Untersuchungen zum CAMP-Faktor von Streptococcus agalactiae mit Hilfe monoklonaler Antikörper:
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
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1994
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INHALT
INHALT
2
1
EINLEITUNG
4
1.1
PATHOGENE
STREPTOKOKKEN
4
1.2
STREPTOKOKKEN-ZYTOLYSLNE
5
1.3
CAMP-FAKTOR
6
1.4
ANTIKOERPER
GEGEN
CAMP-FAKTOR
9
1.5
MONOKLONALE
ANTIKOERPER
10
2
ZIELSETZUNG
11
3
MATERIAL
UND
METHODEN
12
3.1
BAKTERIENSTAEMME,
ZELL-LINIEN,
TIERE
12
3.2
KULTURMEDIEN
12
3.3
CAMP-HAEMOLYSE-TESTS
13
3.3.1
HAEMOLYSE-TEST
IM
PHOTOMETER-VERFAHREN
13
3.3.2
HAEMOLYSE-TEST
IM
AGARDIFFUSIONSVERFAHREN
14
3.3.3
HAEMOLYSE-HEMMTEST
IM
MLKROTLTER-VERFAHREN
16
3.4
UNTERSUCHUNG
AUF
SERLN-PROTEASEN-PRODUKTION
18
3.5
CAMP-FAKTOR-RELNLGUNG
18
3.5.1
HERSTELLUNG
VON
KULTURIIBERSTAND
18
3.5.2
AMMONIUMSULFATFAELLUNG
19
3.5.3
GELFILTRATION
19
3.5.4
PRAEPARATIVE
ISOELEKTRISCHE
FOKUSSIERUNG
21
3.5.5
TRENNUNG
MITTELS
HPLC
22
3.5.6
GEL-ELEKTROPHORESE
22
3.5.7
WESTERN-BLOT
24
3.6
HERSTELLUNG
MONOKLONALER
ANTIKOERPER
25
3.6.1
THEORETISCHE
VORBEMERKUNGEN
25
3.6.2
IMMUNISIERUNG
DER
MAEUSE
27
3.6.3
SLOT-IMMUNOBLOT-VERFAHREN
ZUM
NACHWEIS
DER
ANTIKOERPERTITER
27
3.6.4
FUSIONIERUNG
VON
MILZZELLEN
MIT
MYELOMZELLEN
28
3.6.5
SCREENING
DER
HYBRLDOMUEBERSTAENDE
34
3.6.6
REKLONLERUNG
35
3.6.7
IMMUNGLOBULIN
ODER
SUBKLASSENBESTLMMUNG
36
3.6.8
MASSENPRODUKTION
MONOKLONALER
ANTIKOERPER
38
3.6.9
AUFTRENNUNG
MITTELS
AFFINITAETSCHROMATOGRAPHIE
39
4
ERGEBNISSE
41
4.1
UNTERSUCHUNG
DER
KINETIK
DER
PRODUKTION
DES
CAMP-FAKTORS
41
4.2
REINIGUNG
DES
CAMP-FAKTORS
42
4.2.1
STREPTOKOKKENKULTUR
UND
PROTEINFAELLUNG
42
4.2
.2
GELFILTRATION
42
4.2.3
PRAEPARATIVE
ISOELEKTRISCHE
FOKUSSIERUNG
43
4.2.4
TRENNUNG
MITTELS
HPLC
45
4.2.5
GELELEKTROPHORESE
46
4.3
HERSTELLUNG
MONOKLONALER
ANTIKOERPER
47
4.3.1
IMMUNISIERUNG
DER
MAEUSE
47
4.3.2
FUSION
UND
REKLONLERUNG
49
4.3.3
IDENTIFIZIERUNG
DER
ANTIKOERPER
50
4.3.4
UNTERSUCHUNG
AUF
HAEMOLYSE-HEMMUNG
50
4.3.5
SUBKLASSENBESTIMMUNG
52
4.3.6
MASSENPRODUKTION
VON
MONOKLONALEN
ANTIKOERPERN
52
4.3.7
NACHWEIS
DER
MONOKLONALLTAET
52
4.3.8
VERGLEICH
MONOKLONALER
POLYKLONALER
ANTIKOERPER
54
5
DISKUSSION
55
5.1
REINIGUNG
DES
CAMP-FAKTORS
UND
HERSTELLUNG
MONOKLONALER
ANTIKOERPER
55
5.2
HAEMOLYSEHEMMUNG
UND
EPLTOPLOKALISATION
56
5.3
DIE
FC-BLNDUNG
DES
CAMP-FAKTORS
AN
IMMUNGLOBULINE
57
5.4
AUSBLICK
58
6
ZUSAMMENFASSUNG
59
LITERATURVERZEICHNIS
60
-
3
- |
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