Synthese und Eigenschaften von Thyroxin-Insulin-Konjugaten:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
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1994
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| adam_text | 0 SYNTHESE UND EIGENSCHAFTEN VON THYROXIN-INSULIN-KONJUGATEN VON DER
MATHEMATISCH-NATURWISSENSCHAFTLICHEN FAKULTAET DER
RHEINISCH-WESTFAELISCHEN TECHNISCHEN HOCHSCHULE AACHEN ZUR ERLANGUNG DES
AKADEMISCHEN GRADES EINER DOKTORIN DER NATURWISSENSCHAFTEN GENEHMIGTE
DISSERTATION VORGELEGT VON DIPLOM-BIOLOGIN HEIKE ECKEY AUS ISERLOHN
X|/^L;K* &RA REFERENT: UNIVERSITAETSPROFESSOR DR. RER. NAT. HARTWIG
HOECKER KORREFERENT: UNIVERSITAETSPROFESSOR DR.-ING. HELMUT ZAHN TAG DER
MUENDLICHEN PRUEFUNG: 7. FEBRUAR 1994 VI INHALTSVERZEICHNIS
ZUSAMMENFASSUNG I ABKUERZUNGEN IV 1 EINLEITUNG 1 1.1 INSULIN 1 1.2
THYROXIN UND THYROXIN-BINDENDE PROTEINE 8 2 PROBLEMSTELLUNG 14 3
ERGEBNISSE 16 3.1 DARSTELLUNG VON THYROXIN-INSULIN-KONJUGATEN 16 3.1.1
DARSTELLUNG VON A1,B29-(MSC) 2 -LNSULIN 17 3.1.2 EINFUEHRUNG DER
MSC-SCHUTZGRUPPE IN THYROXIN 20 3.1.3 DARSTELLUNG VON
MSC-THYROXIN-N-OXYSUCCINIMIDESTER 21 3.1.4 EINFUEHRUNG DER
BOC-SCHUTZGRUPPE IN AMINOHEXANSAEURE 22 3.1.5 B1-THYROXYLINSULIN 23 3.1.6
B1-THYROXYLAMINOHEXANOYLINSULIN 23 3.1.7 CHARAKTERISIERUNG DER
THYROXIN-INSULIN-KONJUGATE 26 3.2 RADIOIODIERUNG DER
THYROXIN-INSULIN-KONJUGATE 28 3.2.1 LODIERUNG UND ISOLIERUNG 28 3.2.2
CHARAKTERISIERUNG 30 3.3 INSULINSPEZIFISCHE EIGENSCHAFTEN 33 3.3.1
BINDUNGSSTUDIEN AN REZEPTOREN DER IM-9 LYMPHOCYTEN 33 3.3.2
BINDUNGSSTUDIEN AN DER EKTODOMAENE DES INSULINREZEPTORS ...35 3.3.3
AKTIVITAETSBESTIMMUNG AN ADIPOCYTEN 40 3.3.4 IMMUNOLOGISCHE STUDIEN AN
INSULIN-ANTIKOERPERN 41 3.4 THYROXINSPEZIFISCHE EIGENSCHAFTEN 45 3.4.1
BINDUNGSSTUDIEN AN ISOLIERTEN BINDUNGSPROTEINEN 45 VII 3.4.2
BINDUNGSSTUDIEN AN THYROXIN-BINDENDEM GLOBULIN 48 3.4.3
BINDUNGSVERHALTEN IN HUMANSERUM 56 3.5 BIOLOGISCHE AKTIVITAET IN VIVO 60
3.5.1 UNTERSUCHUNGEN MIT HILFE DER GLUCOSE-CLAMP-TECHNIK 60 3.5.2
HEPATISCHE GLUCOSEPRODUKTIONSRATE UND PERIPHERE GLUCOSEUTILISATIONSRATE
62 3.5.3 KONZENTRATION VON INSULIN UND INSULINANALOGA IM SERUM 69 3.5.4
METABOLISCHE CLEARANCE VON THYROXIN-INSULIN-KONJUGATEN 72 3.6
ZUSAMMENFASSENDE DISKUSSION 74 4 EXPERIMENTELLES 83 4.1 CHEMIKALIEN 83
4.2 GERAETE UND METHODEN 83 4.3 SYNTHESE DER THYROXIN-INSULIN-KONJUGATE
87 4.3.1 DARSTELLUNG VON A1,B29-(MSC) 2 -LNSULIN 87 4.3.2 DARSTELLUNG
VON MSC-THYROXIN 88 4.3.3 DARSTELLUNG VON
MSC-THYROXIN-N-OXYSUCCINIRHIDESTER 88 4.3.4 DARSTELLUNG VON
BOC-AMINOHEXANSAEURE 89 4.3.5 DARSTELLUNG VON B1-THYROXYLINSULIN 90 4.3.6
DARSTELLUNG VON B1-THYROXYLAMINOHEXANOYLINSULIN 90 4.4 MARKIERUNG MIT
125 LOD 92 4.4.1 RADIOIODIERUNG NACH DER LAKTOPEROXIDASE/H 2 O 2
-METHODE 93 4.4.2 BESTIMMUNG DER LODIERUNGSPOSITION 94 4.5
PHOTOAFFINITAETSMARKIERUNG DER EKTODOMAENE DES INSULINREZEPTORS 95 4.6
ELEKTROPHORETISCHE VERFAHREN 96 4.6.1 SDS-POLYACRYLAMIDGELELEKTROPHORESE
96 4.6.2 POLYACRYLAMIDGELELEKTROPHORESE 98 VIII 4.7 PROTEINDETEKTION IN
ELEKTROPHORESEGELEN 100 4.7.1 COOMASSIE-BLUE-FAERBUNG 100 4.7.2
AUTORADIOGRAPHIE 100 4.8 IMMUNCHEMISCHE VERFAHREN 101 4.8.1
RADIOIMMUNOASSAY 101 4.8.2 HOMOGENER ENZYMIMMUNOASSAY 102 4.9
BIOLOGISCHE TESTS IN VITRO 103 4.9.1 LIPOGENESESTIMULIERUNG IN
ADIPOCYTEN 103 4.9.2 BINDUNGSAFFINITAETEN AN REZEPTOREN DER IM-9
LYMPHOCYTEN .... 104 4.10 IN-VIVO-STUDIEN 105 4.10.1 MATERIAL 105 4.10.2
GLUCOSE-CLAMP-EXPERIMENTE 107 4.10.3 BESTIMMUNG DER GLUCOSEKONZENTRATION
IM PLASMA 108 4.10.4 BESTIMMUNG DER KONZENTRATION VON D-[3- 3 H]-GLUCOSE
109 5 LITERATUR 110 6 TABELLENANHANG 122
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