Aktivierung der Biosynthese von Platelet-Activating-Factor (PAF) in Rinder- und Kaninchen-Alveolarmakrophagen durch Quarzstäube und schwermetallhaltige Stäube:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
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1994
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INHALTSVERZEICHNIS
SEITE
1.
EINLEITUNG
1.1
PLATELET-ACTIVATING
FACTOR:
STRUKTUR,
EIGENSCHAFTEN
1
UND
VORKOMMEN
1.2
PAF
UND
MAKROPHAGEN/MONOCYTEN
3
1.3
PAF
UND
STAEUBE
4
1.4
PAF-BIOSYNTHESE
5
1.5
PAF-ANALYTIK
8
2.
PROBLEMSTELLUNG
19
3.
MATERIAL
UND
METHODEN
3.1
ISOLIERUNG
VON
RINDER-ALVEOLARMAKROPHAGEN
21
3.2
ISOLIERUNG
VON
KANINCHEN-ALVEOLARMAKROPHAGEN
21
3.3
ISOLIERUNG
VON
MENSCHLICHEN
GRANULOCYTEN
AUS
BUFFY
COATS
22
3.4
ZELLKULTIVIERUNG
22
3.5
VITALITAETSBESTIMMUNG
23
3.6
CHARAKTERISIERUNG
DER
ZELLEN
23
3.7
ZELLINKUBATIONEN
'
23
3.8
STIMULANZIEN
24
3.9
HERSTELLUNG
VON
INKUBATIONS
UND
EICHLOESUNGEN
25
3.9.1
FRAKTIONIERUNG
DER
SCHWERMETALLHALTIGEN
STAEUBE
26
3.9.2 SCHWERMETALLBESTIMMUNG
26
3.9.3
HERSTELLUNG
VON
OPSONIERTEM
ZYMOSAN
27
3.10
PROTEINBESTIMMUNG
NACH
BRADFORD
27
3.11
EXTRAKTION
VON
PAF
UND
LYSO-PAF
NACH
CLANCY
UND
HUGLI
28
3.11.1
BESTIMMUNG
DER
WIEDERFINDUNG
VON
PAF
UND
LYSO-PAF
28
3.12
ACETYLIERUNG VON
LYSO-PAF
28
3.12.1
ACETYLIERUNG
MIT
ESSIGSAEUREANHYDRID/PYRIDIN
(
JOUVIN-MARCHE
ET
AL.
,
1984)
28
3.12.2
ACETYLIERUNG
NACH
MASEN
ET
AL.
(1981)
29
3.12.3
ACETYLIERUNG
NACH
HEYMANS
ET
AL.
(1981)
29
3.13
MESSUNG
VON
PAF
UND
LYSO-PAF
MITTELS
THROMBOCYTENAGGREGATION
29
3.13.1
BLUTENTNAHME
30
3.13.2
THROMBOCYTENGEWINNUNG
31
3.13.3
ZELLZAEHLUNG
UND
EINSTELLUNG
DER
THROMBOCYTENZELLZAHL
31
3.13.4
AGGREGATIONSTEST
32
3.13.5
INHIBITION
DER
PAF-INDUZIERTEN
THROMBOCYTEN
AGGREGATION
32
3.14
MESSUNG
VON
PAF
MITTELS
SCINTILLATION
PROXIMITY
RADIOIMMUNOASSAY
(SPRIA)
33
3.15
FLOWCYTOMETRISCHE
MESSUNG
DER
CYTOSOLISCHEN
CALCIUMIONENKONZENTRATION
UND
DES
PH-WERTES
IN
RAM
SOWIE
DER
ZELLVITALITAET
33
3.16
AUSWERTUNG
DER
ERGEBNISSE
34
4.
ERGEBNISSE
4.1
ZELLISOLIERUNG
UND
KULTIVIERUNG
DER
ALVEOLAR
MAKROPHAGEN
UND
DER
MENSCHLICHEN
GRANULOCYTEN
35
4.2
CHARAKTERISIERUNG
DER
STAEUBE
36
4.3
ACETYLIERUNG
VON
LYSO-PAF
37
4.4
EXTRAKTION
VON
PAF
UND
LYSO-PAF
41
4.5
THROMBOCYTENAGGREGATION
44
4.5.1
INHIBITION
DER
THROMBOCYTENAGGREGATION
47
4.6
ZELLINKUBATIONEN
VON
RAM
49
4.6.1
PAF-BILDUNG
DURCH
VERSCHIEDENE
STIMULANZIEN
49
4.6.2
PAF-ABBAU
50
4.6.3
PAF-BIOSYNTHESE
51
4.6.4
FLOWCYTOMETRISCHE
MESSUNGEN
DER
CYTOSOLISCHEN
CALCIUMIONEN
KONZENTRATION
UND
DES
PH-WERTES
IN
RAM
SOWIE
DER
ZELLVITALITAET
55
4.7
ZELLINKUBATIONEN
VON
KAM
57
4.7.1
PAF-BILDUNG
DURCH
VERSCHIEDENE
STIMULANZIEN
57
4.7.2
PAF-ABBAU
58
4.7.3
LYSO-PAF-BILDUNG
IN
KAM
59
4.7.4
AKTIVIERUNG DER
ACETYLTRANSFERASE
63
4.7.5
HEMMUNG
DER
ACETYLHYDROLASE
66
4.7.6
PAF-BILDUNG
IN
KAM
NACH
STIMULATION
MIT
LYSO-PAF
UND
QUARZSTAEUBEN
68
4.7.7
PAF-BILDUNG
IN
KAM
NACH
STIMULATION
MIT
LYSO-PAF
UND
SCHWERMETALLHALTIGEN
STAEUBEN
73
4.7.8
PAF-BILDUNG
IN
KAM
NACH
STIMULATION
MIT
LYSO-PAF
UND
SONSTIGEN
STIMULANZIEN
75
4.7.9
EINFLUSS
VON
CALCIUMIONEN
AUF
DIE
PAF-BILDUNG
IN
KAM
79
4.8
ZELLINKUBATIONEN
VON
GRANULOCYTEN
82
4.8.1
BESTIMMUNG
VON
LYSO-PAF
IN
GRANULOCYTEN
NACH
INKUBATION
MIT
QUARZSTAEUBEN
82
4.8.2
HEMMUNG
DER
ACETYLHYDROLASE
IN
MENSCHLICHEN
GRANULOCYTEN
83
5
DISKUSSION
DER
ERGEBNISSE
5.1
PAF-ANALYTIK
85
5.2
PAF-BIOSYNTHESE
93
5.3 PAF
UND
LYSO-PAF-FREISETZUNG
AUS
RAM
UND
KAM
97
5.3.1
ABSCHLIESSENDE
DISKUSSION
102
6
ZUSAMMENFASSUNG
103
7
LITERATUR
107
8
ANHANG
119
8.1
PUFFERLOESUNGEN
119
8.2
CHEMIKALIEN
121
8.3
VERSUCHSTIERE,
GERAETE
UND
SONSTIGE
HILFSMITTEL
122 |
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