4152470-6 s Genexpression (DE-588)4020136-3 s In vitro (DE-588)4250701-7 s DNB Datenaustausch application/pdf http://bvbr.bib-bvb.de:8991/F?func=service&doc_library=BVB01&local_base=BVB01&doc_number=006535606&sequence=000001&line_number=0001&func_code=DB_RECORDS&service_type=MEDIA Inhaltsverzeichnis |
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