Untersuchungen zum Arachidonsäure-Metabolismus menschlicher Hautzellen: pathophysiologische Konsequenzen für die Psoriasis
Gespeichert in:
1. Verfasser: | |
---|---|
Format: | Buch |
Sprache: | German |
Veröffentlicht: |
1994
|
Schlagworte: | |
Online-Zugang: | Inhaltsverzeichnis |
Beschreibung: | Kiel, Univ., Diss., 1994 |
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INHALTSVERZEICHNIS
1.
EINLEITUNG
.
1
1.1.
DIE
HAUT
DES
MENSCHEN
.
1
1.2.
DIE
ARACHIDONSAEURE-KASKADE
.
2
1.3.
PSORIASIS
.
3
1.4.
FRAGESTELLUNG
.
4
2.
MATERIAL
UND
METHODEN
.
6
2.1.
HERKUNFT
DER
VERWENDETEN
HAUT
UND
INITIALE
AUFARBEITUNG
.
6
2.2.
TECHNIKEN
FUER
DIE
ISOLATION
VON
EPIDERMIS
ODER
EPIDENNISZELLEN
.
6
2.2.1.
ISOLATION
MIT
TRYPSIN
UND
GEWINNUNG
VON
EPIDERMISZELLFRAKTIONEN
.
.
6
2.2.2.
ALTERNATIVE
METHODEN
ZUR
EPIDERMIS-ISOLATION
.
8
2.3.
GEWINNUNG
VON
HAARWURZELZELLEN,
BASALIOMZELLEN,
KALLUS
UND
PSORIASIS-SCHUPPEN
.
9
2.4.
KERATINOZYTEN-KULTUREN
.
10
2.4.1.
KOLLAGENBESCHICHTUNG
DER
KULTURGEFASSE
FUER
KERATINOZYTEN-IMMER
SIONSKULTUREN
.
10
2.4.2.
MEDIEN
FUER
KERATINOZYTEN-KULTUREN
.
11
2.4.3.
KERATINOZYTEN-PRIMAERKULTUREN
.
11
2.4.3.1.
AUSSAAT
VON
ZELLSUSPENSIONEN
.
11
2.4.3.2.
KERATINOZYTENKULTUR
DURCH
HERAUSWACHSEN
AUS
GEWEBE
.
12
2.4.4.
SUBKULTIVIERUNG
VON
KERATINOZYTEN
UND
ENTFERNUNG
VON
KONTAMI
NIERENDEN
FIBROBLASTEN
.
12
2.4.5.
ALI-KERATINOZYTEN-KULTUREN
.
13
2.4.6.
SUBZELLULAERE
FRAKTIONIERUNG
.
15
2.5.
FIBROBLASTENKULTUREN
.
16
2.6.
MELANOMZELLKULTUREN
.
17
2.7.
ISOLATION
POLYMORPHKERNIGER
NEUTROPHILER
GRANULOZYTEN
(PMN)
.
17
2.8.
THROMBOZYTEN-ISOLATION
.
17
2.9.
METHODEN
ZUR
CHARAKTERISIERUNG
DER
EPIDERMIS-ZELLEN
.
18
2.10.
HOCHLEISTUNGSFLUESSIGKEITSCHROMATOGRAPHIE
.
20
2.11.
HERSTELLUNG
AUTHENTISCHER
EICOSANOIDE
.
23
2.11.1.
HERSTELLUNG
VON
3
H-15-HETE
UND
15-HETE
.
23
2.11.2.
HERSTELLUNG
VON
'
H-12(S)-HETE
UND
12(S)-HETE
.
24
2.11.3.
HERSTELLUNG
VON
3
H-12-OXOETE
UND
12-OXOETE
.
25
2.11.4.
HERSTELLUNG
VON
'
H-PGEJ
.
27
2.12.
INKUBATIONSBEDINGUNGEN
.
27
2.12.1.
UMSATZ
VON
3
H-ARACHIDONSAEURE
UND/ODER
ARACHIDONSAEURE
.
27
2.12.2.
UMSATZ
VON
EICOSANOIDEN
.
31
2.13.
ISOLATION
VON
HAUT-EICOSANOID
X
.
33
2.14.
DERIVATISIERUNGEN
.
33
2.15.
GASCHROMATOGRAPHIE-MASSENSPEKTROMETRIE
(GC-MS)
.
35
2.16.
CHEMOTAXIS
NEUTROPHILER
GRANULOZYTEN
.
35
2.17.
HALBQUANTITATIVE
BESTIMMUNG
RADIOAKTIVER
PRODUKTE
.
36
2.18.
CHIRALITAETSANALYSE
DER
3
H-PSO-12-HETE
.
37
3.
RESULTATE
.
39
3.1.
CHARAKTERISIERUNG
DER
VERWENDETEN
ZELLEN
.
39
3.1.1.
FRISCH
ISOLIERTE
EPIDERMIS
.
39
3.1.2.
KULTIVIERTE
KERATINOZYTEN
.
46
3.2.
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
PRODUKTION
VON
LEUKOTRIEN
B
4
DURCH
EPIDER
MALE
ZELLEN
.
49
3.2.1.
INKUBATION
NEUTROPHILER
GRANULOZYTEN
MIT
3
H-ARACHIDONSAEURE
.
49
3.2.2.
INKUBATION
NORMALER
EPIDERMISZELLEN
MIT
EXOGENER
ARACHIDONSAEURE
.
50
3.2.2.1.
VARIATIONEN
DER
INKUBATIONSBEDINGUNGEN
.
50
3.2.2.2.
VERGLEICHENDE
HPLC-ANALYSE
DES
3
H-EICOSANOID
X
MIT
3
H-LTB
4
.
56
3.2.2.3.
VERGLEICHENDE
HPLC-UV-SPEKTROMETRIE-ANALYSE
EPIDERMALER
ZELLEN
MIT
PMN
NACH
INKUBATION
MIT
ARACHIDONSAEURE
.
56
3.2.2.4.
GC-MS-ANALYSEN
DES
MIT
LTB
4
-KOELUIERENDEN
EICOSANOID
X
.
61
3.2.2.5.
UEBERPRUEFUNG
VON
RP18-HPLC-FRAKTIONEN
AUF
EPIDERMALES
LTB
4
MITTELS
NEUTROPHILEN-CHEMOTAXIS
.
63
3.2.3.
KOENNEN
EPIDERMIS-ZELLEN
LTB
4
METABOLISIEREN?
.
65
3.2.4.
INKUBATIONEN
VON
EPIDERMIS,
DIE
NICHT
MITTELS
TRYPSIN
ISOLIERT
WURDE,
MIT
'
H-ARACHIDONSAEURE
.
65
3.2.5.
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
3
H-LTB
4
-PRODUKTION
KULTIVIERTER
KERATINOZYTEN
AUS
'
H-ARACHIDONSAEURE
.
70
3.2.6.
EXPERIMENTE
ZUR
3
H-ARACHIDONSAEURE-METABOLISIERUNG
ZU
3
H-LTB
4
DURCH
EPIDERMIS
VON
PSORIATIKEM
ODER
PSORIASIS-SCHUPPEN
.
80
3.3.
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
HETE-PRODUKTION
DURCH
KERATINOZYTEN
.
82
3.3.1.
INKUBATION
SUPRABASALER
EPIDERMIS-ZELLEN
MIT
ARACHIDONSAEURE
.
82
3.3.1.1.
ABGRENZUNG
EPIDERMALER
LIPOXYGENASE/MONOOXYGENASE-ARACHI
DONSAEURE-METABOLITE
VON
CYCLOOXYGENASE-PRODUKTEN
.
82
3.3.1.2.
VERGLEICH
EPIDERMALER
ARACHIDONSAEURE-METABOLITE
MIT
AUTHENTI
SCHEN
HETES
.
84
3.3.1.3.
EINFLUSS
DER
ZELLZAHL
AUF
DIE
EPIDERMALE
'
H-HETE-PRODUKTION
.
89
3.3.1.4.
EINFLUSS
DER
ARACHIDONSAEURE-KONZENTRATION
AUF
DIE
EPIDERMALE
'
H-HETE-PRODUKTION
.
89
3.3.1.5.
UV-SPEKTRALANALYSEN
DER
MIT
AUTHENTISCHEN
HETES
KOELUIEREN
DEN
EPIDERMALEN
ARACHIDONSAEURE-METABOLITE
.
95
3.3.1.6.
EINFLUSS
EINER
ZELL-LYSIERUNG
AUF
DIE
EPIDERMALE
'
H-HETE-PRO
DUKTION
.
97
3.3.1.7.
WEITERE
VARIATIONEN
DER
INKUBATIONSBEDINGUNGEN
.
98
3.3.1.8.
LAGERUNGSSTABILITAET
DER
3
H-12-HETE-GENERIERENDEN
AKTIVITAET
VON
EPIDERMIS-ZELLEN
.
98
3.3.2.
3
H-HETE-PRODUKTION
HITZE-AUFGETRENNTER
HAUT
.
99
3.3.3.
3
H-HETE-PRODUKTION
VON
SAUGBLASEN-EPIDERMIS
.
100
3.3.4.
'
H-ARACHIDONSAEURE-METABOLITEN-MUSTER
UNTERSCHIEDLICHER
EPIDER
MIS-ZELLFRAKTIONEN
.
102
3.3.5.
KORRELATION
DES
GEHALTES
UNTERSCHIEDLICHER
ZELLARTEN
IN
EPIDERMIS
FRAKTIONEN
MIT
DER
PRODUKTION
VON
'
H-15-HETE
UND
3
H-12-HETE.
.
102
3.3.6.
KINETIKEN
DER
EPIDERMALEN
HETE-SYNTHESE
.
105
3.3.7.
3
H-HETE-PRODUKTION
VON
HAARWURZEL-ZELLEN
.
109
3.3.8.
3
H-HETE-PRODUKTION
VON
BASALIOM-ZELLEN
.
110
3.3.9.
'
H-HETE-PRODUKTION
VON
PSORIATIKER-EPIDERMIS
.
111
3.3.10.
HETE-PRODUKTION
KULTIVIERTER
KERATINOZYTEN
.
113
3.3.10.1.
BEDINGUNGEN
ZUR
STIMULATION
'
H-ARACHIDONSAEURE-METABOLISIEREN
DER
AKTIVITAETEN
VON
KERATINOZYTEN-KULTUREN
.
113
3.3.10.2.
3
H-HETE-PRODUKTION
VON
KERATINOZYTEN-IMMERSIONSKULTUREN,
VERGLEICH
UNTERSCHIEDLICHER
MEDIEN
.
118
3.3.10.3.
EINFLUSS
DER
ZELLDICHTE
AUF
DIE
'
H-HETE-PRODUKTION
KULTIVIERTER
KERATINOZYTEN
.
122
3.3.10.4.
3
H-HETE-PRODUKTION
ALI-KULTIVIERTER
KERATINOZYTEN
.
123
3.3.10.5.
EINFLUSS
DER
ARACHIDONSAEURE-KONZENTRATION
AUF
DIE
'
H-HETE
PRODUKTION
KULTIVIERTER
KERATINOZYTEN
.
126
3.3.10.6.
FEHLENDER
EINFLUSS
ANDERER
PARAMETER
AUF
DIE
'
H-HETE-PRODUKT
ION
KULTIVIERTER
KERATINOZYTEN
.
128
3.3.11.
ARACHIDONSAEURE-METABOLISMUS
KULTIVIERTER
FIBROBLASTEN
.
128
3.3.12.
'
H-ARACHIDONSAEURE-METABOLISMUS
VON
FIBROBLASTEN-KERATINOZY
TEN-MISCHKULTUREN
.
129
3.3.13.
INKUBATION
VON
MELANOM-ZELL-KULTUREN
MIT
3
H-ARACHIDONSAEURE
.
131
3.3.14.
EINFLUSS
VON
15-HETE
AUF
DIE
EPIDERMALE
3
H-12-HETE-PRODUKTION
.
131
3.3.15.
INKORPORATION
VON
3
H-12-HETE
DURCH
KULTIVIERTE
KERATINOZYTEN
.
.
133
3.3.16.
UNTERSUCHUNGEN
SUBZELLULAERER
FRAKTIONEN
KULTIVIERTER
KERATINOZYTEN
134
3.3.16.1.
SUBZELLULAERE
LOKALISATION
DER
3
H-ARACHIDONSAEURE-OXIDIERENDEN
AKTIVITAET
IN
KERATINOZYTEN-KULTUREN
.
134
3.3.16.2.
UEBERPRUEFUNG
KULTIVIERTER
KERATINOZYTEN
AUF
EINEN
ZYTOSOLISCHEN
INHIBITOR
DER
EPIDERMALEN
'
H-12-HETE-PRODUKTION
.
135
3.4.
12-OXOETE-PRODUKTION
.
137
3.4.1.
HERSTELLUNG
AUTHENTISCHER
12-OXOETE
UND
3
H-12-OXOETE
.
137
3.4.2.
HPLC-REINIGUNG,
LAGERUNGSSTABILISATION
UND
QUALITAETSKONTROLLE
DER
HERGESTELLTEN
3
H-12-OXOETE
BZW.
12-OXOETE
.
142
3.4.3.
12-OXOETE-PRODUKTION
AUS
EXOGENER
ARACHIDONSAEURE
DURCH
SUPRABASALE
EPIDERMISZELLEN
.
144
3.4.4.
EXPERIMENTE
ZUR
EPIDERMALEN
BIOSYNTHESE
VON
12-OXOETE
.
148
3.4.4.1,
KINETIK
DER
EPIDERMALEN
12-OXOETE-PRODUKTION
.
148
3.4.4.2.
EPIDERMALE
BIOSYNTHESE
VON
12-OXOETE
VIA
12-HETE
.
149
3.4.4.3.
EPIDERMALE
BIOSYNTHESE
VON
12-OXOETE
VIA
12-HPETE
.
151
3.4.5.
UEBERPRUEFUNG
VON
12-OXOETE
HINSICHTLICH
PMN-CHEMOTAKTISCHER
AKTIVITAET
.
153
3.5.
12-OXOETE-METABOLISIERUNG
.
154
3.5.1.
INKUBATION
FRISCH
ISOLIERTER
EPIDERMISZELLEN
MIT
3
H-12-OXOETE
.
.
.
154
3.5.2.
INKUBATION
KULTIVIERTER
KERATINOZYTEN
MIT
3
H-12-OXOETE
.
156
3.5.3.
3
H-12-OXOETE/12-OXOETE-METABOLISMUS
VON
PSORIASIS-SCHUPPEN
.
159
3.5.3.1.
EINFLUSS
EINER
ULTRASCHALLBEHANDLUNG
VON
PSORIASIS-SCHUPPEN
AUF
IHREN
'
H-12-OXOETE-METABOLISMUS
.
159
3.5.3.2.
UMSATZ
VON
12-OXOETE
DURCH
PSORIASIS-SCHUPPEN
.
161
3.5.3.3.
VARIATION
DER
KOSUBSTRATE
FUER
DIE
3
H-12-OXOETE-METABOLISIE
RUNG
DURCH
PSORIASIS-SCHUPPEN
.
161
3.5.3.4.
LOKALISATION
DER
3
H-PSO-12-HETE-GENERIERENDEN
AKTIVITAET
IN
PSORIASIS-SCHUPPEN
.
164
3.5.3.5.
INAKTIVIERUNG
DER
3
H-PSO-12-HETE-GENERIERENDEN
AKTIVITAET
.
165
3.5.3.6.
CHIRALITAETS-ANALYSE
DER
3
H-PSO-12-HETE
.
165
3.6.
PHARMAKOLOGISCHE
BEEINFLUSSUNG
DES
ARACHIDONSAEURE-METABOLISMUS
.
171
3.6.1.
EFFEKTE
VON
INDOMETACIN
AUF
DEN
'
H-ARACHIDONSAEURE-METABOLIS
MUS
MENSCHLICHER
EPIDERMISZELLEN
.
171
3.6.2.
EINFLUSS
VON
ANTHRALIN
AUF
DEN
ARACHIDONSAEURE-METABOLISMUS
MENSCHLICHER
EPIDERMISZELLPRAEPARATIONEN
.
173
3.6.3.
EINFLUSS
VON
VITAMIN
D
3
ODER
VITAMIN
D
3
-DERIVATEN
AUF
DEN
3
H-ARACHIDONSAEURE-METABOLISMUS
KULTIVIERTER
KERATINOZYTEN
.
173
4.
DISKUSSION
.
175
4.1.
HINTERGRUND
.
175
4.2.
WIRD
LEUKOTRIEN
B
4
VON
KERATINOZYTEN
GEBILDET?
.
180
4.3.
15-HETE
UND
12-HE1
E-PRODUKTION
ALS
KRITERIUM
FUER
DEN
DIFFE
RENZIERUNGSGRAD
MENSCHLICHER
KERATINOZYTEN
.
193
4.4.
12-OXOETE
-
EIN
EPIDERMALER
ARACHIDONSAEURE-METABOLIT
.
216
4.4.1.
HERSTELLUNG
AUTHENTISCHER
12-OXOETE
.
217
4.4.2.
12-OXOETE-PRODUKTION
DURCH
EPIDERMISZELLEN
.
219
4.4.3.
BIOLOGISCHE
RELEVANZ
DER
EPIDERMALEN
12-OXOETE-BIOSYNTHESE
.
.
.
220
4.5.
METABOLISIERUNG
VON
12-OXOETE
.
224
4.6.
MOEGLICHE
PHARMAKOLOGISCHE
KONSEQUENZEN
FUER
STRATEGIEN
ZUR
AUF
FINDUNG
NEUER
PSORIASIS-THERAPIEN
-
EIN
AUSBLICK
.
229
5.
ZUSAMMENFASSUNG
.
232
6.
ANHANG
.
234
6.1.
ABKUERZUNGEN
.
234
6.2.
STRUKTURFORMELN
.
237
7.
LITERATUR
240 |
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author | Henneicke-von Zepelin, Hans-Heinrich |
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